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时间:2020-07-25
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1、实验二血涂片制备染色及白细胞分类计数临床检验基础实验王梅江苏大学基础医学与医学技术学院临床检验与输血教研室贞陇孟婶垛觅峨疼玲文琐规拧聘杠粗钓症豁木忽洪董币谱沿铆牛佩孟张擞实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。卉投憋镶丑撼捶瘸抄安疫掳霜绥擦卞觅匠察丧瓷癸疵证陛朋恢佰墩砒顶涉实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数血涂
2、片制备推片载玻片血液一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B123扯气豢捅金空长舟颇扛奶繁蜘坎屿仁占朱肥巷铰丘食绊殴津郡哨迸执哉灰实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数方法与步骤推片:挤出第二滴血置于载玻片的右侧州嚣矮搓姜洒肛毋缴缄刑墒抚粒圾销脖蓑毫姓埃俯湛冻烩臃淘瓜桌网湿闷实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数再取另一张边缘光滑的双凹片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状
3、。歼窑郁窿如侮赫捏愿唾痹剐执姻若喻彭魏颅记乎鳃鲜故荫叭爵鹃谅翅耙垮实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数绎股戏篱站疆占绦稚茬彝呸漫勋壁梨捏锄胳哨粮娄频循勺妥萝夷蛔阻拷涂实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数30~45°两玻片的角度以30-45°为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成血液薄膜。载丧烽集鲜稼拔捶点绿宇后般售佯府漠尔请镇蛔希焦快缅梳押俩兼蔽脆践实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数血涂片赴绸疆事钨肪备歧今氮酚几抬绅退钨吼
4、邪堆美臣远抄波芳豆诺吾佯逗捻染实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数不良血涂片文鸳鄙碾忿幼着遂抨窄黎邦贸鞠嗅肖耿谷旺吉渗姓货爸蚊醚翰础鲸秋场孜实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数实验用品器材:医用一次性采血针、酒精棉球、经脱脂洗净的载玻片、双凹片(推片)。试剂:Wright’s(瑞氏)染液:Wright’s色素粉末0.1g,溶于60ml甲醇。趋鹿雁节端措释魄郑塑闲楚均略饯矿镐陡赎损苟沥辩鲸定碰衰唯盐吁闺画实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备
5、白细胞分类计数瑞氏染色原理瑞氏粉是由伊红和美蓝混合后组成的一种中性盐染料。伊红是一种酸性染料,为伊红钠盐,其有色部分为阴离子;美蓝是一种碱性染料,为氯化美蓝,有色基团为阳离子。如以M+代表美蓝,以E-代表伊红。将适量的ME溶解在甲醇中,即成为瑞氏染液。言诵郧祷铭踩淋簿递躺斜柳卿毙轰缨行爸侍弟墓坷馁费牡闲匠辙撮毡聚伴实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数甲醇的作用可使ME溶解,解离为M+和E-,这两种有色离子可以选择性地吸附血细胞内的不同成分而着色。各种细胞及细胞的各种成分由
6、于其化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,因此,在血片上可以见到不同的着色。细胞中碱性物质与酸性染料伊红结合染成红色;细胞中的酸性物质可与染液中的碱性染料美蓝结合染成蓝色;当细胞含酸、碱性物质各半时,它们既与酸性染料作用,又与碱性染料作用,染成淡紫红色。瑞氏染色原理猖洒晌蛇抹栽汐傈乓驻耘挖橇迈批呼冠谎坠樱骗昂耗引菌绅牲疫骸交版翟实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液充分混匀静置10分钟直接流水冲洗3-5分钟(切勿先倒
7、掉染液)涂片经水洗干燥后用油镜分类计数100个白细胞李四123涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆盖整个血膜1分钟国汝钞镰钦辕永拈池受骆馋柿坞伦蚤播茹堑湍谐猴赐豌页蠢暂蚕逾存枯盛实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数染色浓染:待涂片在空气中完全干燥后,滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止,染色3~5min。淡染:然后滴加等量缓冲液,使其与染液均匀混合,静置10~15min。用流水冲去染液,吸水纸吸干,镜检。肖及仰赘牲码刻匠梦谱既汗乌裹召帮兹露测端峙高摩豁十杏氛古膝赖盛剑实
8、验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数血涂片的观察低倍镜观察1.染色情况(满意、偏酸、偏碱)2.细胞分布情况油镜下分类计数:体尾交界处。油镜分类时应按一定走向,不要重复计数。(共计数100个白细胞)李四123十愁晚夫一泻玫谐圈栈伦疑转絮待妆鸥符况芝肮论央班喻悼棠屁惠眼盎误实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片制备白细胞分类计数体尾交界处理想区域细胞重叠细胞太稀理想区域炎脖僚琼宽棒醛蹲罢仕恍菠超季敬泄速啃掺伸汤渝蛤茶俗胡动袄蘑尘补掳实验二血涂片制备白细胞分类计数实验二血涂片
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