血涂片的制备和细胞大小的测量ppt课件.ppt

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1、一、目的要求1.掌握血涂片的制备方法；2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态；3.掌握显微测微尺的使用方法。二、实验原理涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。根据测量结果计算各细胞及细胞核的体积椭球形：v=4πab2/3a-长半径b-短半径圆球形：v=4πr3/3r-半径圆柱形：v=r2hr-半径h-高实验一、血涂片的制备和细胞大小的测量1三、实验用品1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、双凹片（推

2、片）。2.试剂:Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60ml甲醇。四、实验内容、方法与步骤(见实验指导书)1.血涂片的制备与血细胞的观察2.显微测微尺的使用五、实验报告1.绘制各种不同类型的血细胞,并说明它们的主要作用；2.任选5个红细胞，测量其直径，并计算出平均值。2采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹3采血4由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血5推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧6再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。730

3、~45°两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。8染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止，染色1～3min。然后滴加等量蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置10～15min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。9红细胞也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，无细胞核，也无细胞器，主要功能是运输和交换氧和二氧化碳。10淋巴细胞白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答功能的重要细胞成分11单核细胞是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形性，如卵圆形、肾

4、形、马蹄形、不规则形等12嗜中性粒细胞即中性白细胞，呈圆形，胞质淡红色。胞核幼稚型的呈杆状或马蹄形，成熟的呈分叶状，三叶的较多见，中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞13嗜酸性粒细胞是白细胞的一种，嗜酸性粒细胞增多的原因很多：1.变态反应性疾病：如哮喘、荨麻疹、食物过敏和血管神经性水肿。2.各种皮肤病：如天疱疮、疱疹性皮炎等14嗜碱性粒细胞胞质内含有较大的、椭圆形的嗜酸性颗粒。这类白细胞也具有吞噬功能。15显微测微尺的使用显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、目镜测微尺两部分

5、。在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的实际长度。目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的测量。16每格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm=10µm总长0.1mm镜台测微尺总长1mm共分为10格17目镜测微尺可以通过旋转旋钮移动目镜测微尺中交叉线的位置18使用方法1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜；2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜台测微尺的刻度；3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平

6、行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。4.移去镜台测微尺，换血涂片，测量细胞长度。细胞长度=目镜测微尺测量所占小格数×目镜测微尺每小格代表的实际长度19目镜测微尺的标定n×aX=MX:目镜测微尺每格的实际长度a:镜台测微尺每格的实际长度n:镜台测微尺的刻度数。M:目镜测微尺的刻度数。例如：镜台测微尺一小格为10µm，在目镜测微尺“0”点到另一点与镜台测微尺正好重合，镜台测微尺的刻度数为5小格，当

7、目镜测微尺的刻度数也为5小格，则目镜测微尺每格的实际长度即为10µm（物镜10×）；如目镜测微尺的刻度数为20小格，则目镜测微尺每格的实际长度即为2.5µm（物镜40×）。20