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《斑蝥酸钠诱导人食管癌Eca109细胞凋亡实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、斑蝥酸钠诱导人食管癌Eca109细胞凋亡实验研究【摘要】目的观察斑蝥酸钠体外对人食管癌Eca109细胞凋亡的影响。方法应用MTT法,流式细胞仪检测,分析斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞的生长和凋亡的影响。结果斑蝥酸钠作用24h可使人食管癌Eca109细胞生长明显抑制(P<0.01),并出现典型的凋亡峰。结论斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞生长有抑制作用,可诱导食管癌细胞凋亡。【关键词】斑蝥酸钠；食管癌；生长抑制；细胞凋亡；实验研究Abstract：ObjectiveTostudysodiumcantharidinatein
2、ducedapoptosisofhumanesophagealcarcinomaEca109invitro.MethodsThechangeofhumanesophagealcarcinomaEca109treatedwithsodiumcantharidinatewereanalyzedbyMTTandFCMassay.ResultsHumanesophagealcarcinomaEca109weretreatedwithsodiumcantharidinatefor24h,thecellproliferationwasobvio
3、uslyinhibited(P<0.01)andthecellsshowedatypicalapoptoticpeak.ConclusionsSodiumcantharidinatecaninhibitcellproliferationandinducecellapoptosisofesophagealcarcinomacellsEca109.7 Keywords：Sodiumcantharidinate；esophagealcarcinoma；growthinhibition；apoptosis；ExperimentalS
4、tudy斑蝥酸钠(Sodiumcantharidinate,SCA)是斑蝥素与氢氧化钠共热时水解生成[1]。临床单独使用或联合化疗对肝癌、胃癌、大肠癌等恶性肿瘤均有一定疗效,而且它还能配合放疗、化疗,提高治疗中晚期癌症的疗效,改善胸部不适、食欲减退、恶心呕吐等不同程度的放疗、化疗反应[2],具有较显著的抗癌抑癌和免疫调节的双重作用,是一种广谱抗癌新药。但目前对其抗癌机理研究的报道则甚少。笔者以人食管癌Eca109细胞系为对象,采用MTT、流式细胞仪检测食管癌细胞的生长和凋亡的变化,观察斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞系生长和凋亡的
5、影响,探讨其抗食管癌的作用机理,为临床应用提供理论依据。 1实验材料 1.1试药RPMI1640培养液,美国GIBCO；新生牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司；胰酶,南京生兴生物技术有限公司；MTT,上海伯奥生物科技公司；二甲基亚砜(DMSO,分析纯),上海凌锋化学试剂有限公司,批号030820；顺铂(冻干型),齐鲁制药有限公司,批号04050111；斑蝥酸钠注射液,贵州神奇集团,批号20041113。7 1.2细胞系人食管癌细胞系Eca109,购于上海细胞所。将细胞培养于含10%新生牛血清的RPMI1640培养液中,长满
6、后用0.25%胰酶消化传代。 1.3仪器CO2培养箱,NAPCO,USA；DG-3022A酶标仪,国营华东电子管厂；FACSCaliuber型流式细胞仪,美国BD公司。 2实验方法 2.1药液的制备及分组将班蝥酸钠注射液用适量的无血清RPMI1640培养液分别配成3种浓度,终浓度大、中、小剂量分别为5、2.5、1μg/mL；顺铂作为阳性对照其剂量按临床用量换算,终浓度为25μg/mL。实验共设用药组大、中、小3个浓度、阳性对照组和细胞对照组。 2.2MTT检测法7 取处于指数生长期的人食管癌细胞Eca109,加入适量0.2
7、5%胰酶消化,用含10%新生牛血清的RPMI1640培养液配成悬液,用血球细胞板计数,并以RPMI1640全成分培养液稀释细胞悬液,配成2×105/mL,取96孔平板,每孔加细胞悬液180μL。再将每组药液20μL分别加入各孔细胞悬液中,每个剂量重复4孔。将平板在37℃、含5%CO2的培养箱中孵育24h后取出细胞培养板,MTT用无血清RPMI1640培养液配成1mg/mL的溶液,每孔加100μL,37℃温育4h,使MTT还原为formazan,吸出上清液,加入100μLDMSO使formazan溶解,混悬仪混匀后用酶标仪在490nm
8、处测定每孔光密度(A值)。 结果分析：抑制率(%)=(1－加药组A值/对照组A值)×100%；存活率(%)=(加药组A值/对照组A值)×100%。 2.3流式细胞仪检测取处于指数生长期的人食管癌细胞Eca109,加药培养24h后,
