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1、第六章植物胚培养大家好!植物组织培养刘忠德13082772026第六章植物胚培养植物胚培养是指在无菌条件下,对植物的胚及胚器官如子房、胚珠和胚乳进行离体培养的技术。胚培养的类型和意义胚培养的方法常见植物胚的培养本章内容1904年Hanning进行萝卜和辣根菜成熟胚培养(1)了解植物胚培养的类型(2)掌握胚培养的方法和操作步骤(3)了解常见植物胚培养的技术本章教学目的与要求第一节胚培养的类型和意义一、植物胚培养的类型胚培养主要包括成熟胚培养、幼胚培养两类。1.成熟胚培养成熟胚分离出来,进行培养玉米成熟胚的
2、培养霍山石斛的胚剥离的胚胎培养受精后的胚珠培养受精后的子房培养2.幼胚培养包括也可以对未受精的胚珠或子房进行培养,获得单倍体1.克服远缘杂种的不育性远缘杂交,在杂种幼胚发生败育之前取出,进行离体培养,获得杂种植株。2.打破种子休眠在休眠期,取出,离体培养,产生植物。3.提高种子发芽率植物胚珠发育不完全,发芽率极低,胚培养,提高发芽率二、胚培养的意义山楂:自然条件9个月萌发,胚培养48小时萌发。4.克服珠心胚的干扰植物具有多胚现象,不定胚使合子胚发育受阻,影响杂交育种效率,合子胚分离培养,提高育种效率。5
3、.诱导胚状体及胚性愈伤组织利用幼胚等离体培养,产生次生胚状体,和胚性愈伤组织。6.种子生活力测定木本植物种子,层积处理后,胚离体培养,测定生活力。魔芋胚状体柑橘:珠心组织发生多个不定胚。胚状体与合子胚的比较:合子胚胚状体质量萌发率高,质量好萌发率低,质量差来源受精卵胚体细胞胚柄有,明显即使有也不明显形态固定,体积相对较小复杂,常有两个以上的子叶,体积较大变异率低高;胚状体可以制成人工种子,便于运输和保存!人工种子视频第二节胚培养的方法主要介绍成熟胚培养方法幼胚培养方法子房培养方法胚珠培养方法胚乳培养方
4、法胚的发育一、成熟胚培养方法1.成熟胚培养:在无菌的条件下,采用人工的方法将成熟胚分离出来,进行培养,让其进一步生长发育,以至形成幼苗的过程。18世纪,胚种植在土壤中,萌发.1890年营养液研究离体胚培养1904年Hanning进行萝卜和辣根菜成熟胚培养2.成熟胚培养的目的(1)研究种子萌发时胚乳与胚的关系(2)胚乳对幼苗初期生长的营养作用(3)研究成熟胚生长发育过程的形态建成(4)各种生长物质对形态建成的影响(5)打破种子休眠,缩短育种周期3.成熟胚培养的程序(1)选果实或种子作为外植体(2)表面消毒
5、(3)无菌条件下切开果实,取出种子(4)胚的剥离(5)培养基培养:MS、White培养基。4.成熟胚培养条件下(1)因成熟胚本身含有较多的营养条件,对培养基要求不高(2)只含有大量元素和糖的培养基上,便可萌发成苗(3)多数植物成熟胚的生长以12h/天光照为宜。牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖Matureembryocultureandrapidpropagationoftreepeony牡丹成熟胚的离体培养以‘凤丹白’成熟胚为外植体结果表明:(1)打破成熟胚休眠最适宜的预处理是4℃沙藏。(2)成苗培养时的
6、最佳的培养基是MS+6-BA0.2mg/L+IBA1.0mg/L。(3)最适宜的生根培养基是MS+IAA1.0mg/L。幼胚培养:在无菌的条件下,将未成熟胚分离出来,进行培养发育,以至形成幼苗的过程。二、幼胚培养方法:1933年Tukey进行桃、梨幼胚培养获得成功取子房常规表面消毒解剖镜下,取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。固体培养基培养1、幼胚培养过程:植物胚胎发生过程:原胚-球形胚-心型胚-鱼雷胚-子叶胚胚发育视频球形胚前期心型胚前期鱼雷胚球形胚胚的发育程度与胚的萌发成活率呈正相关胚的剥离以受精后35天
7、左右为宜.心型胚、鱼雷胚较好(1)培养基A、无机盐:a幼胚培养有MS、B5等培养基,可使K+、Ca2+水平稍高。2、影响胚培养的因素糖的作用:调节渗透压;碳源;防止幼胚早萌。渗透压的保持对于幼胚培养相当重要。最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而降低。B、碳水化合物:成熟胚一般不需要外源激素即可萌发。但激素能促进休眠胚的萌发。幼胚需要外源激素,应保持外源激素与内源激素的平衡。过低则不能促进生长,过高则易导致幼胚脱分化形成愈伤。C、植物激素的作用:银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用(1934);曼佗罗幼胚培养中
8、发现添加椰子乳能很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚)(1941)。此外,大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。D、天然提取物及某些蛋白制品A、温度:多数为25-30℃,因植物种类有所差别。B、光照:一般认为黑暗或弱光条件较为合适。(2)环境条件3、胚柄A在幼胚培养中,带有胚柄结构有利于幼胚的生长。B但一般较难与胚一起分离出来。4、幼胚的发育方式:(1)胚性发育:幼胚接种培养基,发育成成熟胚.(2)早熟
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