植物组织培养实验.doc

《植物组织培养实验.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、植物组织培养实验室基本设备：超净工作台；培养室、；洗涤、消毒室，卧式高压消毒锅；温室（培养大棚）；常用仪器：1.蒸幅水器（学习操作），2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作），3.天平：⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵分析天平（精密度1/10000）,4.超净工作台（学习、使用、操作），5.电热干燥箱（烘箱），6.恒温光照培养箱（学习、操作），7•电冰箱，8.显微镜和解剖镜：①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜，9.旋转培养机，10.离心机（学习、使用、操作）,11.酸

2、度测定仪：⑴精密PH4-7试纸；⑵笔型袖珍酸度计。必要的器皿：（一）玻璃器1111：1.培养器血：①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养川L⑤扁身培养瓶⑥L型和T型管⑦凹面载玻片，2.盛装器川L：①试剂瓶②烧杯，3.计量器肌①量筒②容量瓶③吸管，4.其它器1111滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器111U（二）金属器械：1.IIT类：①20-25cm长型银了（接种或转移愈伤组织）②尖端弯1111“枪型”银了（银取较小的植物组织）③尖头钟表银子和鸭嘴银子（剥离表皮用）④尖端为小铲状锻子（挖取带

3、琼脂培养基的培养物），2.解剖刀和刀类：①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织屮小细胞团）②解剖刀（手术刀）③双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖丿U）④锋利小刀、大刀和小铁锹，3.剪刀类：①解剖剪②眉剪③眼科剪④18-25cm弯头剪⑤修枝剪，4.接种针。几种常用药剂的配制：（-）用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。学习配制70%和75%酒精。（二）消毒剂120%次氯酸钠溶液:称取20g次氯酸钠用少许水溶解,100ml水定容。2.0.1%升汞（HgCI2）溶液:称取O.lgHgCI2少许水溶解,100ml水定容。（三）洗

4、涤剂4.2HCI酒精：95%酒精100ml加入2mlHCI,2.硫酸一重锯酸钾洗液：取10g重倂酸钾加入蒸馅水90ml,加热溶解冷却麻，逐渐加入浓硫酸175ml,放入棕色玻璃瓶备用，（注意：切记不可将盛过洒精，甲醛等原剂的药品玻璃器川L真接泡入洗液在，因为重倂酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，失去洗涤作用）。这些器1UL必须用白来水冲洗干净并晾干再浸入洗液。（四）1摩尔浓度（mg/L）NaOH和1摩尔浓度（mg/L）HCI配制。摩尔浓度是指用1升（1000ml）溶液屮所含溶质的分了量数来表示的溶液的浓度。用M表

5、示。1.NaOH摩尔浓度（M）NaOH摩尔质量二分子克数=40gIMNaOH是指1000ml溶液中含有40克摩尔质量的NaOH,现要配制100ml（0X0.1=4g）称取NaOH4g,用少量水解,定容至100ml.2.HCI的摩尔浓度具体配制酸的mol浓度时，应考虑原浓酸的比重mol浓度。要求配制的mol浓度X需配制的体积X原酸分子量7=原酸的百分浓度X原酸的比重X1000配制1.0MHCI100ml,量取38%,比重为1.19的HCI8.06ml加蒸彳留水，定容至100mLMS培养基母液配制（单位：毫克mg）:母液成分规定

6、量浓缩倍数称取量母液体积配制1升培养基吸取量定容编号种类I大里素KNOs190010190001000100NH4NO316501()16500MgSO47H2O3701()3700KH2PO4170101700CaC12.2H2O440104400II微量兀素MnSO4.4H2O22.3100223010010ZnSO4•7H2O8.6100860H3BO36.2100620KI0.8310083Na2MoO4.7H2O0.2510025CuSO4.5H2O40.0251002.5COCL2.6H2O0.0251002.5

7、铁盐Na2-EDTA37.31003730100010FeSO4.4H2O27.81002780III有机物甘氨酸2.05010050010盐酸毗哆醇0.55025盐酸硫鞍素0」505烟酸0.55025肌酸100505000注意：1.大最元素按照使用时浓缩10倍的数值称取，分别将备种化合物称量后，除CaCI2-2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯屮加适量蒸憎水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶屮用蒸馅水定容至刻度，置小口瓶屮保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制口期和配制者姓名，Ca

8、CI2-2H2O配制同上置于另一小口瓶中。2.微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4・7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一纽•单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少最蒸镭水溶解麻，定容在1000ml容最瓶屮，置小口瓶屮保存，贴上标