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时间:2018-11-13
《大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型的建立》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型的建立1材料和方法1.1实验动物及分组随机采用清洁级健康雄性封闭近交系Brog/kg腹腔注射麻醉,剪取供鼠Bro,原位移植到受鼠Lein,血管吻合共约16~18针,吻合约需25~35min,大鼠一般术后20~30min可以自行翻身。1.3病理组织标本采集和形态学分析手术后3、7、15、30、45、60d切取三组大鼠腹主动脉,肝素盐水冲洗血管腔,标本置于4%甲醛固定后石蜡包埋,切片,并进行HE染色,封片。应用HMIAS-2000显微图像分析系统采集图片,每个标本高倍视野下随机取5处,测量增厚内膜厚度,取平均值。1.4统计学处理方法实验数据采用SPSS13
2、.0统计软件包进行分析,两组间比较采用t检验。2结果2.1成功率及存活情况共行96对大鼠腹主动脉移植实验,对照组B和实验组C分别6个时相点各8对,共成功实施72对,平均手术时间(56±5)min,平均冷缺血时间(35±3)min,其中麻醉意外3只,术后吻合口血栓9只,术后出血8只,术后腹腔脓肿4只,手术成功率75.0%。2.3移植动脉形态学测量HMIAS-2000显微图像分析系统采集图片,每个标本高倍视野下随机取5处,测量增厚内膜厚度,取平均值(见表1)。3讨论1991年Mennaander[3]首次报道建立大鼠腹主动脉移植的方法。移植物冠状血管病的动物模型有同种异体腹主动脉移植和同
3、种异体心脏移植、肾脏移植模型。心脏和肾脏移植均需要熟练的显微手术技巧,而且移植物血管病的改变易受到其他因素的影响[4]。目前最成熟的是同种异体腹主动脉移植,这是一种简化的慢性移植物血管硬化模型,与以前的模型相比较,手术操作相对简单。在手术过程中腹主动脉与腔静脉需分离清楚,一般需分离出1.0~1.5cm左右,由于静脉壁极薄,腹主动脉又紧贴腔静脉,分离需要格外小心。同时游离腹主动脉时容易损伤小动脉及腔静脉分支,而血管损伤容易造成术中出血。这部分在整个手术过程中是难度最大的地方。移植动脉放置有利于缝合,进出针顺手,端端连续缝合,缝针不需要过密,总16~18针即可。吻合方式根据个人习惯,笔者
4、体会将上下两端分别左右两点固定后,用连续缝合方法分别将上下两端的前层血管先吻合,然后交叉换线翻转后暴露后层血管,连续吻合两端的后层血管。这样做的好处是在缝合的过程中血管始终保持一定张力,有利于分清两层血管层次,更好暴露管腔吻合血管。模型建立初始阶段,手术不熟练导致血管吻合层次不清,前后层血管在吻合时被误缝合在一起。手术时间过长,受鼠创伤过大,术中、术后死亡。随着显微外科技术的熟练掌握,并发症减少,手术成功率显著提高。【参考文献】[1]vanLoosdregtJ,vanOosterhoutMF,BruinkAH,eaal.TheChemokineandChemokineReceptor
5、ProfileofInfiltratingCellsintheemoryT-Helper1Response[J].Circulation,2006,114(15):1599-1607.[2]KeckBM,BentLE,RosendaleJ,etal.ennanderA,TiisalaS,HalttunenJ,etal.Chronicrejectioninrataorticallografts.Anexperimentalmodelfortransplantarteriosclerosis[J].ArteriosclerThromb,1991,11(3):671-680.[4]Hose
6、npudJD,BoyleTM,HenslerH,etal.Therelationshipbe-tatching:amulti-strainratheterotopicchearttransplantstudy[J].Transplantation,2000,69(10):2173-2178.
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