山奈酚诱导人食管鳞癌Eca109细胞凋亡及其机制

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1、南方医科大学学报（JSouthMedUniv）第31卷·1440·南方医科大学学报（JSouthMedUniv）2011;31(8)·基础研究·山奈酚诱导人食管鳞癌Eca-109细胞凋亡及其机制李瑞君，梅家转，刘桂举郑州人民医院肿瘤内科，河南郑州450003摘要：目的研究山奈酚对人食管鳞癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其机制。方法山奈酚体外作用于Eca-109细胞后，用MTT法检测细胞增殖抑制作用；TUNEL染色测定细胞凋亡率；RT-PCR检测Bax、Bcl-2基因表达变化情况；分光光度法测

2、定Caspase-3和Caspase-9活性。结果山奈酚显著抑制Eca-109细胞增殖（P<0.01），呈剂量依赖关系。TUNEL染色结果表明山奈酚诱导Eca-109细胞发生凋亡，RT-PCR结果显示山奈酚作用后，肿瘤细胞Bax基因表达上调，Bcl-2基因表达下调，同时，Caspase-3和Caspase-9活性明显升高（P<0.01）。结论山奈酚能抑制Eca-109细胞增殖，诱导细胞凋亡。山奈酚可能通过线粒体途径诱导Eca-109细胞凋亡。关键词：山奈酚；食管癌；细胞凋亡；Eca-109细胞株中图分类

3、号：R735.1文献标志码：A文章编号：1673-4254（2011）08-1440-03Kaempferol-inducedapoptosisofhumanesophagealsquamouscarcinomaEca-109cellsandthemechanismLIRui-jun,MEIJia-zhuan,LIUGui-juDepartmentofMedicalOncology,ZhengzhouPeople’sHospital,Zhengzhou450003,ChinaAbstract:Objec

4、tiveToevaluatethegrowth-inhibitingandpro-apoptoticeffectofkaempferolinhumanesophagealsquamouscarcinomaEca-109cellsandexplorethemechanism.MethodTheeffectofkaempferolonEca-109cellproliferationinvitrowasmeasuredbyMTTassay.TUNELstainingwasusedtodetectthecell

5、apoptosisfollowingkaempferoltreatment.ThechangesinBaxandBcl-2mRNAexpressionsinresponsetokaempferoltreatmentweredeterminedbyRT-PCR,andthecaspase-3andcaspase-9activitieswereevaluatedusingcolorimetricassay.ResultsKaempferolsignificantlyinhibitedEca-109cellp

6、roliferation(P<0.05)inaconcentration-dependentmannerandinducedobviouscellapoptosis.RT-PCRshowedthatafterkaempferoltreatmentcausedup-regulatedBaxanddown-regulatedBcl-2mRNAexpression.Thecolorimetricassayrevealedsignificantlyincreasedcaspase-3andcaspase-9ac

7、tivitiesinEca-109cellsfollowingkaempferoltreatment(P<0.01).ConclusionKaempferolcaninduceapoptosisofEca-109cellsviaamitochondria-dependentpathway.Keywords:kaempferol;esophagealcarcinoma;apoptosis;Eca-109cellline山奈酚属于黄酮类化合物，主要来源于姜科植物山1材料和方法奈的根茎，广泛存在于各种水果、蔬

8、菜及饮料中，人们已1.1材料和细胞经从茶叶、椰菜、巫榛子、蜂胶、柚子及其他绿色植物提人食管鳞癌细胞株Eca-109由本室保存，用RPMI取到它的纯品，其药用价值十分广泛，临床已被用于心1640培养液（含10%小牛血清）培养，细胞培养于37℃、［1］5%CO血管疾病、痛症及免疫系统疾病的治疗。近期研究发2细胞培养箱。山奈酚购自Sigma-Aldrich，纯度现，山奈酚具有防癌、抗癌作用，能抑制多种肿瘤细胞的≥97.0%，溶于乙醇配制成20mg