临床医学毕业论文钒化钠诱导人食管癌细胞系ec109凋亡及其机制.doc

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1、XX大学毕业论文锐化钠诱导人食管癌细胞系EC109凋亡及其机制2014年6月25日锐化钠诱导人食管癌细胞系EC109凋亡及其机制作者：吕军周立社邵国，姜树原龚向峰付玉华闫少春【摘要】H的：研究锐化钠诱导食管癌细胞系EC109凋亡及其可能的机制。方法：用半定量Western-Blot方法检测Caspase-3蛋白的激活水平。结果：一定浓度的锐化钠可使食管癌细胞系EC109Caspase-3蛋白的激活水平升高。结论：乍凡化钠的抗肿瘤机制可能与Caspasc-3蛋白的激活水平升高有关。【关键词】锐化钠;食管癌;细胞凋亡;Caspase-3AbstractObjectiv

2、e：ToinvestigatetheeffectofsodiumvanadateonapoptosisoftheesophagealcancercelllineEC109anditspossiblemechanism.Methods：Westernblotanalysiswasappliedtodeterminemodificationofcaspase・3proteins.Results:TheexpressionofCaspase-3wasevidentlyincreasedbysodiumvanadateofcertainconcentration.Conc

3、lusion：TheantitumormechanismofSodiumvanadatemayberelatedtoupregulationofCaspasc-3expression.KeywordSodiumvanadate;Esophagealcancer;Cellapoptosis;Caspase・3帆是化学元索周期表屮VB族的过渡元索，现己被确认为人体必需的微量元素，参与人体许多不同的生理过程。随着对锐研究的深入，其抗癌作用也引起人们的注意。Ray等［1］研究显示锐化钠可以促进乳腺癌MCF7细胞凋亡，抑制其增殖，显示了饥化钠作为有效的化疗制剂的潜能。但关于

4、饥化钠对食管癌细胞方面的研究尚未见报道。本研究在体外实验屮观察飢化钠对食管癌细胞系EC109的作用，揭示飢化钠抗肿瘤作用的分子机制，扩大其抗肿瘤谱，为帆化钠进一步发展成-•种新型的抗肿瘤药物提供理论依据。1材料与方法1」纱品及抗体锐化钠购买于北京化学试剂公司（分析纯），抗actin兔多克隆抗体、抗Caspasc-3兔多克隆抗体、辣根酶标记的山羊抗兔IgG均购SantaCruze公司。1.2细胞株人食管癌细胞系EC109购于屮国科学院上海生物科学院细胞资源中心。1.3免疫蛋片印迹实验（Western.Blot）常规培养人食管癌细胞系EC109细胞，按实验分组分别加入

5、不同浓度的飢化钠，对照组不加药物。采用10%SDS-聚内烯酰胺凝胶电泳，将蛋白电转到硝酸纤维膜上，加一-抗稀释液4°C过夜，结合辣根过氧化物酶标记二抗，用ECL化学发光试剂在X光胶片上曝光、显影、定影。以actin为内参照，应用凝胶成像分析系统进行条带扫描分析结果，结果以蛋白条带的面积积分值与actin的面积积分值比值表示。实验重复3次。1.4统计学处理采用SPSS11.0软件包对数据进行单因索方差分析，统计数据以均数土标准差（x士s）表示,P0.05为差杲有统计学意义。2结果在50.0〜200.0gmol/L的浓度范围内随着药物浓度的增加和药物处理时间的延长,C

6、aspase・3激活的量呈现逐渐升高的趋势。见图1、表1。图1矶化钠对食管癌细胞Caspase-3表达的影响表1饥化钠作用食管癌细胞不同吋间后Caspase-3表达的面积积分值与actin面积积分值比值3讨论食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，寻找有效的化疗药物成为食管癌治疗领域研究的热点oBishayee等［2］报道了一系列锐制剂对动物模型系统的抗肿瘤活性。生长细胞对锐化钠的毒性作用更敏感，通过皮下注射，锐化钠很有效地抑制了小鼠肿瘤生长，抑制癌细胞生长增殖［3］。本研究利用Wcstcm-Blot研究方法,分析饥化钠对肿瘤细胞生长的抑制作用及其分子机制。为进一步将饥

7、化钠研发成一种新的化疗药物提供理论基础。肿瘤的发生、发展与凋亡有密切关系。肿瘤不仅有细胞增殖和分化的异常,亦有细胞凋亡的异常。细胞凋亡的分子机制研究表明，凋亡是多基因参与的级联反应过程，其屮Caspase・3是凋亡的执行器之一［4］。Caspase-3为凋亡的效应分子，是凋亡途径下游进行底物晦解的关键蛋白酶，被称为凋亡的“执行者"［5］。Caspase-3是多种凋亡途径共同作用的因子，其蛋白表达水平的高低决定着细胞凋亡程度［5］。n前，以诱导凋亡为F1标的肿瘤治疗战略主要是通过各种因子活化Caspase-3前体而实现的。木实验结果显示，不同浓度锐化钠作用食管癌细胞

8、系EC10