大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型的建立论文

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1、大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型的建立论文【关键词】腹主动脉移植慢性移植物血管病慢性排斥反应慢性排斥反应已成为阻碍移植物长期存活的重要原因，慢性排斥反应最主要的病理特征是慢性移植物血管病。免疫性和非免疫性因素共同作用导致发生慢性移植物血管病1，2，至今无有效的药物应用于临床，加强这方面的基础研究已经显得日益重要。通过建立简单、实用的动物模型能更好开展慢性移植物血管病的基础研究。笔者建立大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型，报告如下。1材料和方法1.1实验动物及分组随机采用清洁级健康雄性封闭近交系Brog/kg腹腔注射麻醉，剪取供鼠Bro，原位移植到受鼠Lein，血管

2、吻合共约16～18针，吻合约需25～35min，大鼠一般术后20～30min可以自行翻身。1.3病理组织标本采集和形态学分析手术后3、7、15、30、45、60d切取三组大鼠腹主动脉，肝素盐水冲洗血管腔，标本置于4%甲醛固定后石蜡包埋，切片，并进行HE染色，封片。应用HMIAS-2000显微图像分析系统采集图片，每个标本高倍视野下随机取5处，测量增厚内膜厚度，取平均值。1.4统计学处理方法实验数据采用SPSS13.0统计软件包进行分析，两组间比较采用t检验。2结果2.1成功率及存活情况共行96对大鼠腹主动脉移植实验，对照组B和实验组C分别6个时相点各8对，共成功

3、实施72对，平均手术时间（56±5）min，平均冷缺血时间（35±3）min，其中麻醉意外3只，术后吻合口血栓9只，术后出血8只，术后腹腔脓肿4只，手术成功率75.0%。2.2组织学检查对照组A血管内膜无变化，内膜细胞呈单层，排列整齐，无炎性细胞浸润，中膜和外膜无明显改变。对照组B术后3、7、15、30、45、60d，血管内膜无明显变化，内膜细胞呈单层，排列整齐，无炎性细胞浸润，中膜和外膜无明显改变，与对照组A管腔内膜厚度比较差异无显著性（P0.05）。实验组C术后30d移植动脉内膜开始出现增厚，血管内膜有淋巴细胞和单核细胞浸润。术后60d呈现出典型的移植相关血

4、管硬化，内膜明显增生并呈同心圆增厚，管腔狭窄，大量成纤维细胞增生，内膜可见少量淋巴细胞浸润，中层细胞坏死迁移，内弹力纤维有断裂，与实验组B管腔内膜比较差异有显著性（P0.01）。2.3移植动脉形态学测量HMIAS-2000显微图像分析系统采集图片，每个标本高倍视野下随机取5处，测量增厚内膜厚度，取平均值（见表1）。3讨论1991年Mennaander3首次报道建立大鼠腹主动脉移植的方法。移植物冠状血管病的动物模型有同种异体腹主动脉移植和同种异体心脏移植、肾脏移植模型。心脏和肾脏移植均需要熟练的显微手术技巧，而且移植物血管病的改变易受到其他因素的影响4。目前最成熟

5、的是同种异体腹主动脉移植，这是一种简化的慢性移植物血管硬化模型，与以前的模型相比较，手术操作相对简单。在手术过程中腹主动脉与腔静脉需分离清楚，一般需分离出1.0～1.5cm左右，由于静脉壁极薄，腹主动脉又紧贴腔静脉，分离需要格外小心。同时游离腹主动脉时容易损伤小动脉及腔静脉分支，而血管损伤容易造成术中出血。这部分在整个手术过程中是难度最大的地方。移植动脉放置有利于缝合，进出针顺手，端端连续缝合，缝针不需要过密，总16～18针即可。吻合方式根据个人习惯，笔者体会将上下两端分别左右两点固定后，用连续缝合方法分别将上下两端的前层血管先吻合，然后交叉换线翻转后暴露后层血

6、管，连续吻合两端的后层血管。这样做的好处是在缝合的过程中血管始终保持一定张力，有利于分清两层血管层次，更好暴露管腔吻合血管。模型建立初始阶段，手术不熟练导致血管吻合层次不清，前后层血管在吻合时被误缝合在一起。手术时间过长，受鼠创伤过大，术中、术后死亡。随着显微外科技术的熟练掌握，并发症减少，手术成功率显著提高。【