严重烫伤小鼠主要器官自噬变化的实验研究.pdf

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1、·232·医学研究生学报2014年3月第27卷第3期JMedPostgra，Vo1．27，No．3，March，2014论著(基础研究)严重烫伤小鼠主要器官自噬变化的实验研究孙春红，陈刚，王凤君，闫柏刚【摘要】目的严重烧伤后常发生主要器官结构与功能损害，其发生机制尚不完全明确。文中旨在通过初步观察严重烫伤早期不同时相点小鼠主要器官的自噬变化情况，为研究自噬在严重烧伤后器官结构与功能损害中的作用奠定基础。方法选取BALB／C小鼠24只，随机分为6组，即烫伤前组(正常对照)、烫伤后1h、2h、6h、12h和24h组，烫伤各组常规制备30％总体表面积(to

2、talbodysu~acearea，TBSA)Ⅲ度烫伤小鼠模型。采集各组动物的心、肝、肺、肾组织，用免疫印迹法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3蛋白表达，透射电镜观察细胞内自噬溶酶体情况。结果小鼠烫伤后1h心、肝、肺、肾组织Beclin1较烫伤前逐渐增加[(0．70±0．19)(0．60±0．16)、(0．95±0．11)粥(0．65±0．20)、(0．88±0．08)(0．80±0．07)、(0．82±0．12)us(0．70±0．14)]，烫伤后1hLC3蛋白表达较烫伤前逐渐增加[(3．48±1．25)y5(2．58±0．93)、(1．24±

3、0．52)us(0．91±0．24)、(1．12±0．27)(0．87±0．29)、(1．05±0．41)v5(0．68±0．21)]，肝、肺、肾组织Beclin1(1。37±0．18、1．27±0．06、1．51±0．20)及LC3蛋白表达(2．03±0．57、1．66±0．59、2．12±0．75)于伤后12h达高峰，随后回落，但至伤后24h时仍高于正常对照。心组织Beclin1及LC3蛋白表达则是持续性逐渐增加，至伤后24h时仍显著高于正常对照。透射电镜下烫伤小鼠心、肝、肺、肾组织细胞内自噬溶酶体较正常对照增多。结论严重烫伤后器官细胞自噬增加，

4、可能在烫伤后器官组织结构与功能变化中起着重要作用。【关键词】烫伤；自噬；器官；Beclinl；LC3[中图分类号】R644[文献标志码】A[文章编号】1008—8199(2014)03-0232-04ChangesofautophagyintheinternalorgansofseverelyscaldedmiceSUNChun．hong，CHENGang，WANGFeng-jun，YANBai．gang(1．DepartmentofClinicalMedicine，LuzhouMedicalCollege，Luzhou646000，Sichuan，

5、China；2．InstituteofBurnResearch，SouthwestHospital，theThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China；3．DepartmentofEmergencyMedicine，theThirdPeoplesHospitalofChongqing，Chongqing400030，China)[Abstract]ObjectiveStructuralandfunctionaldamagesofinternalorgansoftenoccurinsevere

6、bums，andtheunderlyingmecha-nismsarenotyetcompletelyunderstood．Theaimofthisstudyistoinvestigatethechangeofautophagyinintemalorgansinseverelyscaldedmice，includingtheheart，liver，lungsandkidneys，soastogetaninsightintotheroleofautophagyinthedamageofinternalorgansinse—verebums．Me~ods

7、Twenty—fourBALB／Cmicewererandomlydividedintoaprescaldcontrolgroupandfive(1，2，6，12and24h)postscaldgroups，thelatterfivegroupssubjectedtofull—thicknessscaldof30％totalbodysurfacearea．Tissuesamplesfromtheheart，liver，lungsandkidneyswereharvestedfordetectionoftheexpressionsoftheBeclin

8、·-1andLC3proteinsbyWesternblotandobservationofautoph-c