提取条件对绿豆皮叶叶绿素提取效果影响.pdf

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1、第9期总第255期农业科技与装备No．9TotalNo．255至Q!曼±竺旦垒墨叵!旦!坐鲤墨!i曼些呈壁!旦里丛竺!旦段塑曼里g旦玺望堡堕兰望：兰Q!墨提取条件对绿豆皮叶叶绿素提取效果影响吴兴壮，张华，张晓黎，付欣(辽宁省农业科学院食品与加工研究所，沈阳110161)摘要：为探讨提取条件对绿豆皮叶叶绿素的提取效果，以烘干的绿豆皮叶为原料，以叶绿素含量作为评价指标，通过单因素试验研究提取溶剂、料液比、提取温度、提取时间和提取次数对叶绿素提取效果的影响。结果表明：以95％乙醇为提取溶剂，料液比为l：5，提取温度50℃，提取时

2、间2h，叶绿素含量最高。关键词：绿豆皮叶；叶绿素；提取条件；温度中图分类号：TS264．4文献标识码：A文章编号：1674一1161(2015)09-0050-03叶绿素及其衍生物有降低胆固醇、改善便秘、脱臭、抗衰老、补血、活化细胞、促进造血、抗菌、消炎等功效，可有效抑制多环芳烃类的诱变作用，广泛应用于医药、食品、日用化工等领域。绿豆皮叶成本低廉、取材容易，是良好的天然绿色素资源。作为一种世界名菜，绿豆皮随着国际市场需求量的不断增加，国内栽培面积不断扩大。导致绿豆皮废弃物——叶资源极其丰富。然而，目前绿豆皮叶少部分被用作饲

3、料外，绝大部分以垃圾形式扔掉．造成极大的资源浪费和环境污染，故对其进行开发研究具有良好的应用前景。以绿豆皮叶为原料，探讨提取溶剂、料液比、提取温度、时间和次数对叶绿素提取效果的影响，并取得了良好的效果。1材料与方法1．1试验原料以60℃烘干的绿豆皮叶为原料。蒸馏水、95％乙醇、丙酮、石油醚、正己烷均为分析纯。1-2仪器设备分析天平：北京赛多利斯仪器有限公司。电热恒温水浴锅：江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司。UV一1200型紫外可见分光光度计：上海美普达仪器有限公司。酒精计：沈阳精密仪器有限公司。1．3试验方法1．3．1试验

4、原理叶绿素能够溶解在有机溶剂中。绿豆皮叶粉碎后加人有机溶剂，以适当的料液比，在适宜恒温水浴提取一定时间和次数：将过滤后提取液合并，用分光光度计测定吸光值，计算叶绿素含量，确定叶绿素提取工艺参数。收稿日期：2015—09—12作者简介：吴兴壮(1975一)，男，副研究员，从事农产品加工方面的研究。1．3．2叶绿素提取工艺流程有机溶剂I干绿豆皮叶一浸提一热滤一冷滤—合并滤液一浓缩一糊状叶绿素一检测tI置一定温度滤渣1．3．3单因素试验分别以提取溶剂、料液比、提取温度、时间和次数为考察对象，进行提取叶绿素单因素试验．根据的吸光值

5、分析各因素对叶绿素提取效果的影响。1．3．4吸光度值的测定用UV一1200型紫外可见分光光度计测定吸光度，根据吸光度值变化情况，确定提取叶绿素的最优条件。1．3．5叶绿素含量测定准确称取3种干燥方式的绿豆皮叶各5g，以80％丙酮为提取剂，料液比1：5，采用恒温水浴50。C提取3h。浸提结束后，经热滤、冷滤2次过滤，吸取滤液0．1mL至100mL容量瓶，用80％丙酮定容，以80％丙酮作参比液。分别在645nm和663am处测定样品吸光值。并按下列公式计算叶绿素含量：Ca=C．+Cb(1)Ca=(12．7A663-2．69A6

6、45)v／1000m(2)Cb=(22．9A645-4．68A鳓)v／1000in(3)式中：ca为叶绿素a含量，mg／g；Cb为叶绿素b含量，ms／g；CT为总叶绿素含量，ms／g；A663为叶绿素溶液在波长663nm处的吸光度；A∞为叶绿素溶液在波长645nln处的吸光度；V为提取液体积；肘为样品质量。2结果与分析2．1提取溶剂对叶绿素提取效果的影响分别取粉碎40目的绿豆皮干叶5g．用25mL不同有机溶剂在50℃恒温水浴提取2h，经热、冷过滤2015年第9期吴兴壮等：提取条件对绿豆皮叶叶绿素提取效果影响51后，滤渣再用

7、25mL对应有机溶剂同温提取2h。合并两次滤液，吸取0．1mL至100mL容量瓶，用丙酮。：定容，在645nIn，663nnl波长下测叶绿素吸光度，结睾。。果见图1。图1中，石油醚一乙醇一95％K,醇：石油醚=2：商151。娄10f_．1．_．_．98j6乙醇丙酮石油醚一乙醇正己烷不同提取溶剂图1不同提取溶剂提取绿豆皮叶绿素含量Figure1ChlorophyHextractingcontentofgreenbeanskinindifferentextractingsolvent由图l可见，丙酮的提取效果最好，石油醚一乙醇

8、混合溶剂和95％乙醇提取效果次之，正已烷的提取效果最差。由于丙酮毒性较大，危险性高，实际生产中很少用丙酮作为提取剂。石油醚一乙醇混合溶剂和95％乙醇提取效果相差不大，但石油醚对眼睛、粘膜和呼吸道有刺激性，且价格高于95％乙醇。从使用安全、价格低廉、沸点适中、便于回收利用等方面综合考虑，以95％K,醇为提