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1、NGAL在食管癌中表达及意义作者单位：519000中山大学附属第五医院通讯作者：苟新敏【摘要】目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)在食管癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测NGAL在50例食管癌和10例正常食管组织中的表达，分析其与病变类型的关系及其在食管癌组的表达率与临床病理特征的联系。结果NGAL在食管癌中显著表达。结论NGAL可能在检测食管癌发生、进展、转移中具有一定作用。【关键词】NGAL；食管癌；免疫组织化学中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutroph订gelatinaseassociatedlipocalin,NGAL)是Lipo
2、calin家族的新成员，于1993年在人中性粒细胞中被发现和分离出来［1］。近年来，NGAL与人类肿瘤的关系受到了人们的重视，并在NGAL基因的功能以及NGAL在人体正常和肿瘤组织中的表达特征方面取得了一些有意义的进展。本研究采用免疫组织化学方法检测50例食管癌中NGAL蛋白的表达水平，探讨其在食管癌中的表达特点及其临床意义。1资料与方法1.1组织标本和一般资料选取2003-2010年在中山大学附属第五医院行初次手术且有完整临床病理资料存档的食管癌组织石蜡标本50例（术前均未行化疗、放疗或生物治疗），中位年龄55岁（36〜69岁）。肿瘤发生部位：上段12例，中段26例，下
3、段8例，未特指部位4例。病理类型:鳞状细胞癌28例，腺癌14例，其他类型8例。淋巴结转移:有转移33例，无转移17例。正常食管组织10例，以已知乳腺癌阳性片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。所有标本均经HE染色证实诊断。1.2主要试剂及检测方法鼠抗人NGAL单克隆抗体购于美国R&D公司，免疫组织化学试剂盒、DAB显色试剂盒均购自福州迈新公司。采用免疫组织化学二步法，石蜡切片逐级脱蜡至水，抗原修复,3%H2O2封闭内源性过氧化物酶10minePBS冲洗，滴加一抗,37°C孵育2h,PBS洗3次,每次5min。滴加二抗，37°C孵育30min,PBS冲洗3次，每次5mi
4、n。DAB显色，自来水冲洗，苏木素复染，脱水透明，封片，光镜观察。1.3结果判定采用IP（intensity+percentages）评分方法，综合考虑染色强度和阳性细胞数，由两位病理学专家独立阅片，再讨论确定免疫组织化学结果：（1）染色强度计分。细胞浆无染色：0分；淡黄色：1分；棕黄色：2分；棕褐色：3分。（2）阳性细胞数计分。细胞浆无染色：0分;染色细胞数66%：5分。两项之和即为总分。阴性（-）:0.05）oNGAL在鳞状细胞癌的阳性表达率为82.1%,在腺癌的表达率为79.0%,在其他类型乳腺癌中的表达率为90.9%,各种类型间比较差异无统计学意义（P〉0.05）
5、。NGAL蛋白在有淋巴结转移的食管癌组织中阳性表达率为82.0%,在无淋巴结转移的食管癌组织中阳性表达率为59.0%,差异有统计学意义（P食管癌存在较高的发病率，其与生活方式、饮食习惯等有很大关系，对该病的早期诊断、检测及干预具有非常重要的意义。本研究证实，NGAL可作为食管癌发生、进展、浸润及侵袭等发生发展过程中一个重要的检测指标及靶点，是评估肿瘤生物学特性和预后的一个新的参考指标。在筛选高危患者、指导临床制定合理治疗方案等方面具有积极的意义。参考文献[1]KjeldsenL,JohnsenAH,SengelovH,etal.Isolationandprimarystr
6、uctureofNGAL,anovelproteinassociatedwithhumanneutrophilgelatinase・JBiolChem,1993,268：10425-10432.[2]DevireddyLR,GazinC,ZhuX,etal.Acell-surfacereceptorforlipocalin24p3selectivelymediatesapoptosisandironuptake・Cell,2005,123(7)：1293-1305.[3]HvidbergV,JacobsenC,StrongRK,etal.Theendocyticrecep
7、tormegalinbindstheirontransportingneutrophic-gelatinase-associatedlipocalinwithhighaffinityandmediatesitscellularuptake・FEBSLett,2005,579(3):773-777.[4]蒋奶贵，许丽艳，郭明洲，等.肿瘤相关蛋白NGAL的生物学特征.胃肠病学和肝病学杂志，2010,19(4)：297-301.[5]许丽艳，李恩民，熊华淇，等.NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中过表达的研究.生物化学与生物物
