植物组织培养复习重点

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1、考试重点（大部分是课后作业）：题型：填空，判断，名词解释，问答（1）植物组织培养的广义和狭义概念？答：广义概念是指对植物的器官，组织，细胞及原生质体进行离体培养的技术。狭义概念是指对植物的组织（如分生组织，表皮组织、薄壁组织等）及其培养产生的愈伤组织进行离体培养的技术。（2）植物组织培养分类及其主要特点？答：根据外植体来源和培养对象不同，植物组织培养的研究类型可以分为5种，分别是器官培养，组织培养，细胞培养，胚胎培养，原生质体培养。主要特点：⑴无菌条件；⑵成分完全确定的人工培养基；⑶起始材料处于离体状态；⑷克隆；⑸组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层，且气孔都是张开的；⑹环境温度、光

2、照强度和时间等都是人为设定的；（3）植物组织培养的应用及展望？答：应用：植物离体快繁，无病毒苗木培育，培育新品种或创制新品种，次生代谢物生产，种质资源保存及制作人工种子。展望：组培容器大型化，组培技术简单化，组培环境自然化（4）细胞全能性、脱分化、再分化概念？答：细胞全能性：离体细胞在适当条件下分化形成再生植株的能力。脱分化：也称去分化，是指在离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。再分化：是指离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类

3、型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株的过程。（5）植物激素配比模式？答：生长素/细胞分裂素：高有利于根的形成；中无定向结构生长；低有利于芽苗生长；（6）体细胞胚胎发生的概念、方式、机理和特点？答：概念：植物离体培养细胞产生胚状体的过程。方式：直接途径：从外植体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎。间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织，再从愈伤组织的某些细胞分化出体细胞胚胎。机理：特点：①双极性；②（与母体组织或外植体的维管束系统无直接联系，处于较为孤立状态，）即存在生理隔离。*（7）胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别。　答：①最根本的特征是具有两极性，即在发育的早期阶段

4、，从其方向相反的两端分化出茎端和根端，而不定芽和不定根都为单向极性。②胚状体的维管组织与外植体的维管组织无解剖结构上的联系，而不定芽与不定根往往总是与愈伤组织的维管组织相联系。③胚状体的维管组织的分布是独立的“Y”字型，而不定芽的维管组织无此现象。（1）详细叙述影响植物离体形态发生的因素。Ｐ５１答：①外植体：类型，部位，时期②培养架种类③激素：种类，浓度，配比④添加物：种类，浓度⑤糖：种类，浓度⑥pH偏酸/偏碱⑦温度：高温低温，恒温变温⑧光照：光培养/暗培养光照培养，光质⑨培养方式：固体/液体，震荡/静置（2）什么是母液法？答：将培养基中各种成分按原量一定倍数称量配成浓度缩液的方法。（

5、3）培养基的配方是MS＋6-BA0.5mg/L＋IBA1.0mg/L＋2.5%糖+0.7%琼脂，要配制1000mL，MS母液的浓度分别是：大量元素20倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物50倍，6-BA1.0mg/mL，IBA0.1mg/mL。要吸取各种母液各多少mL？糖和琼脂各称取多少克?答：大量元素：１０００／２０＝５０ｍＬ　　　微量元素１０００／５００＝２ｍＬ　铁盐：１０００／１００＝１０ｍＬ　　　　　有机物：１０００／５０＝２０ｍＬ６－ＢＡ：（１０００ｍＬ×０.５ｍｇ／Ｌ）／１.０ｍｇ／ｍＬ　＝０．５ｍＬＩＢＡ　：（１０００ｍＬ×１．０ｍｇ／Ｌ）／０．１ｍｇ／ｍＬ　＝１０

6、ｍＬ（4）组织培养的基本步骤？P18答：各种玻璃器皿的洗涤和灭菌，培养基配置和灭菌，无菌室消毒及接种操作、材料培养等。（5）植物组织培养主要问题及防治措施？P164答：A污染，在组培过程中，由于真菌、细菌等微生物的侵染，在培养基容器中滋生大量菌斑，使培养材料不能正常生长和发育的现象。防治措施：①灭菌前充分排尽灭菌锅内冷空气；②接种器具每次使用后应用酒精灼烧或灭菌器灭菌；③污染的外植体材料应及时淘汰，如果种源有限，可对外植体材料进行二次消毒；④控制环境湿度；⑤操作人员用75%酒精拭手和培养瓶；⑥接种环境定期熏蒸；B玻璃化，外植体含水量增加导致畸形生长缓慢甚至死亡。防治措施：①提高培养基硬

7、度，降低培养基水势；②提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，降低培养基渗透压；③减少培养基中含氮化合物，生长调节物质的用量；④增加光强，适当降低培养温度，并进行昼夜变温处理；⑤减少抗生素和添加物的使用；C褐化，多酚氧化酶被激活使酚类物质氧化产生棕黄色的醌类物质慢慢扩散到培养基中毒害外植体造成生长不良甚至死亡。防治措施：①外植体应具有较强的分生能力；②选择适宜培养基，调整激素用量；③控制温度和光照，在不影响正常生长和分化的前提下，应降温减少光照；④培