植物组织培养考试重点.doc

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1、植物组织培养考试重点第一章1植物离体培养：通过无菌操作，把植物细胞或具他类型的外植体，接种于人工配置的培养基上，给予人T控制的环境条件，使培养或操作对象表现生长发育等生命活动。2细胞全能型：细胞具有该有机体的全部遗传信息，并具有形成令机体所有细胞类型的能力。3园艺植物生物技术的应用领域一在细胞工程的应用；1良种繁育，使繁殖系数大，周年生产，繁殖速度快，苗木整齐一致。2离体种质保存，克服常规保存方法占用大量土地或消耗人量人力物力等缺点，并方便种质资源的地区和国际交换，避免病虫的人为传播。3细胞工程育种，培育园艺新品种，克服远缘杂交育种障碍。4有川物质的生产，人规模的细胞发酵罐培养生产药物

2、，食品，调料香精等LI用化T品。二基因T程运用：作为园艺作物改良的有效于段么一。三：分子标记运用，加快育种速度，降低选育种的成本，有效提高品种改良的成效。四：在植物学基础研究上的丿应用：进行遗传多样性的分析，系谱分析，基因表达及调控的研究等。4细胞脱分化：指外植体屮已分化的细胞，在切剤损伤和培养物内外因素作用下，逐渐丧失其原有的分化了的结构和功能，合成代谢变得旺盛，细胞壁山厚变薄，细胞内部结构发牛变化，细胞高度液泡化，冋复到分牛组织状态，形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。5器官分化：指培养条件下的组织或细胞团分化形成不定根，不定芽等器官的过穆。6胚胎发生：指从合子到成熟胚的发生发育过

3、程，所形成的的胚称为合子胚。7.离体胚胎发生和器官发生有何异同：自然条件下的器官分化是受植物体木身的自生调节控制，而在离体培养条件下，器官分化则是在人工辅助条件下完成的，有3个生长阶段，第一，外植体经过诱导形成愈伤组织。第二，形成生长小心（也成为拟分生组织）。第三，器官原基及器官形成、体细胞胚是离体培养的产物，体细胞胚起源于非合子细胞，体细胞经丿力了胚胎发育过程，与器官发生形成个体的途径不同。第二章外植体：用于接种培养的各种离体的植物材料，包括胚胎材料，各种器官，组织，细胞，原生质体等。1•外植体的类型茎尖（最常用的材料。生长速度快，繁殖率高，不易产生遗传变异。）节间部（新梢节间容易灭

4、菌，脱分化再分化能力较强）叶和叶柄（取材容易，新出叶片杂菌较少，实验操作方便。）鳞片（水仙、百合、葱、蒜、风信子经常以鳞片为材料。）其他（种子、根、块茎、块根、花球、花粉）2.外植体的选择原则1.再生能力强2.遗传稳定性好3.外植体来源丰富4.外植体灭菌容易3•外植体的选择依据1.植物的种类和基因型2.外植体来源3.外植体人小4.取材季节5.外植体的生理状态和发育年龄4.外植体的预处理及消毒1.减少带菌的处理（在长期晴朗的天气条件下取材、选择信么萌发的幼芽或嫩梢、选择表血比较光滑的材料、对母株定期喷洒杀菌药剂、用纸袋或薄膜袋将枝条封套保护待其萌发新芽后取材、在室内采用水插粗芽后取材，或

5、是在温室植株上取材等，都可以人人减少处事戴菌量。对一些戴菌量较人的植物，如茎尖，从室外取冋经剪截处理后，置于烧杯内，杯口川纱布封好，置于水龙头下流水冲洗过夜）2.消毒剂的杀伤力和材料对消毒剂的耐受力（不同消毒剂种类杀伤力不同，不同的外植体材料对同种消毒剂的耐受力也不同。选择消毒剂时，尽可能选用对微牛物消灭作用强烈而对植物材料比较安全的种类。在选择外植体材料时，则应优先考虑体积较人戴菌暈较少耐受力较强的类型。对于坚硬致密的外植体材料，如枣核，可采川渗透力较强的消毒剂，如75%的酒精百接进行表血消毒，或用0.1%氯化汞消毒10分钟或更长时间。）3.清洗的重要性（外植体经消毒后，必须用无菌水

6、洗去残存的消毒剂，否则会对外植体造成长期伤害，尤其是氯化汞，应清洗多次，去除表血的汞离子）5.褐变外植体接种后，于伤口处发生褐化，产生褐色物质，不仅使培养基变褐，而且可能造成外植体死亡，或严重抑制外植体脱分化再分化。6.外植体褐变原理褐变包括酶促褐变和非酶促褐变，口前认为植物组织培养屮以酶促褐变为丄，多酚氧化酶（PP0）是植物体内普遍存在的一种末端氧化酶，它催化酚类化合物形成醞和水，服在经非酶促聚合形成深色物质，对外植体材料产生毒害作用，影响其生长分化，严重时导致其死亡。7.防止褐变的措施1.选择适宜的外植体2.预处理母株和外植体3.筛逸适宜的培养基和培养条件4.添加褐变抑制剂和吸附剂

7、5.连续转移&培养基的基木成分1•水2.无机营养成分A人量元素（氮磷钾钙镁硫）B微量元素（铁硼镭锌铜釦钻氯）3.有机营养成分（碳水化合物、维生素、肌醇、氨基酸）4.植物生长调节剂A生长索类（□引味乙酸IAA蔡乙酸NAAU引味丁酸IBA2,4-D等，活性强度2,4-D>NAA>IBA>IAA）B细胞分裂索类C其他类（赤霉素、脱落酸、多效卩坐）5.琼脂6.活性炭与硝酸银7.抗氧化物8.染色剂9.抗生索9•培养基的类型1.高盐型培养基（MS培养基是使