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1、植物组织培养教案——常见观赏植物的组织培养课程植物组织培养200/200学年第一学期教师授课日期班级课题：常见观赏植物的组织培养教学目标：了解常见观赏园艺植物非洲菊、大花蕙兰、百合、藏衣草、红叶石楠等植物植物组织培养概况、培养程序。重点难点：非洲菊、大花蕙兰、百合、薰衣草、红叶石楠等观赏植物组织培养技术。教学方法：课堂讲授教具：多媒体教学教学参考书：《植物组织培养》课后作业：1、非洲菊在增殖培养阶段易产生过密的丛生芽，如何降低丛生芽密度，以减少生产损失？2、大花蕙兰固体培养屮常发生褐化现象，如何减轻褐化发生？：人百合离体培养
2、可通过哪些途径再生植株？4、薰衣草离体培养过程屮发生玻璃化现象，如何减轻玻璃化现象发生？5、红叶石楠离体培养过程屮较难生根，查阅相关研究资料，I叫答实践屮采川了哪些技术措施以提高生根率？教学札记:编写LI期:教案附页一、非洲菊的纟R培培养（一）国内外研究概况非洲菊（GerberajamesoniYBolus）又名扶郎花，为菊科非洲菊属多年生宿根草木花卉，其花大、色艳、品种繁多，是国际著名五大鲜切花品种么一，在我国的需求量口益增加。非洲菊为异花授粉植物，自交不孕，有性繁殖易产生分离，无性分株繁殖系数低（一般为5-6）,难于满足
3、生产需求，且分株繁殖代数越多，品种会逐渐退化。因此，组织培养为非洲菊的主要繁殖方式,可在短期内大量生产优质种苗，亦可用于生产脱毒苗，防止种质退化。非洲菊离体再生一般有愈伤组织再生途径及器官冇接发生两条途径。主要通过愈伤组织再生途径。国外对非洲菊的组织培养研究得较早。Pierik等（1973）首先报道了用花托和花萼诱导出愈伤组织；国内黄济明等（1983）最早以花托为外植体诱导出幼苗。冃前非洲菊纽织培养主要以花托、叶片为外植体诱导从生芽发生，以贞他器官为外植体培养的报道较少。以花托作外植体诱导愈伤组织与不定芽形成，具有易表面灭菌
4、、愈伤组织诱导的速度快、分化率高、繁殖系数大等特点。关于非洲菊组织培养研究国内外有不少报道，对其愈伤诱导、不定芽分化、继代增殖与生根等作了较详细的研究。已建立了非洲菊的组织培养工厂化育苗生产体系，并实现了商品化生产。周仁超（2001）在附加6-BA、NAA、IBA各lmg/L的MS培养基中诱导出叶片的愈伤组织，并在18天后出现了芽的分化，后转入附加BA2.5mg/L>IAAO.8mg/L的MS培养基中增殖，20天后增殖系数达8.8,转接到1/2MS+NAAO.3mg/L培养基中10天后有根的形成;杨桂芬等（2000）研究认为
5、：有利于生根的增殖培养中分裂素和生长素的浓度都应当相对较低，最适宜组合BAO.l-0.5mg/L.NAA0.01-0.05mg/Lo非洲菊的生根对生长素浓度适宜范围较宽，认为不添加任何生长素，生根效果也较好。非洲菊的纟R织培养一般采用MS为基木培养基，生根时常用1/2MS培养基为基木培养基。光照时间12-14h,光照强度1500-2000LX,蓝光有利其诱导愈伤组织，26°C左右时增殖率高。pH6.2-6.8时产生的愈伤组织结构致密，pH低于5.4或高于8.0时产生的愈伤组织松散。非洲菊在增殖培养阶段易产生过密的丛匸芽,这是
6、非洲菊生产屮的一个及待解决的主要问题,在微繁生产屮导致超过30%的产品损失。可采用降低细胞分裂素浓度、添加适彊GA到增殖培养基屮等方法，降低丛生芽密度，以减少生产损失。（一）培养程序1>外植体选择从生长健壮的非洲菊植株上采取花托、叶片等作外殖体。外植体的表血灭菌将幼嫩花托等外植体于取材当I」用饱和洗涤液浸泡5—lOmin,用
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8、来水冲洗20—30min除去表血污物，然后在无菌状态下用70%酒精浸泡30S,无菌水冲洗一次，再用0.l%HgCL2浸泡6—7min,故后用无菌水冲洗3-4次，每次l-2min,滤干水分，以备接种。
9、2、培养基与培养条件启动培养基：MS+6-BA4.0-5.Omg/L+IBAO.25-0.5mg/Lo分化培养基：MS+6-BA2.0-3.0mg/L+IBAO.25mg/Lo增殖培养基：MS+6-BA3.0mg/L+1BA0.25mg/L+GAO.5mg/L。生根培养基：1/2MS附加NAAO.lmg/L或IBAO.1-0.5mg/L或TAAO.5-1.0mg/L。培养条件：温度（23土1）°C,光照1500-2000LX,光照时间：12-14h/d。无菌材料的获得在无菌条件下，将花托等外植体切成3-5mm的小方块，接种于
10、愈伤组织诱导培养基中。在培养15-20d时，外殖体有明显膨胀，60-80d出现小块愈伤组织，实验表明：在MS+6-BA4.0-5.0mg/L+TBAO.25-0.5mg/I,培养基屮形成愈伤组织早。表明衣附加较高浓度BA的MS培养基上愈伤组织诱导效果好。3、不定芽分化与增殖培养将愈伤组织切
