离子色谱测定壳寡糖聚合度研究.pdf

《离子色谱测定壳寡糖聚合度研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第46卷第5期化工技术与开发Vol.46No.52017年5月Technology&DevelopmentofChemicalIndustryMay.2017实验室与分析离子色谱测定壳寡糖聚合度研究邵波（浙江树人大学，浙江杭州310015）摘要：采用离子色谱方法研究壳寡糖聚合度（DP）与其保留因子（k’）的相关关系。利用实验数据建立线性回归方程，并对样品中的未知壳寡糖样品的聚合度进行分析，并改变流速和淋洗液的条件进行验证，误差≤1.97。因此，可以利用离子色谱分离保留因子计算壳寡糖的聚合度。关键词：壳寡糖；保留因子；聚合度中图分类号：O652.63文献标识码：A文章编号：1671-9

2、905(2017)05-0035-03-1近年来，壳寡糖逐渐应用于食品、医药、饲料、农瓶中定容，配成浓度为1.0mg·mL的储备液。使[1]-1业等各领域。目前壳寡糖产品检测中聚合度的分用液分别用超纯水稀释至10μg·mL。析尤为关键，但是其检测的方法尚不成熟。常用检壳寡糖样品溶液：称取壳寡糖样品1.0g，用超[2][3-4]测方法有液相色谱法、毛细管电泳法及费时的纯水溶解后定容至10mL，用0.45μm水性滤膜过衍生荧光法。离子色谱积分脉冲安培检测法是报道滤，滤液作为储备液备用，使用时用超纯水稀释至[5]-1的检测糖类最好的方法，但这些方法都需要使用10μg·mL。[6]标准品进行

3、验证，壳寡糖的标准样品不但价格昂1.3色谱条件贵，且供应商极少因而较难购全，这给壳寡糖聚合色谱柱及检测池温度20℃，进样量25μL，度的验证带来很大的困难。根据色谱中保留值规ED40A电化学检测器配Au工作电极及Ag-AgCl参律，通过实验研究其聚合度与保留因子之间的关系比电极，积分脉冲安培法检测。非常有意义，可以在缺乏标准品的情况下，对未知-1淋洗液1：A：100mmol·L氢氧化钠；B：超纯水；的壳寡糖进行聚合度的分析，以获得高活性壳寡糖20%A+80%B(V/V)等度洗脱。产品。-1淋洗液2：A：100mmol·L氢氧化钠；B：超纯水；1材料与方法10%A+90%B(V/V)等

4、度洗脱。1.1仪器和试剂2实验结果与讨论戴安DX-600离子色谱仪：配电化学检测器，分2.1壳寡糖聚合度与保留因子的计算析柱系统为CarboPacPA104mm×50mm，保护柱为取壳寡糖样品溶液适当稀释后进样分析，流速CarboPacPA104mm×250mm。-10.60mL·min，淋洗液：20%NaOH+80%H2O(V/V)，壳2~壳6糖标准物质（含量大于90%）。超纯得到图1的色谱图。图1所示1~3号峰为未知聚合水(18.2MΩ)。壳寡糖试样。度壳寡糖，4~8号峰则使用标准物质进行定性确证，1.2实验方法分别为壳6~壳2糖。计算保留指数及相关参数见壳寡糖标准混合液：分别称

5、取壳2~壳6糖的标表1。准物质各10.00mg用超纯水分别溶解于10mL容量基金项目：浙江省分析测试科技计划项目（编号2015C37039）作者简介：邵波，女，硕士，高级实验师，主持省分析测试基金、省教育厅、杭州市科委课题，参与国家级省级课题多项，发表论文30余篇，其中核心刊物20余篇，数篇文章被SCI、CA收录收稿日期：2017-03-0636化工技术与开发第46卷70.0关关系。860.02.2未知峰聚合度的计算750.0C6/ne5先由表1的数据建立聚合度为2~6的壳寡糖对lu40.0aV430.0照品的logDP与logk′的相关关系。研究中发现，壳20.0123寡糖的保留值

6、规律为：logk′=AlogDP+B，将3号未1110.0知峰的logk′值数据代入上述方程，计算其“logDP”0.02030405060708090100110120130140值，并由此“logDP”值计算其“DP”值及误差值。完Time/min成对该未知峰的定性后，为避免误差，再以该未知峰图1壳寡糖样品色谱图Fig.1ChromatogramofChitosanOligosaccharidesample为最高聚合度，顺序向下建立新的回归方程，直至完根据气相色谱的碳数规律，同系物的调整保成所有未知峰的聚合度计算。由计算可知，该样品留时间或保留因子（K′）的对数与碳数存在线性关中

7、1~3个未知峰分别对应聚合度为11、9、7的壳寡糖。系：logk′=A1n+B1，式中，k′为保留因子，A1为碳数2.3改变流速及淋洗条件的影响规律常数，B1为常数，n为碳数值。直链壳寡糖是-1将流速改变为0.80mL·min，淋洗液10%由氨基葡萄糖单体缩合而成的寡糖，其中的聚合度NaOH+90%H2O(V/V)等度洗脱，分离后的各项参数（DP）等同于碳数，但是由于链上有氨基，通过对壳见表3和表4。保留因子的对数与聚合度的对数之寡糖聚合度DP与保留因子k