延边流行株犬瘟热病毒H基因的原核表达及间接ELISA方法的建立.pdf

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4、肖婷兽医专业延边大学分类号密敬ＵＤＣ学号２０１４０５０３２０延边大学硕±学位论文延边流行株犬瘋热病毒Ｈ基因的原核表达及间接ＥＬＩＳＡ方法的建立硏究生姓名＾璋培养单位延边大学农学院．ｍｍ学科专业兽医专业＇研究方向论文提交曰期２０１６＾０５２４０Ｊ０＞本论文己达到兽医硕±学位论文要求答辩委员会主席＾答辩委员会委员＾＾＾４亞备Ｉ印）答辩委员会委员答辩委员会委员＿ｍ－答辩委员会委员市替崔Ｉ懇减２２２４０５００４０２

5、８＾＾’延边大学从若年Ｘ月碎日学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知，论，除了文中特别加Ｗ标记和致谢的部分外文中不包含其他人巴经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料一。与我同工作的同事对本研究所做的任何贡献均巴在论文中作了明确的说明并表示谢意。一本人如违反上述声明，愿意承担由此引发的切责任和后果。｜研究生签名：日期；知長年至月日Ｊ４－学位论文使用授权声明本人在导师指导下所完成的学位论文，

6、学校有权保存其电子和纸制文档，可Ｌ乂借阅或上网公布本学位论文的全部或部分巧容，可Ｌ乂向有关部口或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密论文，按保密的有关规定和程序处理。本学位论文属于：１．保密〇，在年解密后适用于本声明；２．不保密＆／年｛月＞＾日：：日：研究生签名＿导师签名期尊１延边大学硕±学位论文－摘要摘要犬痘热（ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒ，ＣＤ）是由犬痘热病毒（ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓ，ＣＤＶ）感染而引起的急性传染病，具有接

7、触性强，、发病率和死亡率高等特点并可引起一机体免疫抑制，是危害犬科类动物生命较为严重的传染病之，严重制约了我国一养犬业，、经济动物养殖业和野生动物保护业的发展。因此建立种快速、离效的特异性检测方法对于该病的防控具有十分重要的意义。本试验采集延边地区自然感染犬痛热病毒患病犬的组织病料，提取ＣＤＶ全－－ＭＤ－基因组，利巧民ＴＰＣ民方法扩增ＣＤＶＨ基因，将其克隆至ｐ１８Ｔｓｉｍｐｌｅｖｅｃｔｏｒ－－－ＭＤ－－－载体，构建重组克隆质粒ｐ１８ＴＣＤＶＨ，并将ｐＭＤ１８ＴＣＤＶＨ与ｐＧＥＸ４Ｔｌ公ｆｌｗＨＩ和拟－－载体经

8、ｚｏｌ双酶切，构建重组表达质粒ｐＧＥＸＣＤＶＨ，转化至０巨＋８心２１（，通过对不同温度ＩＰＴＧ浓度、Ａｍ引表达菌株、ｐ浓度和诱导时间等条ＳＤＳ－件的优化进行重姐蛋白的表达，利用ＰＡＧＥ