黑麂耳成纤维细胞培养及异种重构胚构建

《黑麂耳成纤维细胞培养及异种重构胚构建》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2007,15(2):228~232·研究论文·黑麂耳成纤维细胞培养及异种重构胚构建*1111121方俊顺**,陶勇**,章美玲,刘健明, 韩伟, 张志忠, 章孝荣***（1.安徽农业大学动物科技学院，合肥230036；2.安徽省合肥野生动物园，合肥230061）摘要：黑麂()是我国特有的珍稀濒危物种。采用组织块贴壁法获得了纯化的黑麂耳成纤维细胞。用3种不同的培养液（DMEM（低糖）、DMEM（高糖）和RPMI1640）对第3代细胞进行培养，结果细

2、胞群体倍增时间相近，DMEM（低糖）的培养效果稍好。以黑麂耳成纤维细胞为核供体，以山羊和兔卵母细胞为胞质受体，通过核移植构建异种克隆胚，囊胚率分别为0和11.5%，结果表明两种胞质受体均能支持黑麂耳成纤维细胞核的重编程，但重构胚的发育能力有所差别。关键词：黑麂；耳成纤维细胞；细胞培养；异种克隆中图分类号：S185文献标识码：A 文章编号：10061304(2007)02022805CultureofFibroblastCellsandInterspeciesEmbryos ReconstructioninBlackMuntjac1

3、1111FANGJunshun ,**TAOYong **,ZHANGMeiling ,LIUJianming ,HANWei , ZHANGZhizhong 2,ZHANGXiaorong 1*** Theblackmuntjac()isacriticallyendangeredmammalianspeciesthatisconfinedtoanarrowregionofsoutheasternChina.Thepresentstudyculturedthehomogeneousearfibroblastcelloftheend

4、angeredblackmuntjac.Thepopulationdoublingtimeofsubculturecellsinthreedifferentculturemedia,DMEM(lowglucose),DMEM(highglucose)andRPMI1640,wasnotsignificantlydifferent,butDMEM(lowglucose)wasmoreefficientforthegrowthofthecells.Theinterspeciesem bryoswerereconstructedusin

5、gthefibroblastsofblackmuntjacasdonorsandenucleatedrabbitorgoatoocytesasrecipients.Theblastocystrateswere0and11.5%respectively.Theresultsdemonstratedthattwocytoplastscouldsupportreprogrammingtheearfibroblastsofblackmuntjac,butthedevelopmentalpotentialofthereconstructed

6、embryoswasdifferent.blackmuntjac;earfibroblast; culture;interspeciessomaticcellnucleartransfer黑麂（）是我国特有的珍稀平的研究表明雄性黑麂有两条Y染色体（段幸生濒危动物，仅分布于安徽、浙江、江西和福建4省，属等，1981）。黑麂在性别分化过程中究竟是哪条染色国家一级保护动物。由于其分布区狭小，活动隐蔽，体起作用，对性别起关键作用的基因位于哪条胆小性躁而难以驯养，其自然种群数量日益稀少，已染色体上，麂亚科动物的染色体进化机制是什么？这处于濒

7、临灭绝的境地（盛和林，1987；吴海龙等，些问题至今都没有统一的认识。黑麂的研究对于动2003）。为了加强对黑麂的保护，世界自然保护联盟物物种进化和此类野生珍稀动物的繁殖，具有重要(IUCN)将其列为易危种，濒危动植物种,国际贸易公的理论和实践意义。传统的保护动物遗传资源的方约(CITES)将其列入附录I中。此外，黑麂在遗传学法是活畜保种，但是，近几年来，随着体细胞克隆技上具有重要的研究价值。雄性黑麂有9条染色体术的发展和日趋成熟，保存动物体细胞作为动物遗(2 =9)，雌性黑麂有8条染色体（2 =8），细胞学水传资源保护的一种新方

8、法，日益受到人们的重视（吴*基金项目：校长青年基金、安徽省“十一五”科技攻关和安徽省优秀青年科技基金(No:06041081）资助。**同等贡献作者。***通讯作者。Authorforcorrespondence..教授，博士生导师，主要从事动物胚