凡纳滨对虾HSP10基因序列与低温表达分析.pdf

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1、南方农业学报JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE2013，44(5)：838—843ISSN2095—1191：CODENNNXAABhttp：／／wnuw．nfnyxb．CBDOI：10．3969／j：issn．2095—1191．2013．5．838凡纳滨对虾HSPl灌因序列与低温表达分析彭金霞，韦嫔嫒，殷勤，蒋小珍，黎铭，陈晓汉+(广西水产研究所／广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，南宁530021)摘要：【目的】克隆分析凡纳滨对虾HSPlo基因，为研究其在寒冷耐受过程中

2、发挥调控功能提供参考依据。【方法】搜索EST库获得凡纳滨对虾HSPlD基因序列，再通过RACE．PCR扩增获得凡纳滨对虾HSPl0基因cDNA全长序列，对其进行生物信息学分析，并通过荧光定量PCR分析HSPlO基因的组织表达及低温胁迫下表达量的变化。【结果】凡纳滨对虾HSPlO基因cDNA全长720bp，包含306bp的开放阅读框，编码102个氨基酸。以各物种的HSPIO蛋白序列构建系统进化树，能较好反映各物种间的进化关系。荧光定量PCR分析结果显示，凡纳滨对虾HSPIOmRNA在各组织中呈遍在表达

3、，其中以肌肉中的表达量最高。低温表达谱分析结果显示，凡纳滨对虾HSPIOmRNA在低温处理凡纳滨对虾的各组织中均呈下调表达，当处理温度降至13*C，其在肝胰腺中表达量降至最低。【结论】凡纳滨对虾HsPJ佣E结构和进化上较保守，其mRNA表达量在低温胁迫下呈下降趋势，可能在寒冷耐受过程中发挥负调控作用。关键词：凡纳滨对虾；热休克蛋白；HSPIO基因；低温；表达量；荧光定量PCR中图分类号：$945．46文献标志码：A文章编号：2095一1191(2013)05—0838—06SequenceofHSP

4、IOgeneinLitopenaeusvannmeianditslowtemperatureexpressionanalysisPENGJin—xia，WEIPin—yuan，YINQin，JIANGXiao—zhen，LIMing，CHENXiao-han+(GuangxiKeyLaboratoryofAquaticGeneticBreedingandHealthyAquaeuhure／GuangxiInstituteofFisheries，Nanning530021，China)Abstract

5、：【Objective]HSPl0genewasclonedandstudiedtoprovidereferencesforitsregulationfunctionincold—resis-tanceduration．【Method]ESTdataminingandRACE-PCRwereusedtogetthewholelengthcDNAofLvHSPl0，andbio—in—formationmethodswereappliedtoanalyzethecDNA．LvHSPIOmRNAexpr

6、essionindifferenttissuesundercoldstresswerestudiedusingreal-timePCR．【Result]TheLvHSPIOcDNAwas720bplongcontaininga306bpORFwhichencodeda102Aapeptide．PhylogenetictreebasedonLvHSPIOaminoacidsequencescouldreflecttheevolutionrelationsamongvariousvari—eties．R

7、eal-timePCRresultsshowedthatLvHSPIOmRNApreferablyexpressedinalltissuesandmainlyexpressedinmuscle．Accordingtotheresultsfromlow-temperatureexpressionprofilesanalysis．theLvHSPl0mRNAwasdownregulatedinaUtis—suesofLitopenaeusvannmei，andwhenthetemperaturedesc

8、endedto130C，itsexpressionwasthe10west．【Conclusion]LvH—SPl0inLitopenaeusvannmeiwasconservedingenestructureandevolutionrelationship，anditsmRNA，whichwasonthedownsideincoldstress，mightnegativelyregulateincoldtolerance．Keywords：Litopenaeusva