大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定.pdf

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1、广西医科大学报2014AugJOURNALOFGUANGXIMEDICAIUNIVERSITY。；31(4)Ic大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定侯伟魏红玉罗彦彦许淑茹陆俊佳畅荣妮舒伟△(广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁530021)摘要目的：研究大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定方法。方法：取出生5～7d左右的大鼠乳鼠的腹主动脉血管，用组织块法在含2O胎牛血清及内皮细胞生长添加剂和肝素的DMEM培养基中培养，倒置相差显微镜观察内皮细胞形态和生长特征，免疫荧光方法进行血管内皮细胞Tie2相关抗原的鉴定。结果：来自于大鼠乳鼠腹主动脉的血管内皮细胞在改

2、良的培养基中进行体外培养，能够保持增殖和传代的能力，且Tie2抗原鉴定呈阳性。结论：成功分离大鼠乳鼠腹主动脉组织并且获得体外原代培养大鼠乳鼠腹主动脉内皮细胞。用组织培养方法可以获得较满意的血管内皮细胞。关键词大鼠乳鼠；血管内皮细胞；细胞培养；Tie2中图分类号：R一33文献标志码：A文章编号：1005—930x(2014)04—0556-04CULTUREANDIDENTIFICATIoNoFVASCULARENDoTHELIALCELLSFRoMNEW—BoRNRATAoRTAABDoMINALISHouWei，WeiHongyu，LuoYanyan，XuShuru，LuJu

3、njia，ChangRongni，ShuWei．(TheTeaching—Re—searchSectionofCellBiology&GeneticsofGuangxiMedicalUniversity。Nanning530021。China)Abstract0bjective：Toevaluateaneffectivemethodofcultureandidentificationofvascularendothelialcellsfromnew—bornrataortaabdominalis．Methods：Bloodvesselwasisolatedfromnew—bor

4、nratabout5～7d，thetissuecubeswereculturedwithDMEMcontaining20feta1bovineserumandECGS／H．Thecel1growthwasevidencedbyrevealingthemorphologicalcharacteristicsandimmunologicalmarkerTie2．Re—suits：Thevascularendothelialcellsfromnewbornrataortaabdominaliswerekeepedthecapacityofprop—agationandsubcultu

5、rewhenculturedintheimprovedmedium．ImmunofluorescencelabelingshowedthecharacteristicpositivereactiontoTie2inthecytomembraneandcytoplasmofthenewcells．Conclusion：Areliablemethodisdescribedtoisolateandpropagatevascularendothelialcellsfromrataortabycultivatingsmalltissuecubes．Keywordsnew—bornrat；

6、endothelialcel1；cellculture；Tie2血管内皮细胞(endothelialcell，EC)是覆盖于血管腔表重复性强的大鼠乳鼠血管EC的体外培养方法，为进一步的面的单层细胞，是血管结构和功能的基础，具有多种重要的研究提供了细胞材料。生理功能。EC不仅调节血管生成，还调节血液和组织之间1材料与方法的物质交换以及分泌许多细胞因子。血管生成与恶性肿瘤的增殖、转移与浸润的关系是当前研究的热点，血管EC在肿1．1实验动物瘤血管形成中起重要作用l_1]，可以为抗肿瘤血管形成及其5～7d雄性实验用健康大鼠乳鼠3只，体重约20g，由他血管依赖性疾病的研究提供条件。由于E

7、C涉及多种疾病广西医科大学实验动物中心提供。的发病机制，因而对于它的研究具有重要意义。本实验在相1．2试剂与培养基关报道的基础上进行改良_3．4l，建立了一种操作简单，经济且HDMEM培养基粉剂(Gibco公司)，胎牛血清(Hyclon公司)，0．25胰蛋白酶(索莱宝公司)，兔抗鼠Tie一2抗体(博奥森)，兔IgG(福州迈新)，ECGS、肝素(北京迈晨)，DAPI*基金项目：国家自然科学基金资助项目(No．81260479)；广西自然科学青年基金资助项目(No．2013GXNSFBA0191