早期分泌型抗原靶6(ESAT6)抑制小鼠巨噬细胞自噬的研究.pdf

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1、：Ｒ３９２分类号．１２单位代码：１０３６１ＡＮＨＵ－■ＩＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ＾＾ＯＪ＾ｊ｜＂－＂＇Ｔ？ｈ？■？．Ｖ．ｔＩ．ＭＵｙＨｉ＾ｒ６ＥＳＡＴ６鼠巨喧细：论文题目：早期分泌型抗原紀（）抑制小胞白隨的研究）：作者姓名：徐雪维专业名称：免疫学导师姓名：张荣波教授胡东副教授：完成时间：２０１７年６月４日－．丨Ｉ：Ｒ３９２．１２论文编号：中图分类号学科分类号：３１０３４密级：公开安徽理工大学硕士学位论文

2、早期分泌型抗原勒６（ＥＳＡＴ６）抑制小鼠巨嘴细胞自唆的研宄作者姓名：徐雪维专业名称：免疫学研究方向：免疫与自睡导师姓名：张荣波胡东导师单位：安傲理工大学答辩委员会主席：方严论文答辩日期１７年５月２７日：２０安徽理工大学研究生处２０１７年５月２７日ＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｏｆ６ｋＤｅａｒｌｓｅｃｒｅｔｏｒａｎｔｉｅｎｔａｒｅｔｙｙｇｇＥＳＡＴ６ｏｎｔｈｅａｕｔｏｈａｅｏｆｍｕｒｉｎｅｍａｃｒｏｈａｅｓ（）ｐｇｐｇＣａｎｄｉｄａｔ

3、ｅ：ＸｕＸｕｅｗｅｉＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＺｈａｎｇＲｏｎｂｏｇＭｅｄｉｃｉａｌＳｃｈｏｏｌＡｎＨｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｙｇｙＮｏ．１６８ＴａｉｆｅｎＲｏａｄＨｕａｉｎａｎ２３２００１Ｐ．Ｒ．ＣＨＩＮＡ，ｇ，，，独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方以外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽理工大学或其他教育机构的学位或证书而侍用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所

4、做的任何贡献均巳在论文中作了明确的说明并表示谢意。：日期学位论文作者签名：叫年／騎日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽理工大学有保留、使用学位论文：的规定，即研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属于安徽理工大学》学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽理工大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：签字曰期：年月曰丫（导师签名：签字曰期年＾

5、ｆ摘要摘要目的：早期分泌型抗原紀６能够通过激活哺乳动物雷帕霉素紀蛋白抑制自嘴的作，ＥＳＡＴ用从而促进卡介苗的生长增殖，研究６对溶酶体与自職小体的融合之间的相互作用关系，为ＥＡＳＴ６介导的免疫逃逸机制提供实验依据。方法：ＣＭＶ－ＨＡ－６４７ＢＣＡ１．对转染不同时间ＰＥＳＡＴ６质粒的ＲＡＷ２．细胞，进行细胞裂解，（ＷｔＢｌｏｔ）３ｎ、ＬＣ３法测蛋白浓度，蛋白免疫印记ｅｓｅｒｎ法检测细胞ＬＣＩ的量。－ＭＶＨＡ－ＥＳＡＴ６重组Ｃ）ＣＭＶ－ＨＡ然后对转染ＰＣ质粒、氯喹（Ｑ、ｐ对照质粒和ＣＱＣＭＶ－ＨＡ－ＥＳＡＴ６ＲＦＰ－ＧＦＰ－ＬＣ３－ＲＡＷ２６４７

6、小鼠巨与ｐ转染联合处理条件下的．唆细胞，荧光显微镜下记录结果，并用计算机软件计数；进行细胞裂解，用ＢＣＡ（ｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ）法３ＩＩ、ＬＣ３。法测蛋白浓度，蛋白免疫印记Ｗ检测ＬＣＩ的量－－－２ｌＣＭＶＨＡＥＳＡＴ６重组ＣＭＶＨＡ．对ＥＢＳＳ（Ｅａｒｅ平衡盐溶液）以及转染ｐ质粒、ｐ对照质粒处理的ＲＡＷ２６４．７细胞进行细胞裂解，然后接种于罗琴培养基上，观察ＢＣＧ的生长情况ＣＭＶ－ＨＡ－ＥＳＡＴＣＱＣＭＶ－ＨＡ。然后对转染ｐ６重组质粒、氯喳（）、ｐ－ＣＭＶ－ＨＡＥＳＡＴ６ＲＡＷ２６４对照质粒和ＣＱ与Ｐ转染联合处理条件下的．７小鼠巨唾细胞，，进行细胞裂解接

7、种于罗琴培养基上，观察ＢＣＧ的生长情况。－－ＥＳＡＴ６的ＲＡＷ２６４７，进行细胞裂解３．对转染ＰＣＭＶＨＡ小鼠巨嚼细胞．，测蛋白（）－ｍＴＯＲ－ｓｔＢｏｔＬＣ３ＩＩ、ＬＣ３Ｉ、、７０Ｓ６Ｋ、２浓度，用Ｗｅｅｒｎｌ的方法检测ｐｐｐ６的蛋ｒｉｎｌＥＳＡＴ６ＲＡＷ２６４７白水平。然后用ｍＴＯＲ的抑制剂Ｔｏ和共同处理．，用ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒＲｅｄ染色溶酶体，并用计算机软件计数溶＿体的数量；用蛋白免疫印－