激光扫描共聚焦显微镜操作手册.pdf

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1、北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书激光扫描共聚焦显微镜（A1R-si）操作指南北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书目录第一章：Ti-E显微镜操作2-7显微镜光路调节和照明注意事项6Ti-E物镜，DIC插片，DIC棱镜对照表7第二章：共聚焦开关机8-10第三章：共聚焦图像拍摄11-38NIS-ElementsC软件开启和操作界面简介11-15NIS-ElementsC的实时图像获得基本操作16-23图像拍摄24-27探测模式（标准探测器）设置28-38第四章:图像的保存和查看39-42第五章：图像分析43-46附件一、多维拍摄功能和操作方

2、式介绍47-51附件二：图像格式批量转换操作52-53-1-北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书第一章Ti-E显微镜操作指南（一）认识显微镜各个部件（1）滤光片：包括D---毛玻璃；NCB---色温（8）滤色块转盘（包括DIC检偏器）；平衡片；ND---减光片；“GIF”---绿色滤（9）手动荧光光闸；光片和用于PFS的红外滤光片；（10）电动焦距调节旋钮；（2）视场光阑；（11）ND减光片；（3）聚光器升降旋钮；（12）遥控器；（4）起偏器（DIC用）；（13）透射光电源；（5）聚光器对中旋钮；（14）汞灯荧光光源；（6）孔径光阑；（15）PFS控制器（7）聚光器模块

3、（包括明视场，DIC）；（16）HUB控制器-2-北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书遥控器示意图(根据具体配置有些图标可能不显示)1）物镜切换按钮；2）滤光块，DIC检偏器切换按钮；3）DIC检偏器快速切换按钮；4）光路端口切换按钮；5）PFS开关控制按钮；6）聚光器转盘切换按钮；7）透射光源控制按钮*。*请注意：CNTL按钮灯亮，则可以通过遥控器或电脑控制软件来调节透射光源强度，此时显微镜底座左侧光源开关和调节旋钮锁定；CNTL功能关闭，可以通过显微镜底座开关和旋钮来控制透射光源。3北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书前面板示意图1）状态显示屏；2）PFS开

4、关按钮和PFS聚焦状态指示灯（需要选购PFS部件）；3）光路端口切换按钮；4）中间变倍旋纽；侧面板示意图1）调焦旋钮2）粗微调切换按钮3）物镜切换按钮；4）滤光块，DIC检偏器切换按钮5）透射光光源开关（当遥控器透射光源控制按钮打开时，此按钮无效）；6）透射光量度调节旋钮（当遥控器透射光源控制按钮打开时，此旋按钮无效）；7）物镜复位；8）物镜向下移动2毫米；注意：在使用显微镜之前，要把主机底座右后端的黑色HUB控制器（显微镜示意图15位置）右侧的电源开关打开。4北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书（二）明视场透射光操作要点1）打开电源开关，并打开显微镜透射光卤素灯电源开关

5、；2）把滤色块移到空位；3）把起偏器，检偏器移出光路；4）把聚光器转盘切换到A状态；5）检查柯勒照明（柯勒照明调节方法参看附录1）；6）检查出光端口。（三）微分干涉(DIC)操作要点1）按照明视场透射光观察方法调节好显微镜；2）把起偏器，检偏器移入光路；3）按照相对应物镜将聚光器镜转盘转到相应N1/N2位置（请参见另外所附对照表）；4）检查出光端口；5）旋转起偏器，选择最佳显示效果。（四）荧光观察操作要点1）打开荧光电源稍待片刻至光源指示灯不闪；（打开约10min稳定，关闭需要超过15min后才可以再次启动）2）确认透射光开关处于关闭状态；3）检查出光端口；4）选择合适的滤色块；5

6、）打开光闸（汞灯面板的shutter旋钮），调节荧光亮度（汞灯面板的ND旋钮），进行观察；6）不观察时，把光闸关掉，以避免荧光淬灭。注意：该系统配置透射和荧光光闸，在做相应操作时，应将对应光闸打开。光闸开关可在遥控器上设定。落射光照明光闸按钮透射光光闸按钮汞灯光闸按钮（电动型号）5北京大学化学学院中级仪器实验室A1R操作说明书显微镜光路调节和照明注意事项（一）柯勒照明的调节方法1）选择10X物镜；2）调焦，使标本清晰成像；3）缩小视场光阑（显微镜视图2位置）；4）上下调节聚光器（显微镜视图3位置），使视场光阑边缘清晰；5）调节聚光器对中旋钮，使其居中；6）放大视场光阑，使其刚刚外切

7、于视野。（二）长寿命汞灯电源的注意事项1）电源打开以后，大约10分钟左右光源达到稳定状态；2）电源关闭以后，至少要等10分钟才能重新打开。（三）物镜盖玻片矫正环的调节方法1）调焦，使图像相对最清楚；2）把矫正环向一个方向转动一定角度，此时图像变模糊，调焦，使图像相对最清楚；3）判断此时的图像质量是否有所改善。如有改善，则按照该方向再旋转一定角度；如质量下降，则反方向旋转；4）重复2）和3）直到图像质量改善之后又有所下降；5）反方向旋转，回到倒数第二次的位置即可。6北京