原发性肝细胞癌患者外周血中t细胞及nk细胞的水平变化和临床意义.doc

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1、原发性肝细胞癌患者外周血中T细胞及NK细胞的水平变化和临床意义【摘耍】日的：研究观察原发性肝细胞癌患者外周血T细胞、NK细胞水平，分析T细胞与NK细胞的变化意义。方法：随机抽取2010年7月-2013年2月本院收治的原发性肝细胞癌患者45例、肝脏良性病变患者45例和健康对照组45例作为木次实验的研究对象，检查三组患者的T细胞（包括CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+）及癌组织的7K细胞计数。结果：肝癌组CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+均有所下降，与肝脏良性病变组、健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0・05）；肝癌组癌

2、组织7K细胞计数有明显上升，与肝脏良性病变组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：原发性肝细胞癌患者有外周血中T细胞的降低，组织7K细胞上升,两者可有效反映患者的免疫状态。【关键词】原发性肝细胞癌；外周血T细胞；7K细胞；免疫原发性肝细胞癌是临床常见的一种恶性肿瘤，每年新发病例在50万以上。我国是原发性肝细胞癌的高发国家，由于乙型肝炎病毒感染率逐渐增加，导致此类癌症的发病率呈逐年上升的趋势。且原发性肝细胞癌患者有较高的血管转移倾向，容易发生复发，部分患者在发病示就已经为晚期,失去手术治疗的机会［1］。近年来随着免疫抑制剂的临床应用，有效延长了患者的生存

3、时间，提高了生活质量。本次试验研究分析了原发性肝细胞癌患者外周血中T细胞、组织NK细胞的表达及意义，以分析患者的免疫功能，现将试验过程和结果报告如下。1资料与方法1.1一般资料随机抽取2010年7月-2013年2月本院收治的原发性肝细胞癌患者45例、肝脏良性病变患者45例和健康对照组45例作为本次实验的研究对象。肝癌组中，男31例，女14例；年龄36〜74岁，平均(58.98±9.09)岁;根据UICC分期包括：I期11例，II期19例，III期9例，IV期6例;HBsAg阳性39例,HbsAg阴性6例。肝脏良性病变组中，男30例，女15例；年龄35〜73岁

4、，平均(58.15土9.74)岁；其屮肝硬化19例，肝脓肿11例，肝囊肿2例，慢性肝炎13例。健康对照组中，男28例，女17例；年龄35〜76岁，平均(57.53±9.72)岁。三组被检者在纳入本次试验期间均未使用抗病毒药物，未使用免疫调节药物。三组被检者的性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0・05),具有可比性。1.2方法对三组被检者均采集外周肘静脉血，使用肝素抗凝，在充分混匀后备用。高速离心后将上清液弃去，沉淀混匀后再进行高速离心，悬浮细胞备用，加入多聚甲醛-磷酸盐缓冲液进行固定，使用流式细胞仪进行检测。观察比较患者的T细胞，包括CD3+CD4+、CD

5、3+CD8+、CD4+CD25+。采集三组被检者的肝组织，使用酒精梯度脱水，石蜡包埋后连续切片，使用苏木精-伊红染色对肝组织进行观察。以细胞膜和细胞质内为棕黄色作为阳性细胞，观察高倍视野下10X40的平均数，作为阳性NK细胞数。1.3统计学处理使用SPSS19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以(x±s)表示，比较采用t检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。2结果肝癌组CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+均下降，与肝脏良性病变组、健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,而肝脏良性病变组与健康对照组比较，各个指标均降低，差异有

6、统计学意义（卩〈0.05）；肝癌组NK细胞计数明显上升，与肝脏良性病变组比较差异有统计学意义（P〈0・05）；肝脏良性病变组与健康对照组的NK细胞比较差异无统计学意义（P〈0・05）,见表lo3讨论原发性肝细胞癌是临床常见的一种恶性肿瘤，其死亡率为消化系统恶性肿瘤的第三位［2］。我国每年有11万人由于原发性肝细胞癌死亡，且冃前正呈逐年上升的趋势。尽管临床对原发性肝细胞癌的治疗方法较多,包括手术切除、放疗、肝移植、肝动脉化疗栓塞等，但是效果并不理想。机体的免疫情况与恶性肿瘤的发生存在有明显的关系，当机体免疫功能降低或者被抑制，肿瘤的发生率会有明显的升高。而肿瘤

7、一旦发生，会刺激机体产生免疫应答，并会通过被动逃逸、主动抑制筹［3］,逃避宿主的免疫攻击。肿瘤中的免疫细胞主要包括：T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞筹［4］。T细胞介导的细胞免疫在机体的抗肿瘤效应屮作用非常重要。其屮CD3在所有成熟T细胞表面，根据表面CD分子不同包括CD4+和CD8+两种［5］。其中CD4+T细胞为辅助性T细胞，可以诱导和辅助效应细胞的活化，具有较好的抗肿瘤免疫效果，并可以促进体液免疫反应［6］。CD8+为细胞毒性T淋巴细胞，为特异性杀伤靶细胞，也具有较好的抗肿瘤效果。通过CD4+和CD8+的相互作用，维持机体的免疫平衡［7-8］o从

8、结果可以看出，肝癌组患者CD3+CD4+下降，CD3