《广西田七真菌性病害的病原、发生规律及防治研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
巧古学位论文广西田走真菌性病害的病原、发生规律及防治研究－一＾周颖－．－。六年六月．；．Ｖ；權喔■．４衰； 分类号Ｓ４３２．１密级公开ＵＤＣ硕±学位论文广西田＾；：真菌性病害的病原、发生规律及防治研究周颖学科专业植物病理学指导教师韦继光教授论文答辩日期２０１６．０５．２１学位授予日期２０１６．０６．３０答辩委员会主席吴海燕教授论文评阅人双盲评审 广西大学学位论文原创性和使用授巧声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研巧成果。除己特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料一。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：□保密，在年解密后适用授权。保密。＂＂（请在１＾＾上相应方框内打Ｖ）．Ｇ．论文作者签名：简澈曰期：如１Ｇ之０：日期Ｚ．指导教师签名ｏＫＧ．Ｌｏ作者联系电话：电子邮箱： 广西田走真菌性病害的病原、发生规律及防治研究摘要一￣２０田走真菌性病害是影响广西田韦生产的重要因素之。２０１４１５年对广西田＾；：主要种植区的田Ａ真菌性病害进行了调查，明确了广西田屯真菌性病害的种类及其病原，对广西田七主要真菌性病害的发生规律进行调查，开展了防治试验，款得的结果如下：１．田走真菌性病害的种类及病原经过２年的调查，初步确定广西田屯真菌性病害主要有７种：田毛黑斑病－＇（＾４／献內０口幻７幻／１妨Ｗｈｅｔｚｅｌ）、田屯圆斑病［Ａｆｙｃｏｃ飢化哪〇厂口ａｃｅｎｎａＨａｒｄ／（ｇ）Ｄｅｉｈ化ｎ、田七＞？化妃ＢａｉｅｔＬｉｕ）、田尤灰霉病（公ｏ邸化ｃｉｎｅｒｅ口ｇ］；白粉病（￡７崎＇ＰｅｉＳ．）、田韦尸／〇月巧ｏｒａＣ幻Ｃ化ｒａｍＬｅｂｅｔｏｈｎｒ扣ｔ田４疫病［與戶（．Ｃ）Ｓｃｈ］、田七根腐病和；；；炭痘病。其中田韦黑斑病、田七根腐病和田走圆斑病是目前广西田七上的主要真菌性病害。田屯圆斑病和田＾：白粉病是广西田韦上新发生的病害。通过病原菌的致病性测－定、ＩＴＳ和ＴＥＦｌａ序列同源性比较及系统发育分化首次确定引、形态学特征观察’＇起广西田七根腐病的病原菌为凡ＭｎＭｍ诉ｒａ化Ｗ和仇ｓｏｎＭ／ｗ／ｗｃｏｒｎａ化ｍ。乂用形－－态学与多基因（核糖体转录间隔区序列ＩＴＳ、Ｐ微管蛋白基因ＴＵＢ２、３磯酸甘油酵脱氨酶基因ＧＡＰＤＨ、几下质合成酶Ａ基因ＣＨＳＩ、肌动蛋白基因ＡＣＴ）分子系统１７：学相结合的方法，确定从广西不同地方采集的个田韦炭痘菌菌株为四个种果生’‘炭痘菌Ｃｏ舱ｆｏ仍ｃ／ｉｗｍ／ｈ／ｃ妃〇如、异形炭痘菌ＣＷ／ｅｔｏ化ｃＡｍｗ立类炭痘菌．＇Ｃｏ化化化ｃ／ｊＭ／ｎ化ｍｃａ化ｍ和胶抱炭痘菌仿庇化化！亡／２？饥如？６〇巧〇成加齡２．田屯真菌性病害的发生规律对广西田韦真菌性病害的发生规律进斤了调查，发现在广西百色市，田屯黑斑病与田屯圆斑病在高海拔地区发病重，田韦根腐病在低海拔地区发病重；避雨棚田走黑斑病，，在通风避雨棚和、圆斑病等病害比普通荫棚发病轻但白粉病在避雨棚发病重普通荫棚发病捏，田尤。；随田走韦龄的增长叶部病害的发病率降低Ｉ ３．田韦圆斑病的病害消长规律通过对田屯圆斑病的病害消长规律观测得知？，田屯圆斑病的发病高峰期在６７￣，６，病情指数逐渐上升，在６７月月前随病害发展月病情发展最为迅速；７月后，病情指数上升趋势逐渐减缓。４．田毛种子带菌检测结果对四个田韦种子样品进行带菌检测，检测到田屯种子外部携带的真菌种类有炭痘’‘菌属（ＣＷ／ｅ化化ｃＡｗｗｓ．）＾４／似Ｔｊａｎａｓ．）、ｐｐ、链格抱属（ｐｐ青霉属（ｊＰ加Ｃ胤Ｍｗｓｐｐ．）、’＇ｚｏｗｓ．）、ｕｃｏｒｓ）、Ｆｗ根霉属（Ｗｎｐｐｐ毛霉属（Ｍｐｐ．鎌刀菌属（ａｎＭＷｓｐｐ．）、曲霉属＇（心ｅｓ）．）和枝抱属（０７〇此ｏｎＭｗｓ．）尸ｐ巧ｐｐ巧ｐｐ，优势菌群为青霉属（ｅｎ妃侃ｉｗ）ｓｐｐ．、嫌刀菌属（Ｆｗｗ乱ｗｓｐｐ．）和曲霉属（心戸哈／／ｗｓｐｐ．），其中雜刀菌属所占比例最大；种子内部所携带的真菌种类有炭痘菌、青霉、根霉、毛霉、嫌刀菌、曲霉和枝抱，优势菌群为嫌刀菌属和青霉属。对从种子带菌检测中分离得到的链格抱、鎌刀菌和炭迫菌进行致病性测定，１０，其中炭痘菌在刺伤条件下致病发病率仅％，经形态学及ＩＴＳ序列分析鉴定属于果生炭值菌（。舱ｔｏＷｃ／ｍｗ／ｒｗｃ妃０山）；部分鎌刀菌菌株为根部条件致病菌，链格抱和其余真菌为非致病菌。５．田毛主要真菌性病害的防治研究开展了圆斑病田间药剂防治试验一，结果表明，所选５种药剂和种生防菌对田七一圆斑病均有定的防治效果，Ｗ丙环哇、咪鲜胺和生防菌Ａ１６防治效果最佳。用６种药剂分别处理种子对病害的防治试验结果表明：味鲜胺对田七种子的影响最小，且防病效果最好。福美双和味鲜胺对田毛种子的消毒效果较好。在使用福美双对田屯种子进行处理时采用浸种的方法较好。采用的遁雨与畦面滴灌相结合栽培田屯的方式对病害的控制效果非常明显。关巧词：田毛；真菌病害；调查；种子带菌；多基因分子系统学分析１１ ＴｈｅＩｎｖｅｓ村讨ｏｎｏｆＰａｔｈｏｅｎｓＯｃｃｕｒｒｅｎｃｅＲｅｕｌａｒｉｔａｎｄｇａｇ，ｇｙＣｏｎ化ｏｌｏｆ戶ｚｉＷｏ如ＦｕｎｇａｌＤｉｓｅａｓｅｓｉｎＧｕａｎｇｘｉＺｈｏｕＹｉ打ｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃ山ｔｕｒｅ，ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００４，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓ化ａｃｔ戶幻ｎ口；ｃ内ｏ化ｇ／只ｓｅｎｇｆＵｎａｌｄｉｓｅａｓｅｓｗｅｒｅｒａｔｅｄａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｉｍｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒｓｏ打ｇｐ－Ｐａｎａｘｎｏ化ｇｉｎｓｅｎｇｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎＧｕａｎｘｉ．Ｄｕｒｉｎ２０１４２０１５ｔｈｅａｔｈｏｅｎｓａｎｄｐｇｇ，ｐｇｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆ乃。／０／打＊？６灼ｍａｌｄｉｓｅａｓｅｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉａｔｅｄａｎｄｃｏｎｔｒｏｌ容《ｆｉｇｇｅｘｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｓｈｏｗｎａｓｆｏｌｌｏｗｓｐ：１．ＳｅｃｅｓａｎｄａｔｈｏｅｎｓｏｆＰａｎａｘｎｏｔｏｉｎｓｅｎｆｕｎａｌｉｓｅａｓｅｓｐｉｐｇｇｇｇｄＦｕｎｇａｌｄｉｓｅａｓｅｓｏｆ戶ａｎｃｊｃｗ口化挪ｉｎＧｕａｎｇｘｉｗｅｒｅｋｎｏｗｎｂａｓｅｄｏ打ｆｉｅｌｄｉｎｖｅｓｔｉａｔｉｏｎｗｈｉｃｈｉｎｃｌｕｄｅｄ戶幻ｗａｘｎｏ的文ｃＭｇｂｌａｃｋｓｏｔ拍灼幻片幻口打ａｘＷｈｅｔｚｅｌｇ，ｐ），Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｒｏｕｎｄｓｐｏｔ［Ｍｙｃｏｃｅｎｔｒｏｓｐｏｒａ幻ｃｅｒｆｗ幻（Ｈａｒｔｉｇ）Ｄｅｉｇｈｔｏｎ］，尸幻灼化ｒ巧ｏ化各／ｎ此巧各ｐｏｗｄｅｒｙｍｉｌｄｅｗ（￡＞７ｓ少Ａｅ戶幻巧幻ｃ／友ＢａｉｅｔＬｉｕ），戶幻内口义巧〇沁各／ｒｔｘｅ巧ｇｇｒｅｙｍｏｕ；ｅ化ａｅｒｓ．ｔｅ？巧ｌｄ公０的记５ｅｒｎＦ戶幻ｗａｒ如成ｗｇｂｌｉｈ戶／皆化ａｚｃ化ｒｗｗＬｂ（），ｇ［（Ｃｏｈｎ）ＳｃｈｒＯｅｔ］，ｆ口巧幻；ｃ巧ｏ化各如ｓｅｗ各ｒｏｏｔｒｏｔａｎｄ戶幻Ｍ口ｙ巧ｏ化各扣５６巧各ａ打ｔｈｒａｃ打ｏｓｅ．尸幻ｗａｘ巧０／０各切ｙｅｎｇｂｌａｃｋｓｐｏｔ，尸幻ｎｏｘｗｏｆｏｇｉｎｓｅｎｇｒｏｏｔｒｏｔａｎｄ户幻巧ｏｘｎｏｆｏｇ／灼ｓｅ巧各ｒｏｕｎｄｓｐｏｔｗｅｒｅｍａｉｎｆＵｎａｌｄｉｓｅａｓｅｓｏｆ戶幻。ｏｘ。〇／０５６只ｉｎＧｕａｎｘｉ．尸幻。ｏｘ＂０／０各／／２ｓｅ７ｚ各ｒｏｕｎｄｇ各如各ｇ＂ｍｓｏｔａｎｄ尸幻巧ｏｘＭＯ化祈５£灼各ｐｏｗｄｅｒｙｉｌｄｅｗｗｅｒｅｆｏｕ打ｄａｓｎｅｗｄｉｓｅａｓｅｓｉ凸Ｇｕａ打ｘｉ．Ｉｔｐ各ｇｈ＇ｓｏｗｅｄｔｈａｔ幻ｎｗｗｒｏ／州ｆ／ｗｍａｎｄ户ｗｙ幻ｒ／ｗｍｚｎｃ幻饼口ｆｗｍｗｅｒｅｔｈｅａｔｈｏｅｎｓｏｆｐ於ｐｇ戶口乃口义ｗｏ把各／打文ｇ／７各ｒｏｏｔｒｏｔ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉ打ｅｄｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅｉｎＧｕａｎｇｘｉｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆａｔｈｏｅｎｉｃｉｔｔｅｓｔｍｏｒｈｏｌｏｉｃａｌｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｈｏｍｏｌｏｃｏｍａｒｉｓｏｎｏｆＩＴＳｇｙ，ｐｇ，ｇｙｐｐ－ａｎｄＴＥＦ１ｈｉｌＳｅｖｅｎＣｌｌｉｌａｓｅｑｕｅ打ｃｅａｎｄｐｙｌｏｇｅｎｅｔｃａｎａｙｓｉｓ．ｔｅｅｎｏｅ化化ｉｃｈｕｍｓｏａｔｅｓ＂ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｓａｍｐｌｅｓｃｏｌｌｅｃｋｄｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｗｅｉｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＣｂ／／ｅｆｏ沁／ｃＡｗｍｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ，Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｅｄｉｅｎｕｍ，ＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｎｍｅａｔｕｍａｎｄＣｏＵｅｔｏ化ｉｃｈｕｍ如ｍｙ／？加。施ｂａｓｅｄｏｎ化ｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｐａ化ｏｇｅ打ｉｃｉｔｙｔｅｓｔ，ｍｏｉｐｈｏｌｏｇｉｃａ】ｃｈａｒａｃｔｅｒｓａ打ｄ－－－－－ｌｔＩ－ｍｕｉｅｎｅｎｔｅｒｎａｌＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳａｃｅｒＩＴＳｔｕｂｕｌｉｎ２ｅｎｅＴＵＢ２ｌｃｅｒａｌｄｅｈｄｅｓ３ｇ（ｐ，Ｐｇ，ｇｙｙＩＩＩ 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目录１Ｍｍ１１１．１概述１２２．田毛病害研究进展２１．２．１田走根腐病１２２３．．田韦黑斑病１２．３田七４．圆斑病１２４田毛４．．炭痘病－１．２．５ｆｌｔ灰霉病５１．２．６田七疫病５１．３炭痘菌属分类研巧进展５．５１．３１炭痘菌属分类国外研究进展１３２６．．炭痘菌属分类国内研究进展１．３３田韦６．炭痘病病原菌相关种的分类研究１．３４７．分子系统分类学在炭痘菌分类中的应用１．４种子带菌检测研究进展８１．４．１种子带菌检测方法９１．４２９．种子带菌处理技术研究进展．１０１５本研究的目的、意义和技术路线１．５．１本研究的目的和意义１０．１１．５２本研究的总体技术路线１２材料与方法１２２１１２．材料２丄１１２病害样本的采集２丄２致病性测定供试田七植株１２２丄３田走炭痘病菌多基因分析供试菌株１２２丄４种子带菌检测供试田尤种子１２２丄４所使用的主要仪器设备、用具及试剂１３２丄５结果分析所用软件２０ＶＩ ２．２田＾：真菌性病害调查方法２０广西２．２．１广西田七真菌性病害的种类调查２０２．２．２广西田屯真菌性病害的消长规律调查２１２．３病原鉴定２２２．３．１病原菌的分离与纯化方法２２２．３．２纯化所得菌株的致病性测定２３２．３．３病原菌的形态鉴定２４２．３．４病原菌的分子鉴定２４２．４广西田屯炭痘菌的单基因、多基因系统学分析２６２．５广西田屯种子带菌情况检测２７２．５．１种子外部带菌检测２７２．５．２２７种子内部带菌检测．．２５３种子带菌种类的鉴定２７２．６广西田＾：真菌性病害药剂防治试验２８２．６．１广西田走圆斑病药剂防治试验２８２．６．２８杀菌剂对种子的消毒处理效果检测２３结果与分析３０３１３０．广西田韦真菌性病害种类及发生与危害情况３丄１田走圆斑病３０３丄２田毛白粉病３１３丄３田七黑斑病３２３丄４田屯根腐病３３３丄５田走炭痘病３４３丄６田－ｂ灰霉病３４３丄７田屯疫病３５３．２广西田屯主要病害的发生规律调查３５３．２．１海拔与田Ｈ；：病害发生的关系％３．２．２荫棚类型与田屯病害发生的关系％３．２．３施用生物菌肥与田七病害发生的关系巧３．２．４田屯年龄与田七病害发生的关系４０ＶＩＩ ３．３广西田走真菌性病害的消长规律调查４０３．４病原鉴定４２３４１田４２．．毛根腐病病原鉴定３４．４．２田Ｈ；：黑斑病病原鉴定８３．４．３田走圆斑病病原鉴定４９３．４．４田屯炭痘病病原鉴定５０３５田屯、５４．广西炭痘菌的单基因多基因系统学分析３．５．１田屯炭痕病病原菌打Ｓ基因的分子系统学分析５５３．５．２田走炭痕病病原菌ＡＣＴ基因的分子系统学分析５６３５．３田屯ＣＨＳ基因的分子系统学分析５８．炭痘病病原菌３．．５４田屯炭痘病病原菌ＧＡＰＤＨ基因的分子系统学分析６０３．５．５田韦炭痘病病原菌ＴＵＢ２基因的分子系统学分析６２３．５．６田屯炭痕病病原菌多基因的分子系统学分析６４．６６６３广西田毛种子带菌检测＇３．６．１田屯种子外部带菌检测结果６６３．６．２田韦种子内部带菌检测结果６６３．６３０．田屯种子带菌致病性测定７３７田毛７０．真菌性病害药剂防治试验结果３７１田韦７０．．圆斑病药剂防治试验．．２７２３７杀菌剂对种子的消毒处理效果４结论与讨论７６４．１７６４丄１田尤真菌性病害种类及发生与危害情况７６４丄２田韦主要真菌性病害的发生规律７６４丄３田走圆斑病病害消长规律７６４丄４广西田七主要真菌性病害病原鉴定７６４丄５田屯种子带菌检测７７４丄６田韦主要真菌性病害的防治研巧７８４２７８．職４．２．１田毛真菌性病害的发生与发展７８ＶＩＩＩ ４．２．２田毛真菌性病害的病原鉴定７９４．２．３田毛炭痘病病原菌多基因分析８０４．２．４田七种子带菌情况８１４．２．５田屯真菌性病害的防治研究８１致谢８４参考文献８５附录９１ＩＸ ■？其苗化巧巧的巧化－广西大毕硕古掌化论文广西田＜：发生规伴及巧冶研巧、１前言１．１概述田屯ＰａｎｏＢｕ．Ｆ吐Ｃｈ，学名Ｈ七Ｌｘｎｏ化ｅｎ（ｒｋ．ｅｎ］，又名Ｈ走参巧加ｇ）、血参、金不换、山漆等，为五加科人参属多年生宿根草本植物，主要分布于我国西南部的云南９９４省文山州和广西壮族自治区右江流域（郑光植等，１）。田走是我国珍贵的传统中药材，早在《本草纲目》Ｗ前，就己有医药书籍对田多种名称进行了文字介绍，这些书籍对田屯的命名多与田屯的形态特征、产地、功效等有关（徐冬英，２０００）。一在我国众多的中药材中，田韦是少数对环境条件要求十分苛刻的品种么，也曾经引种到四川、贵州、湖南等多个省区进行种植，但由于其对温度、湿度、海拔、降雨量Ｗ及王壌条件等都有特定要求，因而在多地试图引种种植几乎都不成功。道地性对于药用植物的重要性在于，药用植物在原有的生长环境中生长，其内在的有效药用一成分含量维持在某水平，当药用植物被引种到其他地方种植时，由于对环境不适应，１２）就可能导致其有效药用成分含量的大幅降低，从而失去其药用价值（夏鹏国等，２０。田屯性温，、，主入肝味甘微苦、胃、大肠经。田走含有皂巧类物质、黄丽类成分、糖类、氨基酸、挥发油（荫类）、各种微量元素等上百种成分（Ｍａｅｔａｌ．，１９９９）。现代药理学研究表明，田屯除了具有止血、活血、补血、镇痛、镇静、降血脂、调节血糖等传统功用外，还具有降血压、抗血栓、抗衰老、抗休克、保肝利胆、增强免疫为、提髙记忆力等药理作用（何晶，２００４；文帕１蹲，２００５）。近年来，随着人们物质＂＂一，也出现了现代病生活水平的不断提高些。面对现代社会出现的各种食品安全问题，、城市生活中的各种光污染、汽车尾气带来的健康问题Ｗ及各种辖射隐患人们开始逐渐意识到养生保健的重要性，加之现代社会所产生的激烈竟争也使得人们面对、巨大的压力，随之而来的诸如屯脑血管系统疾病等问题，己成为人类健康的主要杀手，人们对医药的需求量因此不断増加。目前，提取田七中的各种有效活性成分用于治疗必脑血管系统疾病己成为一个研究热点。田七作为发展潜力巨大的也脑血管系统用药，其需求量巨大。早在２００１年，全国对田走的总需求量就己突破１２０万公斤，而其中８０％都应用于医药工业，目前用量最大的几个产品是：复方丹参片、兰屯片、Ｈ屯伤药片和跌打丸（褚建君，２００１）、血栓通（云南称血塞通）、云南白药等。如此巨大的用药需求要求人们规模化种植田七满足药品生产需求，但田七所要求的无严寒、无酷暑，，，冬暖夏凉潮湿的生长环境决定了田韦狭小的生存地理范围（李冠烈１ 广西大単项女単位论文广西田－ｆｅ真苗化病存巧病化生规难及巧谁研巧、发２００８）。田走的生长环境导致其易发生多种病害，较长的种植年限使得随着种植年限一的增加，病害发生的种类和严重程度也呈现上升趋势，。同时单规模化种植带来的病害种类不断增加，发病程度不断加剧的现实与田七极强的忌连作性也向田走的种植生产提出了一一大挑战，田屯病害己成为阻碍田七产业发展的大重要因素。１２．田走病害研究进展目前田韦已报道的病害主要有黑斑病、圆斑病、炭痘病、根腐病、灰霉病、疫病一等。田屯病害已成为阻碍田七产业发展的大重要因素，尤其是田屯根腐病。根腐病一，只能挖除的发生直接导致田屯植株宣判死亡，否则将使病情进步蔓延，最终导致田韦减产。１．２．１田毛根腐病田屯根腐病是田七生长过程中最严重的病害，症状类型多样。缕作清（２００６）等通过田间调查将田七根腐病归为黄腐型、湿腐型、髓烂型、干裂型、急性青枯型和茎基干枯型６种症状。田韦根腐病的病原菌最早的报道是由浙江省卫生局（１９５２）鉴定＇＇出的藤草雜抱霉（仇ＭｎＭｗｓｃｚ咕ｚＬａｍｂ．＆Ｆａｕｔｒ），阮兴业等（１９８６）报道田七根腐ｆ＇病的病原菌为腐皮嫌刀菌［ｓｏ／ａｗＭａｒｔ．Ｓａｃｃ．］。之后，人参链格抱Ｏｉ／ｔｅｒｎｗ如ｆａｎｏｘ（）Ｅ．Ｆ．ＳｍＷｈｅｔｚｅｌ）（王淑琴等，１９８９）、尖袍嫌刀菌化〇巧巧ｏｒｕｍ．＆Ｓｗｉｎｇｌｅ）和串珠ＰＷ？嫌抱中间变种Ｃｍｏｎ矿ｏｒｍｅＶ化切似讯ｅ況ＭｍＮｅｉｓｈ＆Ｍ．Ｌｅｇｇ）（王拱辰等，１９９１）等均有报道为田屯根腐病的病原菌。罗文富等（１９９７）则报道从田走根腐病不同发病＇期根部分离到假单抱杆菌（Ａｅｗ如／Ｍｏｎｏｓｓｐ．）、腐皮嫌抱ｓｏ／ｏＴＯ）、细链格抱菌＇（並ｅｒｎａｎａ似７ＭＺ一和小杆线虫（／ｆ／ｚａＺ）況妃并通过混合接种的方式首次报道假单抱杆菌（＆ＣＭ成？ｗｏｍｗ巧．）在这几种菌构成的复合侵染中起到主要作用。喻盛甫等（１９９８）发现小杆线虫单独存在时并不能引发田屯根腐病，但小杆线虫对田毛根腐病的进程有促进作用。王朝梁等（１９９８）对田七根腐病的发生流行与环境条件关系作了分析，认为气温’２０Ｃ，相对湿度大于９５％的环境条件利于病害的发生与蔓延，透光率大于３０％、排水不畅、止壤持水量过多的地块发病严重。陈县君等（２００１）的调查表明田屯根腐病的发生与海拔、地势、王壤类型、轮作年限、遮荫条件、前巧作物等生态因子关系密切。官会林等（２００６）对田屯±壤微生物类群动态与根腐病的关系的研究结果表明，田七根腐病与根系王壌中的霉菌，、放线菌和细菌中的厌氧生长菌有较为密切的关系２ 广西田七真巧？１生病鲁的病原论巧究广西大単硕古学化论文、发生规＊及巧这３类菌群在不同季节的存活量高峰期正与田屯根腐病的高发期相对应。王勇等一（２００７），施的研究表明，田七根腐病与不同类型的肥料配比具有明显的相关性单用尿素，田七根腐病的发生蟲著重于其它处理；过量施肥会导致根腐病的发生加重。汪静等（２０１５）对田七根腐病病原菌进行了室内药剂防治试验，结果表明甲基硫菌灵。刘立志等（２００４）筛选了３、多菌灵、腐霉利对田七根腐病菌的抑菌效果最好＂株对田屯根腐病病原菌坏损柱抱菌（成Ｏｃａ扭〇？ｒＭＣｆａ／ＪＳ）括抗作用较好的芽抱－－－－Ｙ－４７０Ｘ－５１５５３２杆菌、和Ｘ。杨建忠等（２０１０）利用５０％多菌灵、９５％恶霉灵、？２５％甲霜灵霜霉威和７２％农用链霉素复配的药剂分别采用盆栽处理、田间试验和大田示范Ｈ种方式试验，表明用该复配剂处理田毛连作地，对田韦苗期的根腐病控制效果明显（２０１１，２０１２）田七的内生菌进行了分离，筛选到了３株对田毛。张玉洁等对根腐病的主要病原菌坏损柱抱菌（Ｃ．有很强抑制作用的内生茜。张伟等（２０１３）通过对８种植物的挥发物及浸提液对田屯根腐病病原茜的抑制活性的测定，发现大蒜挥发物及浸提液对田屯根腐病菌的抑菌活性最强。－１．２．２田ｂ黑斑病王淑琴等（１９８０）对云南文山、广西和广东的田走黑斑病病样进行分离，认为引一个种起田走黑斑病的病原与引起人参和西洋参黑斑病的病原同属于，即人参链格抱’Ｃ４／＾？ａｎａ７ａｗｆｌｘＷｈｅｔｚｅｌ）。韦继光等（１９９１，１９９２）对广西靖西县的田七ｉ黑斑病进／、、行了调查，对黑斑病的病害分布症状特点病原、发病特点等进行了描述。王朝梁等１９９８）田韦黑斑病的发生与遮荫棚的透光率、温湿度有关，光强增加，发病（认为％？严重，０１５％适温高湿条件下田屯黑斑病发病严重。陈呈君等适宜的透光率为１；（２００３）的调查结果表明：海拔越高，田七发病越重；缓坡地的韦园发病率高于平地七园，黑斑；田走植株龄期越长病发病率越低。陈畳君等（２００５）对田七黑斑病病原菌的生物学特性进行了研究，结果显示田七－２２￣２８ｒ２０黑斑病病原菌菌丝生长最适温度为，抱子萌发最适温度为Ｃ；菌丝生长的￣Ｈ范围为３１１，ｐ，最适ｐＨ为６；甘油为碳源时利于产抱最适氮源为蛋白胳和硫酸倭。冯光泉等（２０００）的研巧结果表明腐霉利、菌绝王对田屯黑斑病的防效高于生产上常用的多抗霉素和代森锭两种杀菌剂。陈豆君等（２０１２）通过不同药材对田走黑斑病病原的控制作用研究发现，泽兰、山蔡所含的物质对田毛黑斑病菌的抑制作用较强。王勇等（２０１３）分析了几种杀菌剂的保苗、防病效果１＾及对田毛质量的影响，并得出３ －ｔ真苗化病宙的病化及巧巧研变广西大单巧女単位论文广巧田、发生规带了丙环嗤、爱苗和睛菌嗤Ｈ种推荐在生产上进行推广使用的药剂。王勇等（２０１４）还用７种生物源农药对田七黑斑病进行了田间防效试验，筛选出多抗霉素和宁南霉素作＂＂为田韦种植安全生产可施用的绿色农药。＂１．２．３田ｆｃ圆巧病＇Ｄ田走圆斑病由械菌刺抱Ｌａａｃｍｎａ（Ｈａｒｔｉｅｉｈｔｏｎ引起（刘云龙卸ｇ）ｇ］等，２００２）。目前对田尤圆斑病的报道相对较少，研究也主要局限于病原菌的鉴定及其生物学特性的相关研究。陆宁等（２００５）对田七圆斑病的病原菌进行了生物学特性的研究，其室内测定试验结果表明械菌刺抱ＰＤＡ培养基为其最适培养基，最适碳源为木糖，最适氮源为°°２８Ｃ￣牛肉膏。其菌丝生长温度范围为＾，最适温度为２０Ｃ茜丝生长Ｈ范围为３１１，；ｐ°Ｈ６￣１４２（ｒＣ，最适ｐ为。械菌刺巧分生抱子在温度为时均可产袍产抱最适湿度为１８Ｃ；°’￣３ｒＣ抱子萌发温度范围为４，最适温度为１８Ｃ５５Ｃ，ｌＯｍｉｎ（陆；抱子致死媪度为２００５）宁等，。一王勇等（２００３）对田走圆斑病的发生与环境条件的关系进行了些研究，其结果表明田走圆斑病发病率随海拔升髙而增加；地势低注的走园田走圆斑病的发病率高于６￣２２１地势开飼的屯园；当园内日均温达到１：，空气相对湿度在８０％＾＾上３（并持续天一屯龄下Ｗ上时，田韦圆斑病开始发生。；同，圆斑病发病率随毛园透光率增大而增加曾莉等（２００３）报道４５％圆斑净可湿性粉剂５００倍液在田间进行药剂防治试验也能取得较好的防治效果。陈畳君等（２００４）报道在病害发生初期，用代森猛巧、喷克等药剂喷雾对田韦圆斑病的防治效果较好，施用及时可控制病害蔓延００４）。王勇等（２用１８种农药对田七圆斑病病原菌进行室内抑菌实验，筛选出在室内和田间防效均较好的福星＋春雷霉素。关于田屯圆斑病的生物防治方面的研究，目前尚无报道。－１．２．４田ｂ炭痘病韦继光（１９８９）等对靖西县的田七炭迫病病原进行研究时发现，田尤炭痘病的病＇＇Ｗ＇原为胶抱炭痘菌（ＣｏＷｅｔｏ化ｃＡｍｗ如）ｅｃｗ／ｗｎｏｅｙＰｅｎｚ．）和黑线炭痘菌［Ｃｏ／／ｅ化化ｃＡｍ／ｗ（ｄｅｍａｔｉｕｍ．ＧｒｏｖｅＣ＼（Ｃ．ｌｏｅｏｓｏｒｉｏｉｄｅｓ）、Ｃ２灼、既￥了］ｉｌｏｅｏｓｏｒｉｏｉｄｅｓ）、）；有Ａｇｐ仁ｇｐ巧Ｃ３Ｃ沁ｗａ化／ｍ巧日Ｃ４Ｃ．此／Ｍ加ＭＷ株为代表的四种形态型现ＷＣｌ（Ｃ（（）菌；并发）菌株为田七；炭痘病的优势菌株。何振兴等（１９８８）对田毛炭垣病与环境因子的关系做了调查，调查结果显示随海，田，炭痘病发病重■拔高度降低七炭痘病发病越重；荫棚透光率过大的七园；ｙ钟肥４ ―广西大単硕古単位论义广西田女真苗’圧病宙的病原＇发生规巧及防：合研宝，。（１９９０）为主，辅Ｗ氮肥的施肥方法炭痘病发病少韦维光等还对田走炭痘病进行了病害调查和药剂防治试验，结果表明田毛炭痘病的病情增长主要与降雨有关；透光。率增大叶斑症状大量增加；低海拔区田屯炭痘病发病比高海拔区重药剂防治试验结果表明甲基托布津和代森待对田七炭痘病防治效果较好。１．．２５田４：灰霉病■ｃ陈树旋（１９９０）将田屯灰霉病病原鉴定为灰葡萄抱菌（公０巧地ｚＴｉｅ化ａＰｅｒｓ．ｅｘＦｒ．）。齐善厚（２０１４）用１２种药剂对田七灰霉病菌进行抑菌效果试验，结果表明腐霉利对田毛灰霉病的抑菌效果最佳。１．２．６西＾：疫病王勇等（２００７）将云南文山的田４：疫病病原菌鉴定为恶疫霉［尸化从巧〇脚妙／Ｃ口沈．ｅｔＣｏｈｎ）Ｓｃｈｒ６ｅ１；］。对田毛疫病的发生相关因子的调查结果显可田屯８疫病的发病率随海拔的降低而升高，但在田韦生长中后期的至１０月份，其发病率、随海拔升高而升高；排水不畅荫棚透光率过大、轮作间隔期长、施用硝酸较的地块发病重（王勇等，２００７）。田毛疫病病原菌的生物学特性测定结果表明，田屯疫病菌°‘５￣３２Ｃ２４￣２６Ｈ３？１２Ｈ其茜丝生长的温度在，最适媪度Ｃ；菌丝生长ｐ在，最适ｐ为￣适碳源为甘露醇５８，最适氮源为ＫＮ０（，２００８）。；最３王勇等１３炭痘菌属分类硏究进展炭痕菌属隶属于真菌界（Ｆｕｎｇ，子ｃｏｍｃｏｔａ），ｉ）囊菌口（Ａｓｙ盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），粪壳菌纲（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ），肉座菌亚纲（Ｈｙｐｏｃｒｅｏｍｙｃｅｔｉｄａｅ），小丛壳目（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ），小丛壳科（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ），炭痘菌属（Ｃｏｒｄａ），其有性态为小丛壳属（饼ｏｍｅｒｅ航）。１．３．１炭迫菌属分类国外研巧进展一基于传统的Ｓａｃｃｏｒｄｏ分类系统，炭痘菌属真菌种的数量度达到上千个之多，直到１９巧年，ＶｏｎＡｒｘ（Ｖｏｎ，１９５７）建立了Ｗ分生抱子和附着胞的形态及大小为分，类依据的炭痘菌分类系统，重新对前人报道的上千个种进行了鉴定将炭痘菌属种的数量鉴定为２３个种及种Ｗ下的分类单位。Ｓｕｔｏｎ（１９８０）于１９８０年整理并收录了２２９９０一个炭痘菌属合格种。１年，炭痕菌属的第次国际研讨会的举行促进了炭痘茜属研究领域对分子生物技术的应用（Ｂａｉｌ巧ｅｔａｌ．，１９９２）。２００９年，真菌多样性（ＦｕｎｇａｌＤ一一ｉｖｅｒｓｉ巧）杂志期对炭痘菌属专题的发表标志着炭痘菌属系统分类学迎来了又个５ 广西大学硕古学化论文广西田女其苗性病存的病巧、发生规带及巧诺巧突一里程碑；２０１２年，真菌学研巧杂志（ＳｔｕｄｉｅｓｉｎＭｙｃｏｌｏｇｙ）也切专刊的形式发表了期关于炭痘菌属的分类系统研究的期刊，专刊中又引入了４１个炭痘菌新种，使现有炭追菌属种的数量达到了１０７个；２０１３年，真菌分类杂志（ＦｕｎａｌＤｉｖｅｒｓｉｔ）又引入ｇｙ了１８个炭痕菌新种（符丹丹，２０１４）。１．３．２炭痕菌属分类国内研巧进展戴芳爛（１９７９）在《中国真菌汇总〉〉中记载了７１种刺盘抱属的ｄｍｗＣｏｒｄａ）、’５种丛刺盘拖属（獻ＴｍｃｗＺａＷｃＴｏｄｅｅｘＦｒ．）、２９种盘长抱属Ｄｅｓｍ．ｅｔＭｏｎｔ．）及５种炭痕菌属的有性态小丛壳属（Ｇ／ｏｍｃ／Ｗ／ａ）。王晓鸣等（１９８７）从陕西省采集的标本中鉴定出１５个炭追菌属合格种，其中包含１个中国新记录种。吴文平等（１９８８）从河北省采集的标本中鉴定出１４个炭痘菌属合格种，其中包含５个河北省新记录种。喻璋（２００２）从河南省采集的标本中鉴定出１８个炭痘菌属合格种。杨友联（２０１０）采用形态学与分子生物学相结合的方法，将从云南、贵州和广西Ｈ省采集的标本中分离得到的１９０株炭痘菌菌株鉴定为２２个分类单元，其中包含了５个中国新记录种。１３３．．田古炭痕病病原菌相关种的分类研究１．３．３．１果生炭擅菌（ＣＷ／ｅ化幻Ｐｒｉｈａｓｔ．，Ｌ．Ｃａｉ＆Ｋ．Ｄ．Ｈｙｄｅ）果生炭痘菌（Ｃｏ斯ｆｏ的ｃ／ｍｍ如ｗｃ加ｏｔｏ）最早报道分离自泰国咖啡。果生炭痘菌Ｃ－．／Ｈｉ诚ｃｏ／ａ的模式种为ＭＦＬＵ０９０２２８，其附属种菌株ＢＤＰＩ１６现保存为ＩＣＭＰ化扔＇１８５８１。仅靠ＩＴＳ基因不能将Ｃｙｈ／如ｃｏ／ａ与Ｃｂ／／ｅｃＡｗｍ？ｓ／ａｍｍｓｅ的部分菌株封及Ｃｂ旅化化／ｃＡｗｎａｅｓｃＡ聊ｗｅｎｅｓ区分开来，但用ＧＳ基因或ＳＯＤ２基因可Ｗ每它们很好ｊ－ａｓｔｕ－地区分开（Ｐｒｉｈｔｉｅｔａｌ．，２００９）。民ｏａｓ等（２０１０）曾分出两个分类亚群Ａ４３和Ａ５４，ｊ这两个不同单体型的分类枝所包含的菌株在形态学特征和培养性状等方面有很多相＇化妍一似性。Ｃ如ＷＣ舱〇／口和Ｃｂ／／ｅｃ／ｍｗＺ如０論１在同个单体亚稍中。’’１．／／／／ＢＳ．ｉＰ．民．．３．３２异形炭痕菌（Ｃｂｅ化仍ｃｚｗｗ口ｚｅ打ｗｎ．Ｗｅｒ足Ｊｏｈｎｓｔ）异形炭痘菌（〇＞旅／０的ｃ／ｍｗａ旅的模式标本为ＰＤＤ１０１９９６，其附属模式标本菌株现保存为ＩＣＭＰ１２０７１。该菌曾被归为胶抱炭痕菌（ａ）／／別〇扔ｃ／ｍｗ各沁ｓＸＪｏｈｎｓｔｏｎｅｔａｌ．，１９９７；Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅｔａｌ．，２００５）。ＩＴＳ基因无法将Ｃ与Ｃ別ａｗｅｗ旅的某些菌株区分开，但ＣＡＬ和ＧＳ基因可則尋其很好的区分。‘１．３．ｔｏ．．．．３３狂类炭痘菌［Ｃｏ／ｏ机ｃＡｗｍｆｒｗｎｃａｆｗｗ（ＳｃｈｗｅｉｎＡｎｄｒｕｓ底ＷＤＭｏｏｒｅ］）豆类炭痘菌一（ＣｂＷ別ｏｆｒ／ｃ／ｗｗ价ｗｃ加ｗｍ）仅包括个主要种Ｃａｎｎｏｎ等（２０１２）。６ －广西乂単硕古单位论义广西田女及？苗化巧宙的病化巧巧究、发生规带及巧＇＇＇＇经过多位点分析发现ＣｏＷｅ的化ｃ／ｍｗｆｒｗｉｃａｆＭＭ占据Ｃｏ／／ｅＷｎｃ／／ｏｅｏｓｒｃｆｅｓ和ｕ＜ｍｇｐｏｚｏｚＣ一ｏ／／幻ｏ化ｋＡｗｍｂｏｎｍｅｎｓｅ的个姊妹枝。１．４［Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌｏｅｉｏｉｄｅｓｅｎｚ．Ｐｅｎｚ．＆ａｃｃ．．３．３ｇｏｓｐｏｒＰ）Ｓ］（Ｃ＇’胶胞炭痘菌（ｏＷｅｔｏ化ｃ／ｊＭｚｎｇ／ｏｅｃｗｐｏｎｏ／ｄｅｓ）寄主范围广泛，其菌落颜色与性状、分生抱子的大小高度可变，附着胞形态等形态学特征及菌落生长速率等培养性状的种内分化明显，使得在鉴定中这些特征变得不可信（Ｓｕｔｏｎ，１９８０）。２００９年，Ｃａｉ等（２００９）－首次采用ｒＤＮＡＩＴＳ，ＴＵＢ２，ＣＡＴ和ＧＤＰＨ等多基因序列分析的方法，重新比较鉴’定了典型的Ｃｏ航ｆｏＷｃＡｗｗ如？ｍｓ／ｊｏｎｏｚ麻？，并从中分出六个亚种。１．３．４分子系统分类学在炭痘苗分类中的应用在２０世纪９０年代之前，炭痘菌属真菌的分类主要采用形态学特征进行分类。生物科学技术的发展日新月异，Ｗ分子标记为基础的系统学研究方法Ｗ及相关技术也随之被广泛应用到真菌的分类研究中。从分子水平上反映真菌的差异，比形态学特征。，对真菌进行分类更加科学准确１＾核昔酸序列为基础的系统发育分析中核糖体转录－－ｉｎ间隅区（ｒＤＮＡＩＴＳ）的应用最为广泛，而肌动蛋白（Ａｃｔ，ＡＣＴ）、３踞酸甘油酸脱－－－－ｔＡＰＤＨ－ｔ氨酶（ｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅｓ３ｈｏｓｐｈａｅｄ浊ｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，Ｇ）、３微管蛋白（Ｐｕｂｕｌｉｎ２，ｇｐ｜ＴＵＢ２）和几下质合成酶（ｃｈｉｔｉｎｓｙｎｔｈａｓｅ，ＣＨＳＩ）等也被广泛应用于真菌的分类研究中。ＩＴＳ序列在炭痘菌属的分子系统学研究中应用广泛。例如，在形态学分类阶段被鉴定为利用打Ｓ序列一Ｍｏｒｉｗａｋ进行分析后，独立为个新的分类单元（ｉｅｔａｌ．，２００３）。然而ＩＴＳ在炭痘菌属的系统学研充中也具有局限性，许多近缘相似种用ＩＴＳ不能有效鉴别，ａ。此外Ｃｉ等（２００９）对Ｇｅｎｂａｎｋ中的序列进行检索，发现炭痘菌属真菌的ＩＴＳ序列错误率达％％社。一由于ＩＴＳ序列在分类研究中存在局限性，其它些有足够分辨为的基因序列逐渐受到了研究者们的关注。采用多个基因片段的序列分析使得真菌种类的鉴定更加准确，多基因序列分析越来越多地被用于真菌分类及系统发育的研巧中。Ｔａ化ｉｎｈａｓ等一（２００２）第次将多基因序列分析应用于炭痘菌属的分类研巧中，他应用打Ｓ、ＴＵＢ２和ＨＩＳ４基因分析了羽扇豆病原菌的尖抱复合群。此后，多基因序列分析渐渐成为分类研巧常态。Ｄａｍｍ等（２００９）采用打Ｓ、ＡＣＴ、ＣＨＳ１、ＴＵＢ２、ＧＡＰＤＨ化及ＨＩＳ３等６个基因，通过联合建树分析，将弯袍类的炭迫菌进行了区分并得出４个新种。７ 广西大単项古単位论文广西田女真苗性病存的病化；ａｅｊｓｉ、发带＆化治巧兜Ｃｒｏｕｃｈ等（２００９）用打Ｓ、為ｔｗ２、和＆＞出等４个基因联合分析，将从形态上极难分辨的集合种Ｃ＇ｏ／／ｗ〇ｆｎｃＡＭ７？ｇｒａ／Ｍ切ｃｏ／ａ区分开来。２０１３年，Ｔａｏ等（２０１３）通过形态学特征与４个基因的多基因系统分析相结合的方式，从广州的黄花白裳叶片上分离到的％株内生炭痘菌菌株中鉴定出７个新种。Ｈｕａｎｇ等（２０１３）将从浙江、７江西、广东、广西等省采集的巧橘和金橘标本上分离获得的炭痘菌菌株，通过形态学特征与６个基因的多基因系统分析相结合的方式鉴定出２个新种。Ｌｉｕ等（２０１３）将从龙眼上分离出的炭痘菌菌株通过形态学恃征与７个基因的多基因系统分析相结合的方式鉴定出２个新种。采用形态学特征与多基因系统学相结合来鉴定炭痘菌属真菌已成为准确鉴别炭迫菌的重要手段。１．４种子带菌检测研究进展种子是种子植物的繁殖器官，现在大田栽培的各类作物大多都是通过播种种子来进行生产的，种子既是我们生产优质作物的源头，又是保证作物品质和产量的基础。一但由于作物的种植面积不断扩大Ｗ及单化的种植模式，作物所发生的病害种类和发＾病程度均不断增加。许多病害可文通过种子带菌的方式进行远距离传播并影响种子质量、降低种子发芽率或影响幼苗活力，最终导致作物减产。种带真菌病害的发生及种子的侵染程度，与产地、品种、播种和收获时间Ｗ及环境条件等有关（Ａｖｉｌｌａｅｔａｌ．，２００３）。Ｄｗｉｖｅｄｉ等（１９９０）研究发现，不同品种的种子一，即使是同品种的种子中分离得到的真菌种类和分离频率存在差异，在不同的培养条件、培养基质中分离得到的真菌种类和分离频率差别也很大。刘西莉等（２０００）的研究也发现水稻种子上真菌的分离频率与产地有关。一种传病害是指种子携带病原菌进行传播的类病害（Ｎａｓｒｅｅｎｅｔａｌ．，２００９）。带菌一一种子是许多重要病害的初侵染来源，也是病害在下年仍可传播的大原因，更是许一多新作地发生病害或很多地区作物发生新病害的重要原因之（Ｓｈｅｕｅｔａｌ．，２００９）。一因此，在调运种子或种子播种前进行种子带菌检测是阻断种传病害传播的种有效手段。国内外的研究者们在种传病原菌的检测方面做了许多研究。＇Ｒ■ｉａｚ等（１９９５）对水稻种子进行了检测，分离到ＦｗａｎＭ／ｗ、心ｐｅｒ奶／ｍ？ｓ等多种真’菌。Ａｓｌａｍ等（２００５）从小麦种子上检出ｔｅｎｗｚｓ、等五种真菌。任銃忠等（２００７）利用特异性ＰＣ民对好瓜种子携带燕麦嗜酸菌属西瓜亚种（如Ｗｏｖｏｍｘａｖｅ？ａｅｓｕｂｓｐ．Ｃ＂ｒＭ化）病原菌的快速检测进行了研巧。８ ■广西大単巧古単位论义广西田－ｆｃ其苗化巧宙巧病原发生规常及巧巧研巧、Ｓａｌｅｅｍ等（２０１４）从豆科植物的种子中分离到了产生淀粉酶的真菌。Ｓｈｅｔｔｙ等（２０１１）＇从己西花椒种子携带的病原菌中分离得到ｉＶｅ〇／Ｍ＊ｙ！ｃｏｃｃｗ？ｂａｆａｎｇａｒａｗ，发现该菌株可一种潜在生物防治剂作为控制该地的外来入侵植物的。１．４．１种子带茵检测方法目前种子带菌检测的方法主要有：田血清学反应和分子生物间观察；平板培养；一学技术等（刘志勇，２０１２）。Ｆａｔｍｉ等（１９８８）发明了种能从种子上分离番茄细菌性，且具有较高的分离率９９４）ＰＤＡ溃瘍病菌的选择性培养基。Ｄｕｆｙ等（１向培养基中添加甲基立枯磯和利福平后，可从小麦种子上分离出全蚀病菌（Ｇａｅｗｍａｎｎｏｗｙｃｅｓ容ｒａｗｍｗｖａｒ．化Ｙ切）。Ｌａｇｅｒｂｅｒｇ等（１９９５）用多克隆抗体ＥＵＳＡ法对小麦种子是否带有小麦颖枯病病原菌进行了检测。分子生物学技术因具有快速、高效、特异性好、灵敏度高等优点己广泛应用到植工作中－物病害相关研巧。随着分子生物学技术的不断发展，又出现了包括Ｂ防ＰＣＲ、－；ＲｅａｌＴｉｍｅＰＣ民等多种方法。巧光定量ＰＣＲ被应用于大麦种子上戶３化内〇／７＆〇厂口ｓｐｐ．（Ｂａｔｅｓｅｔａｌ．２００１．ＣＶ价’）、西瓜种子中的加ｏｖｏｒａｘ幻ｖｅ＂幻ｅｓｕｂ巧化和小麦种子中的’沁’Ｍｃｔｏｃ／ｕｗｎｍＶａ／ｅ．（Ｔａｙｌｏｒｅｔａｌ．，２００２）的分寓和检测中。Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ等（２００２）利’’用芙光定量ＰＣ民对引起大盘诱病的病原菌■ＰＡａＡｏ／ｗｏｒａｊｏａｃＡｙｒＡｉｚｚ和ｍｅ巧ｏｎｉｚａｅ进行＇－地了分离鉴定。Ｚｈａｎｇ等（１９９８）利用ＰＣＲＲＦＬＰ法区分了Ｄｚａｊｏ础ｅ和的〇？２〇７。／／－巧现华等（２０ｅｓｔｅｄＰＣ民检测技术，对１１）建立了番茄种子的Ｎ种传番茄细菌性溃窃病病菌进行了检测。１Ａ２种子带苗处理技术硏巧进展１．４．２．１物理处理方法种子带菌的物理处理方法包括采用风选、水选、筛选等的选种方法Ｗ及温汤浸种、干热处理等方法。刑东光（２００１）用盐水漂种将黄瓜种子上的黄瓜菌核病的菌核去除。－陈呈君等（２０１３）采用温汤浸种的方法对如似７（３７拍７？？＾＾：＾＾１１６＆；７／所致的田七种腐病的‘３５？４０Ｃ的温水对田七种子￣１５２０，田走种腐控制效果进行研究，得出Ｗ浸种分钟对病有较好的控制效果。宋顺华等（２００８）通过将种子干热消毒的办法杀死种子内外的病原菌。１．４．２．２化学处理方法种子带菌的化学处理方法包括拌种法、浸种法和闷种法。张成霞（２００４）用福美双、甲基硫菌灵等药剂对草坪草种进行拌种，使得草坪草的出苗率有所提高。吴国平９ 广西大単项古単化论文广西田真苗化病者巧病化、发生规巧及化冷巧巧２００９）４０％３００等（用的福尔马林倍稀释液对葫芦种子进行浸种，有效降低了葫芦种传病害的发生且对种子活力无影响。１．５本研究的目的、意义和技术路线１．５．１本研巧的目的和意义田走是我国特有的药用植物，其高药用价值和供不应求的市场用量激发了许多农户的种植热情，但田尤在生产上所面临的可种植区域狭小、连作障碍、病虫害种类多等问题阻碍了田七产业的发展，。纵观目前的研究报道国外对田七的研巧主要集中在田屯总皂昔等有效药用成分的相关研巧，而国内关于田七病害方面的研究也相对较少一，且多集中在已知的些田七病害病原菌的生物学特性、发病情况及药剂防治的室内防治效果测定等方面，有关田七种子带菌情况的研究还无相关报道。广西田韦更因一２０＂为度到了基本无人种韦的地步而更加缺乏相关研巧１３田＾＾回。年百色市实施＂家工程，力求恢复广西田屯产业，百色地区又掀起了种韦热潮，，值此契机作者跟＂＂踪田七回家工程，开展田４：病害调查及主要病害的防治研巧。广西田七的种植面积和产量在上个世纪７０年代时仍大于云南，靖西所产的田尤更是誉满海内；但到８０年代后期，云南田屯产业迅猛发展，云南文山州成为了著名＂的走之乡。到２００１年，云南田走产量己占全国总量的９０％＾＾上（刘玉萍等，２００２）。与此同时，由于价格和市场的原因，广西田＾：种植面积逐年下降，最低潮的一２００７一年，农户种植的０．６亩田走：仅剩靖西县南坡乡，广西度到了基本无人种Ｈ；的地步。正是看到了田走产业的发展前景Ｗ及现实迫切的用药需求，广西首色再次将田一七产业作为２００５￣大重点项目来发展。自治区人民政府制定并出台了《２０１０年广西中草药产业发展规划》、《广西壮族自治区关于发展中草药产业实施方案》等规范性文？件，而田毛作为广西百色市的特色中药材被纳入了《２００５２０１０年广西中草药产业发展的一展规划》所鼓励发８３种中草药植物之（徐良等，２００７）。据初步调查，自２０１３年百色市启动田屯回家工程Ｗ来，大量的田尤种子和子条（宿根幼苗）从云南购进，导致百色市田毛的病虫害种类和结构与传统的田韦病虫害，田屯生产和病虫害防治遇到了许多新问题有了很大差别。广西的田尤种植地不同于云南，很多地块还未曾种植过田七，但也有不同程度的病害发生；广西在未从云南引＂＂进种子时，，工程实施区内田七并没有圆斑病发生在田尤回家，从云南大量引进一种子之后，云南曾报道过的圆斑病在广西开始发生，并且目前己成为广西田韦上大１０ －广西大単硕古単位论义广西田女真苗性病存巧病原、乂生规带及防：色巧究主要病害一。这些新问题除了环境条件与Ｗ前相比有了定的变化外，不能排除种带病原菌的可能。百色各县目前正积极扩展田屯的种植面积，除到云南采种外，还有从靖西等地采种种植，因此明确广西田七种子带菌情况十分重要。本研究通过对广西田七真菌性病害进行调查，摸清广西田尤真菌性病害的种类、，，通过错层荫棚分布、为害现状检测田４：种子带菌的密度和方式、避雨栽培和哇面滴灌相结合等技术，，探讨在化海拔高温高湿条件下开展田屯病害防治的方法为制定一合理有效的田走真菌性病害防治措施奠定了定基础，对田走病害的有效防治和今后广西田屯产业的健康发展具有积极意义。１．２．５本研巧的总体技术路线．＇田走真菌性病害调查Ｊ＇＇ＳｔｓｓｉＳｉ１［田４：主要真菌性病害种类调查发生规律调查＼Ｖ／！Ｊ￣＇＇田韦圆斑病的田间病害１ｆ错层荫棚、避雨栽培和畦面滴灌消长规律调查相结合对田走病害的防控效果＼／ＶＪ田屯病害病原菌的分离、鉴定ＬＪ？＇形态学１｛分子生物学鉴定鉴定＼／＼Ｊ丄．广田走炭痘病菌的多基因分析ＶＪ■■．（、田４：种子带菌田韦真菌性病害检测药剂防治试验ＶＪ＼Ｊ１１ 广西大単硕古学位论文广苗田－ｅ其苗化巧宙的巧原发生规巧及防巧研免、２材料与方法２．１材料２丄１病害样本的采集病害样本：采集自广西百色市乐业、靖西、德保、田林、西林、田东、隆林、凌云等８个县的田屯种植区调查点。病原菌：从上述８个县采集到的新鲜病害样本病组织分离得到。２．１．２致病性测定供试田屯度株供试的田毛植株采自广西百色市靖西县武平乡课题试验基地。２－．１．３田ｂ炭痘病菌多基因分析供试苗株２－１供试的田尤炭疫病菌株见表。－表２１供试田走炭痘病菌株．Ｔ－ａｂｌｅ２１Ｉｓｏｌａｔｅｓｏｆ＿Ｐ幻内口ＪＣ内０化各Ｚ打此打各ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅｆｏｒｍｕｌｔｉｅｎｅｈｌｏｅｎａｎａｌｓｉｓｇｐｙｇｙｙ菌株采集地点菌株采集地点ＩｓｏｌａｔｅｓＯｒｉｇｉｎＩｓｏｌａｔｅｓＯｒｉｇｉｎＬＢＨ－－１百色市德保县足荣镇ＹＢ２３１百色市靖西县武平乡ＬＢＨ－－１１百色市德保县足荣镇ＹＢ２３２百色市靖西县武平乡ＹＢ－３６百色市德保县足荣镇ＪＸ－６百色市靖西县武平乡ＺＢ－－１１百色市凌云县下甲乡峰洋村ＢＮ１２百色市西林县那劳镇ＢＷ－２９－百色市靖西县武平乡ＱＬＹＺＢ１５百色市乐业县花坪镇ＢＲ－４０百色市靖西县武平乡ＪＣ－４百色市右江区－Ｈ－１ＪＣ３２１百色市靖西县武平乡百色市右江区Ｈ－－１５百色市靖西县武平乡ＪＣ３１百色市右江区Ｈ－２７百色市靖西县武平乡２丄４种于带苗检测供试田走种子供试田屯种子共４个样品，样品１为从云南文山所购得的种子，样品２为广西百一一色市靖西县发生炭垣病的田屯园所采得的种子，样品３为广西百色市靖西县发生圆斑病的田韦园所采得的种子４一，样品为广西百色市靖西县种植管理优良的田４：园１２ 广西大単硕古単位论义广西田真苗性病巧的病化、发生规带及巧巧研免采得的种子。２．１．５所使用的主要仪器设备、用具及试剂仪器设备：ＯＬＹＭＰＵＳＣＸ２１（日：生物光学显微镜本东京奥林己斯公司）；－ＬＳ－ＳＹＸＱＩＩ型全自动立式电热压力蒸汽灭菌器（上海博迅实业有限公司医疗设备厂－９２４０Ａ）；ＤＨＺＴ型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司和太仓精宏－ＲＨ－４００仪器设备有限公司）；ＬＧ型光照培养箱（韶关市泰宏医疗器械有限公司）；ＥＴＣ８－１１型ＰＣＲ）ＤＹＣＺ２４Ａ型电泳槽（北京仪（苏州东胜兴业科学仪器有限公司；一－仪器厂）ｅｌＤｏｃｌＯＯＯ，ＢＩＯＲＡＤ）六；凝胶成像系统（Ｇ等。、用具：剪刀、綴子解剖刀、接种针、接种环、载玻片、盖玻片、烧、双面刀片皿、、杯、量筒、试管、锥形瓶、培养打孔器、血球计数板、各种规格大小的离屯管、ＰＣ民管、移液枪。？试剂：无水己醇ｅｎｅＲｕｅｒ此ＰｌｕｓＤＮＡＬａｄｄｅｒ、Ｇｌ！供试培养基：马铃薑葡萄糖琼脂培养基（Ｐｏｔａｔｏｄｅｘｔｒｏｓｅａｇａｒ，ＰＤＡ），其配方为：马铃墓２００ｇ，葡萄糖１５ｇ，琼脂１４ｇ，水ｌＯＯＯｍＬ。不加琼脂的即为ＰＤ培养液。配制好后用高压蒸汽灭菌法灭菌备用。水琼脂培养基（Ｗａｔｅｒａｇａｒ，ＷＡ）：琼脂１５ｇ，水ｌＯＯＯｍＬ。配制好后用高压蒸汽灭菌法灭菌备用。－２供试农药种类及其相关信息见下表２：表２－２供试农药种类及其相关信息－Ｔａｂｌｅ２２Ｔｈｅｔｅｓ１ｔ；ｅｄｅｓｔｉｃｉｄｅｓａ打ｄｒｅｌａｅｄｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐ药剂名称生产厂家剂型ＦｕｎｉｇｉｃｉｄｅｓＭａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓＦｏｒｍｕｌａｔｏｎ代森铺锋陶氏益农农业科技８０％可湿性粉剂Ｍａｎｃｏｚｅｂ（中国）有限公司８０％ｗｅｔａｂｌｅｐｏｗｄｅｒｓ，ＷＰ甲基硫菌灵７０％可湿性粉剂日本曹达株式会社Ｔ－７０％ｗｅｒｓＰｈｉｏｐｈａｎａｔｅｍｅ化ｙｌｔｔａｂｌｅｏｗｄｅ，Ｗｐ丙环嗤２５％乳油瑞±先正达作物保护有限公司〇Ｐｒｏｐｉｃｏｎａｚｏｌｅ２５／〇ｅｍｕｌｓｉ巧ａｂｌｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ，ＥＣ１３ 广西大単项古単位论义广西田－ｆｃ真苗性病巧的巧康＆防ｉ色巧免、发棟－２续上表２：药剂名称生产厂家剂型ＦｕｎｃｉｄｅｓＭａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓＦｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｇｉ多菌灵５０％可湿性粉剂上海悦联化工有限公司Ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ５０％ｗｅｔｔａｂｌｅｐｏｗｄｅｒｓ，ＷＰ福美双５０％可湿性巧剂河北冠龙农化有限公司Ｔｈｉｒａｍ５０％ｗｅｔｔａｂｌｅｏｗｄｅｒｓ，ＷＰｐ恶霉灵９９％原粉山东省烟台蠢涧精细化工有限公司Ｈｙｍｅｘａｚｏｌ９９％ｒａｗｐｏｗｄｅｒｓ＞ＲＰ咪鲜胺４５％水乳剂福建浩伦生物工程技术有限公司Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ４５％ｅｍｕｌｓｏｎｉｎｗａｔｅｒ，ｉＥＷ多抗霉素１．５％可湿性粉剂山东乳山韩威生物科技有限公司＿Ｐｏｌｏｘｎ１．５％ｗｅｔ化ｌｅｏｗｄｅｒｓＷＰｙｉ，ｐ广西大学农学院药用植物课题小沮研究制备Ａ１６（山豆根上分离出的内生细菌制成的生物菌剂）ＤＮＡ提取试剂盒：ＮｕＣｌｅａｎＰｌａｎｔＧｅｎＤＮＡ拉ｔ新型植物基因组ＤＮＡ提取试剂盒（康为世纪生物科技有限公司）。病原菌ＰＣＲ扩增反应体系所需试剂：２ｘＥｓＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ（康为世纪生物科技有ＲＮ－限公司）ａｓｅＦｒｅｅＷａｔｅｒ（、康为世纪生物科技有限公司）、引物（所需引物购自上海生工生物工程有限公司）。用于单基因、多基因系统学分析的目的基因分别为核糖－虹ｔ－－ｅｍａｌＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳａｃｅｒＩＴＳ）、３ｔｕｂｕｌｉｎ２体转录间隔区序列（ｐ，微管蛋白基因（Ｐ｜ｅｎｅ－ＴＵＢ２－－－ｇ）、３磯酸甘油磨脱氨酶基因（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅｓ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙ血ｏｇｅｎａｓｅ－－ｇｅｎｅＧＡＰＤＨ）、几了质合成酶Ａ基因（ｃｈｉｔｉｎｓｙｎｔｈａｓｅＡｇｅｎｅＣＨＳｉ）、肌动蛋白基－ＡＣＴ）因（Ａｃｔｉｎｇｅｎｅ，用于病原菌分子生物学鉴定的基因为核糖体转录间隔区序列（ＩｎｔｅｒｎａｌＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳｐａｃｅｒ，ＩＴＳ）、转录延伸因子（ＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎＥｌｏｎｇａｔｉｏｎＦａｃｔｏｒ１ａ，ＴＥＦ－ＣＲ－ｌａ）。所用的相应Ｐ扩增引物如下表２３：１４ 广西大単硕古单位论文广西田古义苗性病巧的病康、发生规巧及防爸研巧表２－３选择的目标基因及其相应引物Ｔ－ａｂｌｅ２３ＰｒｉｍｅｒｓｕｓｅｄｆｏｒＰＣ民ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ基因引物引物序列ＧｅｎｅＰｒｉｍ巧ＰｒｉｍｅｒＳｅｑｕｅｎｃｅｓ’’－－ＩＴＳ１５ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ３打Ｓ’’－－ＩＴＳ４５ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ３’＞Ｔ－－１５ＡＡＣＡＴＧＣＧＴＧＡＧＡＴＴＧＴＡＡＧＴ３ＴＵＢ２’’－ｔ２ｂ５－ｐＡＣＣＣＴＣＡＧＴＧＴＡＧＴＧＡＣＣＣＴＴＧＧＣ３’’ＧＤＦ－－ｌ５ＧＣＣＧＴＣＡＡＣＧＡＣＣＣＣＴＴＣＡＴＴＧＡ３ＧＡＰＤＨ’’－－ＧＤ民１５ＧＧＧＴＧＧＡＧＴＣＧＴＡＣＴＴＧＡＧＣＡＴＧＴ３’，ＣＨＳ－７９Ｆ５－－ＴＧＧＧＧＣＡＡＧＧＡＴＧＣＴＴＧＧＡＡＧＡＡＧ３ＣＨＳ－１’＞ＣＨＳ－３５４民５－ＴＧＧＡＡＧＡＡＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＧＴＴＧ－３＞’－－５－ＡＣＴ５１２ＦＡＴＧＴＧＣＡＡＧＧＣＣＧＧＴＴＴＣＧＣ３ＡＣＴ’’－７－－ＡＣＴ巧民５ＴＡＣＧＡＧＴＣＣＴＴＣＴＧＧＣＣＣＡＴ３’’５－－ＥＦＩＴＡＴＧＧＧＴＡＡＧＧＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣ３ＴＥＦ－ｌａ’，ＥＦ２Ｔ５－ＧＧＡＡＧＴＡＣＣＡＧＴＧＡＴＣＡＴＧＴＴ－３ＸＴＢＥ：０５．０％．０琼脂糖凝胶电泳所需的试剂有．电泳缓冲液、１琼脂糖凝胶。１％．ＸＴＢＥ电琼脂糖凝胶的配制方法如下：量取４０ｍＬ０５泳缓冲液于锥形瓶中，称量化４ｇ，琼脂糖，放入锥形瓶，混匀将锥形瓶放入微波炉中加热至溶液变为澄清透明的液体，ｅ－待液体稍冷却后加入ｌ＾ｌＬＤＮＡ染料Ｇｌｒｅｄ，摇匀后倒入胶槽中，待其冷却凝固后即可使用。－４参与系统分析的鎌刀菌菌株表２（基于ＩＴＳ序列）Ｔ－ａｂｌｅ２４Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｔｒａｉｎｓｉｎｈｌｏｇｅｎｙａｎａｌｓｉｓ（ｂａｓｅｄｏｎＩＴＳｓｅｕｅｎｃｅ）ｙｐｙｑ种类菌株序列号提交者ＳｅｃｉｅｓＳｔｒａｉｎＧｅｎＢａｎｋＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳｕｂｍｉｔｔｅｒｐＦｃ１ＤＱ４５３；６９９ＨａｌａｓａｅｔａｌＦｕｓａｒｉｕｍｃｕｌｍｏｍｍ２０９０ＫＣ５７７１９１Ｇｕｐｔａｅｔａｌ１５ 广酉大単硕古聲位论义广西田－ｅ真苗性病巧的病原及巧谁巧突、发生规课－４续上表２：种类菌株序列号提交者ＳｐｅｃｉｅｓＳｔｒａｉｎＧｅｎＢａｎｋＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳｕｂｍｉｔｔｅｒＤＡＯＭ２２５７３７ＪＮ９４２８３４ＳｅｉｆｅｒｔＦｕｓａｒｉｕｍｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｉｏｉｄｅｓＳＦ２０－ＣＦ１２０８０３５７ＫＦ３１３１００ＭｉｎｅｔａｉＸＳＤ－８０ＥＵ３２６２０２扣泣打ａ／．£知ＦｕｓａｒｉｕｍｅｕｉｓｅｔｉｑＦｅｑｕＳＩＮｌＫＣ５７７１９４ＧｕｐｔａａｎｄＮａｇｌｏｔＡＴＴ１８３ＨＱ６０７８８０民ｏｄｒｉｕｅｓｅ／幻／．ｇＦｕｓａｒｉｕｍｏｈｉ幻。ｄｉｃｕｍｐｆｙｐＥ６７３０ｄＨＭ９９９９０４ＢａｒａｂａｎＣＢＳ４０９．９７ＫＣ４６４６２９ＨａｍｅｌｉｎｅｔａＬＦｕｓａｒｉｕｍｕｔｔｉｏｎｎｅｇｆ１０７６４ＧＵ２０５４２７ＪｉｍｅｎｅｚｅｔａｌＧＸＦ－５ＥＵ２８５５５３ＬｕｅｔａｌｉＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ０５３１ＥＦ４６４１６６Ｚｈａｎｇｅｆａ／．９３１３８ＡＦ０６９３１０ＰａａｖａｎｅＢｅｔａｌ化－３４ＪＸ８６７２３２ＷｕＦｕｓａｒｉｕｍｂｒａｃｈｙｇ化ｈｏｓｕｍＷＡＣ：７８２１ＪＦ７７６６５３ＴａｎｅｔａｌＣＢＳ４８２．９４Ｘ９４１７８ＷａａｌｗｉｋｅｔａｌｊＦｕｓａｒｉｕｍｂｅｏｍｉｆｏｒｍｅＮＲＲＬ’２５１７４ＦＢＵ６１６７４ＯＤｎｎｎｅｌｌｅ？幻／．ＣＡＴＡＳＭｍｄ９ＧＵ０７４０１０ＬｖｅｔａｌＦＰ３ＨＭ７６９９５３Ｌｕｅｔａｌ．ＦｕｓａｒｉｕｍｒｏｌｉｅｒａｔｕｍｐｆＣＢＳ１８９．３８ＫＭ２３１８１６ＬｏｍｂａｒｄｅｔａｌＣＢＳ２６３．５４ＫＭ２３１８１５Ｌｏｍｂａｒｄｅｆ幻／．ＸＳＤ－１３３Ｅ３２６２０７ＪＵｉａｎｇｅｔａｌＦｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉＦＲＣ＃ｓ５６４ＤＱ０９４７０６Ｚｈａｎｇｅｔａｌ．巧ＮＧＲ２３１ＨＱ６５１１６２巧ｕｇｕｎａｅ／幻ＣＢＳ１３２８９４ＫＦ２５５４３６Ｖｍｅｔａｌ．ＦｕｓａｒｉｕｍｉｎｃａｍａｔｕｍＣＢＳ１３２１９０ＫＦ２５５４２３Ｖａｎｅｔａｌ．ＦｉＨｓ４ＫＭ５９１９２Ｏｔ－ｌ１ｒｅｇａＡｃｏｓｔａｅｔａ．Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａ切ａｎｕｍＴ－２２巨Ｆ４６４１６９Ｚｈａｎｇｅ？口／■１６ 广西宙－帯性病巧的病原广西大単硕古学ｔｆｌ：论文＜：７义乂生规棟及防色巧免、２－５－表参与系统分析的嫌刀菌菌株（基于ＴＥＦｌａ序列）－２５ｗｗｔｉｈ－Ｔａｂｌｅ风Ｓ幻ｎｓｒａｉｎｓｎｌｏｅｎａｎａｌｓｉｓ（ｂａｓｅｄｏ打ＴＥＦｌａｓｅｕｅｎｃｅ）ｐｙｇｙｙｑ种类菌株序列号提交者ＳｅｃｉｅｓＳｔｒａｉｎＧｅｎＢａｎｋＡｃｃｅｓｓｉｏ打ＮｕｍｂｅｒＳｕｂｍｉｔｔｅｒｐＮＲＲＬ＇ｓｏｒｕｍｆ．ｓ．ｓｅｓａｍｉ２６４４７巧％５２９９ＯＤｌｔｌ．ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｐｐｏｎｎｅｌｅａＬＡＣ９７６０／１ＫＦ０３０５９１ＳｉｌｖａｅｔａｌＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｍｍ民ｅｉｓ３ＫＦ３０１６％Ｏｒｔｕｅ？加２－９１ＧＱ８４８５％Ａｍａｔｕｌｌｉｅｒ加ＦｕｓａｒｉｕｍｒｏｌｉｅｒａｔｕｍｐｆＥ３２６ｌｌＧＱＷ巧ＢｉｅｔａＮＲＲＬ＾２５１００ＪＦ７４０７２７ＯＤｏｎｎｅｌｌｅｔａｌＦｕｓａｒｉｕｍｓｏｉａｎｉ’ＮＲＲＬ５２７０４ＪＦ７４０７％ＯＤｏｎｎｅｌｌ扣幻／．Ｃ３ＳＨ．１０３ＪＦ４９６５７４ＭａｒｉｎｅｔａｌＦｕｓａｒｉｕｍｅｑｕｉｓｅｔｉＩＢＳＡ．０４２ＪＦ４％％８ＭａｒｉｎｅｔａｌＬＭＳＡ１．０９．１２８ＪＦ２７８巧０ＶａｓｓｅｕｒＦｕｓ幻ｒｉｕｍｃｕｌｍｏｍｍｈｋｅ１４２ＦＪ９３９６６９Ｎｈｓｃｅ／ａ／．ＦｕｓａｒｉｕｍｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｉｏｉｄｅｓＬＭＳＡ１．０９．１１５ＪＦ２７８５８１Ｖａｓｓｅｕｒ’ＮＲＲＬ２５０９３ＪＦ７４０７２２ＯＤｏｎｎｅｌｅｆ幻ｌＦｕｓａｒｉｕｍｂｍｃｈｖｉｂｂｏｓｕｍ一ｇ’ＮＲＲＬ３４０３３ＧＱ５０５４１８ＯＤｏｎｎｅｌｌ別口／．ＣＢＳ１３２１９４ＫＦ２５５４７０ＶａｎｅｔａＬｆｕｓａｉｉｕｍｉｎｃａｍａｔｕｍＣＢＳ１３２３１７ＫＦ２５５４７６Ｖａｎｅｔａｌ＊ＷａｆａＤＥＢ巧ＫＦ９９３扣；９７５口ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｍｉｍＰＰ民Ｃ民Ｗ２０ＦＪ７１６６２１Ｄｒｕｚｈｉｎｉｎａｅｔａｌ１７ 广西大単项古学陆论义广苗田女其帯性巧巧的病原、发生规难及防巧巧究表２－６参与系统分析的炭痘菌属模式菌株．－Ｔａｂｌｅ２６Ｃｏ／／ｅ於矿ｚｃ／ｍｗｔｙｐｅｓｔｒａｉ打Ｓｉ打ｈｌｏｅ打ａｎａｌｓｉｓｐｙｇｙｙ序列号种类培养寄主ＧｅｎＢａｎｋＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳｅｃｐｉｅｓＣｕｌｔｕｒｅＨｏｓｔ打ＳＧＡＰＤＨＡＣＴＣＨＳ－ＩＴＵＢ２ＣｏｌｌｅｋＵｒｉｃｈｕｍＩＣＭＰＣｏ如幻ＪＸ００１６５Ｊ１ＸＯ１００３３ＦＪ９０７４％ＪＸ００９８６６ＪＸＯ１０４０５ｆｎｉｃｔｉｃｏｌａ１８５８１ａｒａｂｉｃａＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍＩＣＭＰＭａｌｕｓＪＸＯ１０２５１ＪＸ０１００２８ＪＸ００９５７２ＪＸ００９８８２ＪＸ０１０４１１ａｌｉｅｎｕｍ１２０７１ｄｏｍｅｓｔｉｃａＣｏｌｌｅＵ）ｔｒｉｃｈｕｍＣＢＳＰｈａｓｅｏｌｕｓＧＵ２２７８６２ＧＵ２２８２５４ＧＵ２２巧６０ＧＵ２２８３５２ＧＵ２２８１５６ｔｒｕｎｃａｔｕｍ１５１．３５ｌｉｍａｔｕｓＣｏｌｌｅＵＨｒｉｃｈｕｍＩＭＩＣｉｔｒｕｓＪＸ０１０１５２ＪＸＯｌＯＯ％ＪＸ００９５３１ＪＸ００Ｓ＞８１８ＪＸ０１０４４５ｏｅｏｓｏｒｉｏｉｄｅｓ３５６８７８ｓｉｎｅｎｓｉｓ客ｌｐＣＢＳ－Ｕ注：心ＣＢＳＫＭＷＦｕｎＣｅｎｔｔ：荷兰畫家真菌生物多样性中（ｌＢｉｏｄｉｖｅｒｓｔｒｅＵｒｅｃｈＴｈｅ，ｇａｙ，，Ｎｅｔｈｅｒｌａ打ｄｓ）；ＣＭＰ：ｎｔｅｔｉｏｎｌＣｌｉｉｆｒｏｍｌＩ新西呈奧克兰上地保批研究所（ＩｒｎａａｏｅｃｔｉｏｎｏｆＭｉｃｒｏｏｒａｎｓｍｓＰａｎｔｇ，ＬａｎｄｃａｒｅＲｅｓｅａｒｃｈＡｕｃｋｌａｎｄＮｅｗＺｅａｌａｎｄ），，；Ｉ：ＣｕｔｕｒｅｃｏｅｃｔｆＣＡＢｅＵＫＣｅｎｔｒｅＩＭ英国国际应用生物科学中（ｌｌｌｉｏｎｏＩＥｕｒｏｐ，Ｅｇｈａｍ，ＵＫ）；ＩＴＳ：内转录间隔区（Ｉｎｔｅｒｎａｌｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄｓｐａｃｅｒｓ）；ＡＣＴ：肌动蛋白（Ａｃｔｉｎ）；ＧＡＰＤＨ－《－－：３莽酸甘油酪脱氨酶ｌｃｅｒａｌｄｅｈｄｅｓ３ｈｏｓａｔｅｄｅｈｒｏｅｎａｓｅ（ｇｙｙｐｐｈｙｄｇ）；ＣＨＳ－ｔｓｅ１：几了质合成酶（ｃｈｉｔｉｎｓｙｎｈａ）；ＴＵＢ２－－：微ｔｕｂｍ２管蛋白（ｐ）。１８ 广西大単硕古学化论文广西田＂ｔ：其苗性病宙的病原、发生规棟及防５各巧究表２－７参与系统分析的炭痘菌属菌株．Ｔａｂ－ｌｅ２７Ｃｂ／ｆｃ化奶Ｃ片ＷＷｓｔｒａｉ打Ｓｉ打ｈｌｏｅｎａｎａｌｓｉｓｐｙｇｙｙ基因种类菌株提交者ＧｅｎＢａｎｋＡｃｃｅｓｓｉｏｎＧｅｎｅＳｅｃｉｅｓＳｔｒａｉｎＳｕｂｍｉｔｔｅｒｐＮｕｍｂｅｒＣＢＳ１２５３２７ＧＵ２２７８８７ＤａｍｍｅａｌｔＣｏＵｅｔｏ化ｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＣ２Ｐ２３ＥＪＱ９３６２４９ＬｅｉｔｅｅｔａｌＩＴＳｏＵｅｔｏｔｒｈｕｍｒｕｃｔｉｃｏｌａＳＩＫＴ２２４７７９Ｄｏｎｅｆ幻／．ＣｉｃｇｆＧｏｌｌｅｔｏＵｉｃｈｕｍＬＣ０５５５ＪＮ９４３０９０Ｓｃｈｏｃｈｅｆ幻／．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓＣｏｌｌ別ｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＣＴＭｌＪＸ９７５３５６ＭａｈｍｏｄｉｅＺａ／．ＣＢＳ１１４０５４ＫＣ５６６９２８Ｂｒａｇａｎｃａｅｔａｌ．ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｒｕｃｔｉｃｏｌａｆＡＣＴＣ？１３１５．３ＪＸ００Ｓ５０１Ｗｅｉｒｅｔａｌ．ＣｏＵｅｔｏ化ｉｃｈｕｍＬＦ６０４ＫＪＷ４４５０ＬｉｕｅｔａｌｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓＣＴＭｌＫＣ１０９４５９Ｍａｈｍｏ出ｅ？幻／．Ｃｏｌｌ巧ｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＣＴＭｌ８ＫＣ１０９４７６Ｍａｈｎｕｘｉｉｅｆ〇／．ＴＵＢ２ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｒｕｃｔｉｃｏｌａＣ％Ｘ７Ｇ８４９４；３５Ｙａｎｅｆａ／．ｆＱｇＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍＣ目％５３．９７ＧＡ８４９４３４ＹａｎｇｅｔａｌｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＯＣＣ９８ＫＰ７４３２巧Ｃｈｏｗｄａａ封ａ／．ｐｐＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍＣＨＳ－１ＣＢＳｌ１９２０４ＪＸ００９７９０Ｗｅｉｒｅｔａｌｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓｌ－ＤＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｒｕｃｔｉｃｏａＰ民民Ｆ１８ＣＯＬＫＴ３７２３８２ＳｅｒｒａｔｏｉａｚｅｔａｌｆＣＴＭｌＫＣ１０９５７９Ｍａｈｍｏｄｉｅｆ幻／．ＣａＵｅｔｏ＾ｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＸＹ－０１ＨＭ巧５３１９ＣｈｅｎｅｔａｌＧＡＰＤＨＣｏｌｌｅ化ｔＨｃＪｍｍｒｕｃｔｉｃｏｌａＯＣＣ９７ＫＰ７４３３６９ＣｈｏｗｄａａｅｔａｌｆｐｐＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍＪＸ－Ｆｌ２ｌＨＭ５７５ＷＣｈｅｎ封口／．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ１９ －广西大学硕古学化论文广西田ｔｒ义苗隆病者的病原发生规巧及巧绝巧免、２．１．６结果分析所用软件ｉｆｔＥｘｌ２００３．用于数据统计分析的软件有；Ｍｃｒｏｓｏｃｅ和ＤＰＳ八０５版数据处理软件。用于单基因及多基因序列分析的软件有；ＣｈｉｓｔａｌＸ、ＢｉｏＥｄｉｔＶ７．０．５（ＢｉｏＥｄｉｔＳｅｑｕｅｎｃｅＡｌｉｇｎｍｅｎｔＥｄｉｔｏｒｖｅｒｓｉｏｎ７．０．５）ＭＥＧＡ４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｅｎｅｔｉｃｓｇａｎａｌｙｓｉｓｖｅｒｓｉｏｎ４）〇２２．广西田走真菌性病害调查方法２．２．１广西田屯真苗性病害的种类调査２．２丄１调查范围选择广西百色市乐业县、靖西县、德保县、田林县、西林县、田东县、隆林县、凌云县等８个田尤种植区作为普查点。２．２．１．２调查内容广西田七真菌性病害的种类、分布情况、危害程度、病害发生与消长规律等。２．２．１．３调查方法２０１４年至２０１５年，选择天气回暖，高湿高湿的田七病害发病高峰期的７至９月，在当地技术员的带领下，深入到百色市的旧七种植区，根据田七种植面积的大小和生态条件，选择具有代表性的乡镇的２至３个走园作为调查点进行田韦病害发生情况的调查。在各个调查点采集具有典型症状的田屯植株或田七叶片，做好症状记录及拍照工作后，，带回实验室进行后续工作放入文件袋或封口袋中。调查采用平行线取样法，Ｗ整株植株为单位进行病害调查，每点调查５０株田尤植株，每园调查点数不少于６个点，，统计各园发病株数所得调查结果按照Ｗ下公式２．１和公式２．２进行大田发病率和病情指数的计算。调查时观察并记录各调查点的海拔、地势、遮荫棚类型及其透光率、田七４：龄等生态因子的情况。〇／〇）＝＿芝璋璋驾．．Ｘ胃发病率（１００周查总疆（２．１）ｙ（各级病株数Ｘ各级代表值）＾病情指数＝ｘｌＯＯ曰—４么ｎ化古比化ｆＷ。调查点株数Ｘ取商级代表值＇最后，将所得调查结果汇总并采用ＤＰＳ八．０５软件对所得数据进行统计分析，采用新复极差法检验。２０ 广笛大學硕女単位论文广巧田女真巧性病巧的巧原、发生规棟如方冷巧免２．２丄４病害分级标准（１）田＾：；叶斑类病害分级标准黑斑病、圆斑病、炭痘病等的分级标准根据实际病害调查前期准备工作所得经验总结而出；，分级标准如下整株植株为单位进行分级调查）０级：全株无病；１级：幼苗期植株每株叶部病斑数在５个下，二年生及二年（ｉＡ上的田毛植株每株叶部病斑１０个Ｗ下且小叶不脱落，茎及花苔上无病斑；３级：幼苗期植株每株叶部病斑数在６个Ｗ上，二年生及二年Ｗ上的田七植株每５，茎；株叶部病斑１０个Ｗ上，二年生植株每株小叶脱落不超过张及花苔上无病斑５级：幼苗期植株每株小叶脱落不超过２张，二年生植株每株小叶脱落不超过６至１０张；，茎及花苔上出现病斑７级：幼苗期植株毎株小叶脱落不超过３至４张，二年生植株每株小叶脱落不超过１１张，，１至２个叶柄折断茎及花苔上出现病斑；９，二１５，３至４级：幼苗期植株小叶全部脱落年生植株每株小叶脱落不超过张，。个叶柄折断，茎及花苔上病斑深陷接近于折断（２）田走白粉病分级标准对于田七白粉病的分级标准，参照陈泰祥等（２０１３）对黄萬白粉病的分级标准进行制定）；。分级标准如下整株植株为单位进行分级调查０级：全株无病；￣１级：病斑所占面积为整张叶片的１％２５％；％％￣５０％３级：病斑所占面积为整张叶片的；５？５级：病斑所占面积为整张叶片的１％７５％；７６？７级：病斑所占面积为整张叶片的％１００％。此外，田走根腐病在田间的发病主要表现为急性青枯型和黄腐型（缪作清等，２００６），因此，在田间进行调查时，首先寻找田间表现出急性青枯或叶片黄化披垂的，，，，植株，然后挖出其根部观察是否有腐烂现象若根部腐烂只剩表皮髓部腐烂或一。，表皮开始腐烂的，可初步判定为根腐病在具体调查记录中般只记录根腐病的田间发病率。２．２．２广西田Ａ真茵性病害的消长规律调査一，其原因为选择百色市乐业县Ｈ：：园作为广西田屯真菌性病害消长规律的观测点２１ 广西大单项古単位论文广巧田－ｔ真巧化病宙的病化发生规带及巧冷研究、乐业县处于亚热带湿润气候区，年降水量在１０００毫米Ｗ上，相对湿度可达８３％，年°均温在１６Ｃ左右，适宜的温度条件加之较高的相对湿度为病害的发生和发展提供了良好的生长条件。在前期的采点过程中了解到，当地田七在种植过程中不需要人工灌概一，仅靠空气中的水汽即可满足田七生长所需水分，其湿度之大可见斑。２２在试验地选约２０ｍ的地块用有机玻璃罩（内径５０Ｘ５０ｃｍ，即化２５ｍ）罩住田走）４５６８幼苗（未出±前，分别于、、、７、月各打开Ｈ个罩（作为各个月试验组的Ｈ一，个月后观察其发病情况并记录病害侵染率次重复），盖回玻璃罩后，每月继续观察。所打开的罩编号经随机抽取产生，另外留Ｈ个罩子全程不打开作为对照处理组１，一留Ｈ个与玻璃罩样面积大小的方框全程打开作为对照处理组２，每月定期观察各个月病害的侵染率。另外每月同时观察并记录全园病害发生情况并采用五点取样法调查病害发病率及病情指数，作为对照处理组３。２．３病原鉴定２．３．１病原茜的分离与纯化方法病原菌的分离，采用常规组织分离法（方中达，１９９８）。选取发病的田屯样品，在其病斑的病健交界处剪取大小约为０．５ｃｍＸ化５ｃｍ的组织块进行表面消毒，消毒的具体方法为：将样品放入７５％的酒精中浸泡约３化后，再放入０１％．的升隶溶液中浸？２ｍｎ泡１ｉ（所用时间依具体样品而定，较薄较嫩的样品浸泡时间短，反之，时间稍长），后放入灭茜水中清洗３至４次。将经过表面消毒的组织块放置于事先准备好的ＰＤＡ平板表面，每皿ＰＤＡ平板上放置５个组织块。将接有组织块的ＰＤＡ平板放入‘如（：左右的恒温培养箱中培养数天，待组织块上长出菌落后，在超净工作台内，用己灭菌的接种针挑取菌丝先端移入新的ＰＤＡ平板上培养直至产抱。产抱后吸取５ｒａＬ灭菌水，加入平皿中，用己灭菌的接种环刮落菌落表面的抱子，配制成在４０Ｘ显微镜０￣下每视野有１１５个抱子的抱子悬浮液后，吸取０．５ｍＬ抱子悬浮液滴于ＷＡ平板上，用涂布涂抹均匀。将解剖刀在酒精灯上烧红灭菌，冷却（每次用刀前均重复此项操作）后，切取宽度约为２ｃｍ的琼脂长条放置在已灭菌的干净载玻片上，再将其切成长度约为２ｍｍ大小的方形小块一，在显微镜高倍镜下查找确实只有个分生抱子的小块，将其移入新的ＰＤＡ平板中进行培养，长出的菌落即为己纯化的单抱菌落切取菌落，的边缘约２ｍｍ左右大小的小块转入己灭菌的试管ＰＤＡ斜面培养基中培养，备用或放入４ｒ冰箱中进行保存。２２ 广西大単硕古単化论义广西田－ｔ其苗性病巧的病原乂生规部及巧论巧巧、２．３．２纯化所得苗株的致病性測定根据科赫氏法则（方中达，１Ｗ８）对纯化所得的菌株进巧致病性测定。对于己经报道过的老病害，采用菌丝块活体接种法进行接种。接种试验设置刺伤接种和无伤接种两种处理，刺伤处理采用己灭菌的针头在叶片部位刺出数个伤日（刺伤面积应小于茜丝块大小）。试验所用叶片均为健康田走叶片。叶片先用７５％酒精进２￣３，行表面消毒，消毒后再用灭菌水冲洗次备用。将待试菌株在ＰＤＡ平板上进斤复壮培养后．５ｃｍ，，用直径为１的打孔器打位于菌落边缘的部分制成菌丝块将其接种到叶片上，Ｗ无菌ＰＤＡ琼脂块作为对照，每种处理接种１０张叶片。接种后的植株用有机玻璃罩罩住并放置于温室中进行保湿培养，每天观察植株并记录其发病情况。对于发病的叶片，对其再次进行病原菌的分离工作，Ｗ确定其致病性。：对于田Ａ根腐病，采用离体接种法进行接种，具体操作步骤如下采用健康无病的二年生田韦，将其根部洗净，经７５％酒精表面消毒后用灭菌水冲洗Ｈ次，试验设根表刺伤和无伤两种处理，对照组进行相同处理备用，每种处理５次重复。将保存的待试菌株接种到ＰＤＡ平板上进行复化培养后，用灭菌水洗脱抱子，６并将所得抱子悬浮液浓度调至１Ｘ１〇个／ｍＬ。将上述已进行处理的无病健康田击根部浸泡入抱子悬浮液中５ｍｉｎ进行接种，将接种过的田屯根放入培养皿中，放入吸满灭菌水的无菌脱脂棉并喷施灭菌水于田屯根上进行保湿，将培养皿经封口膜密封后放入’２５Ｃ恒温培养箱中培养。Ｗ灭菌水为对照，每菌每个处理３次重复，于接种后第二天开始观察并记录接种田走根的发病情况。对发病的田七根再次进行分离工作，所得病原菌菌落于显微镜下观察其分生抱子等的形态特征是否与原接种菌株相同。对于新发生的病害，采用拖子悬浮液活体接种的方法来进行致病性测定。具体操作步骤如下；将待试菌株在ＰＤＡ平板上进行复壮培养后，取适量灭菌水洗脱其分生一抱子，配制成定浓度的袍子悬浮液，悬浮液具体浓度视分生袍子大小而定（分生抱子较大的菌，可配制成每视野约含３０个分生抱子的悬浮液生抱子较小的菌，可；分配制成毎视野约含５０个分生抱子的悬浮液）。接种试验设刺伤接种和无伤接种两种处理，试验所用叶片均为健康田韦叶片。叶片先用７５％酒精进行表面消毒，消毒后再用２￣３灭菌水冲洗次，备用，对照组灭菌水喷雾处理，。试验组Ｗ抱子悬浮液喷雾接种每种处理接种１０张叶片。接种后的植株用有机玻璃罩罩住并放置于接种室中进行保湿培养，，每天观察植株并记录其发病情况。对于发布的叶片对其再次进行病原菌的分离工作，Ｗ确定其致病性。２３ 广西大単硕古単位论义广西田女真苗性病＃的病巧、乂生规带及巧巧研变２．３．３病原苗的形态鉴定田间采集的病害样本组织境检：用缀子撕取病害样本病斑处的少许病组织，置于滴有灭菌水的干净载玻片上并展平，盖上盖玻片，置于光学显微镜下观察病原菌的菌丝、产抱结构、分生抱子器、分生抱子等形态恃征并量其大小，拍照并做好相应记录。分离纯化所获得的菌株的镜检：观察在ＰＤＡ平板上培养好的病原菌的菌落形态、颜色、质地等特征。对供试菌株的生长速率测定采用十字交叉法测定于：ＰＤＡ平板上培养了７天的菌落直径，并计算出菌落的生长速率。对于病原菌的微观形态的观察，直接用摄子挑取少许的菌丝体放入加有灭菌水的干净载玻片上，盖上盖玻片后放置于光学显微镜下观察，在培养有病原菌的ＰＤＡ平板上，４５。或可采用插片法度角斜插入已灭菌的盖玻片，待其上长有菌丝及子实体后取出，放到载玻片上，于光学显微镜下观察病原菌的菌丝形态，、抱子形态、抱子着生方式、产抱结构等特征并量其大小拍照并做好相应记录，。对于难Ｗ产抱的菌株可采用灭菌的康乃馨叶片、巧断菌丝的方法来诱导产抱。灭菌康乃馨叶片的制备方法为：将康乃馨叶片剪成化５ｃｍＸ化５ｃｍ，取适量放入试管中大小的沮织块，向试管中加入自来水，加水量完全没过康乃馨叶片组织块为宜。塞好试管塞后放入高压湿热灭菌锅内灭菌备用。２．３４．病原苗的分子鉴定病原菌总ＤＮＡ的提取采用康为世纪生物科技有限公司的ＮｕＣｌｅａｎＰｌａｎｔＧｅｎＤＮＡ拉ｔ新型植物基因组ＤＮＡ提取试剂盒进行提取，提取步骤如下：（〇将鶴取过酒精的解剖刀在酒精灯火焰上进行燃烧，待其冷却后轻轻刮取ＰＤＡ平板上的病原菌菌丝适量，放入１．５ｍＬ的已灭菌的离也管中，加入液氮充分研磨至粉末状。研磨结束后立即加入４００阵ＢｕｆｅｒＬＰ１和６阵ＲＮａｓｅＡ（１０ｍｇ／ｍＬ），为ｉ使其充分裂解，锅旋振荡Ｉｍｎ并于室湿下放置ｌＯｍｉｎ；（２）吸取１３（ＨｉＬＢｕｆｅｒＬＰ２加入离也管中，混匀后润旋振荡Ｉｍｉｎ；、、３ｍ离屯、（）振荡结束后将离屯管放入商速离也机中Ｗ１２０００ｒｐ５ｍｉｎ，离屯结束００、后吸取上清液４ｉＬ至新的己灭菌离屯管内；＾（４）向离也管中加入６００阵ＬＰ３（使用前己按说明书要求加入无水己醇），充分混匀后将所得溶液吸取至己装有收集管的吸附柱内一（若次无法加完溶液，可分多次、加入），Ｕｌ２０００ｒｐｍ离屯Ｉｍｉｎ，，ｔ将收集管中的废液倒出后把吸附柱放回收集管内；（５）吸取５００阵ＢｕｆｆｅｒＧＷ（使用前已按说明书要求加入无水己醇），再次Ｗ、１２０００ｒｐｍ离屯Ｉｍｉｎ，倒掉收集管中的废液后，把吸附柱放回收集管内；２４ ■■‘－广西大単项古単化论文广西田ｆｃ真苗生病＃的病巧？发生规巧及巧：台研１、（６）重复步驟（５）；ｍ空管离屯、（７）Ｗｌ２０００ｒｐ２ｍｉｎ，倒掉收集管中的废液后，打开吸附柱盖子，于室温下放置ｌＯｍｉｎ使其中的乙醇挥发，Ｗ彻底瞭干；、（８）３０＾将吸附柱转移至新的己灭菌离屯管内，向吸附柱中间部位悬滴加入叫的５ｍｉｎ、，１２０００ｍ离屯Ｉｍ双蒸水，于室温下放置后！＾ｉｐｉｍ所收集到的溶液即为ＤＮＡ‘－２０Ｃ条件下保存备用。溶液，存于ＰＣ民扩增反应：（１）ＰＣ民２ｘＥｓＴａＭａｓｔｅｒＭｉｘ２５ｉＬ，扩增反应的体系配制为：ｑ＿｜Ｆｏｄ－ＴｌＤＮＡ２ＬｒｗａｒＰｒｉｍｅｒ２ｉＬ，ＲｅｖｅｒｓｅＰｒｉｍｅｒ２ｉＬ，ＲＮａｓｅＦｒｅｅＷａｔｅｒ１９ｊ，Ｌ，ｅｍａｔｅａ，｜｜｜ｐ｜反应体系共５０叫（２）ＰＣＲ反应条件：将配制好的扩增反应液装入ＰＣ民管后放进ＰＣ民－仪，按表２８设定的反应参数进行扩増：表２－８各基因ＰＣＲ扩増反应的参数Ｔ２－８ＰａｒａｍｅｔｅａｂｌｅｒｆｏｒｅｎｅｌｏｃｕｓＰＣＲａｍｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｇｐ预变性变性退火延伸最后延伸目的片段．．１－ｎｅａＰｒｅｄｃｎａｅｎａｕｒａｌＥｌｏｎａｔｉｏｎＥｌｏｎａｔｉｏｎｔｕｒａｔｉｎＤｔｔｉｏｎＡｎｇｇｇＴａｒｇｅｔ？＾心温度／〔温度化温度温度尸Ｃ温度化时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓｆｒａｍｅｎｔｇＴｅｍｒａＴｅｍｅｒａＴｅｍｅｒａＴｅｍｅｒａＴｅｍｐｅｒａｐｅｐｐｐＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓ°Ｔｉｍｅ／ｓ°‘°＂－／－－－－ｔｕｒｅＣｔｕｒｅ／Ｃｔｕｒｅ／Ｃｔｕｒｅ／Ｃｔｕｒｅ／Ｃ４２ＩＴＳ９５３００９４３０５８３０７２９０７２０ＴＥＦ－ｌａ９４８５９５％５７５５７２６０７２６００循环次数１３５１Ｃｙｃｌｅｎｕｍｂｅｒ－１ＤＮＡｌ１．０凝胶电泳检测ＰＣＲ扩增产物：将制备好的己加入阵染料Ｇｅｒｅｄ的％琼脂糖凝胶放入电泳槽中，加入电泳液至液体将琼脂糖凝胶完全浸没过胶面。取２叫＾ＰＣ民扩増产物直接点入上样孔中（ＰＣ民反应中所加入的化ＥｓＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ中己经含有染料，反应结束后所得ＰＣＲ扩增产物可直接上样电泳，无需再加上样缓冲液），一ＤＮＡＭａｒｋｅｒ。调整电压至１５０Ｖ３０ｍｉｎ。，在凝胶的侧点上，电泳电泳完毕后将凝胶取出，放入凝胶成像系统中进行检测并拍照。测序及分析：将成像系统中显示的有明亮条带的ＰＣ民扩増产物送至上海生工生２５ 广西大単硕古单位论文广西田女哀苗化病巧的巧原、发生规带及Ｐ方冷研巧物工程有限公司进行测序。测序所得结果登录到ＮＣＢＩ，与ＧｅｎＢａｎｋ中的序列进行Ｂｌａｓｔ比对，查找并下载与测序所得结果同源性最高的序列。从ＧｅｎＢａｎｋ中下载己报道的相关菌株的序列，用ＣｌｕｓｔａｌＸ软件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的序列进行分别进行对准后，用ＭＥＧＡ４软件构建系统树，对病原菌进行分子水平上的鉴定，可结合形态学鉴定的结果最终鉴定出病原菌的种类。。最后２．４广西田七炭痕菌的单基因、多基因系统学分析炭谊菌总ＤＮＡ的提取采用康为世纪生物科技有限公司的ＮｕＣｌｅａｎＰｌａｎｔＧｅｎＤＮＡＫｉｔ新型植物基因组ＤＮＡ提取试剂盒进行提取，提取步骤同上２．３．４所述。ＰＣＲ扩增反应：（ｌ）ＰＣＲ扩增反应的体系配制为：２ｘＥｓＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ２５阵，Ｆｏ－ｒｗａｒｄＰｒｉｍｅｒ２ｉＬ，民ｅｖｅｒｓｅＰｒｉｍｅｒ２ｉＬ，ＲＮａｓｅＦｒｅｅＷａｔｅｒ１９ｘＬ，ＴｅｍｌａｔｅＤＮＡ２ｊＬ，）｜［ｐｉ反应体系共５０ｉレ（２）ＰＣＲ反应条件：将配制好的扩增反应液装入ＰＣＲ管后放进＾ＰＣＲ２－仪，按表９设定的反应参数进行扩増：表２－９各基因ＰＣＲ扩增反应的参数－Ｔａｂｌｅ２９ＰａｒａｍｅｔｅｒｆｏｒｅｎｅｌｏｃｕｓＰＣ民ａｍｌｉ巧ｃａｔｉｏｎｇｐ预变性变性退火延伸最后延伸目的片段Ｐ－ｔｒｔｎＤｅｎａｕｒａｔｎＡｎｎｅａＥｌｏｎｔｎｒｅｄｅｎａｕａｉｇｔｉｏｌｇａｉｏＥｌｏｎｇａｔｉｏｎＴａｒｇｅｔ。温度温度化温度／［温度化温度化时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓ时间／ｓｆｒａｇｍｅｎｔＴｅｍｅ巧Ｔｅｍｐｅ巧ＴｅｍｐｅｒａＴｅｍｐｅｒａＴｅｍｐｅｒａｐＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓＴｉｍｅ／ｓ°°°°＂－ｔｕｒｅＣ－－ｒｅ－ｔｒｅ－／ｔｕｒｅＣｔｕ／Ｃｕ／Ｃｔｕｒｅ／Ｃ／ＩＴＳ９５３００９４３０５８３０７２９０７２４２０ＴＵＢ２９５３００９４３０５９３０７２９０７２４２０ＧＡＰＤＨ％３００９４３０５６３０７２９０７２４２０－ＣＨＳ１９５３００９４３０５６３０７２９０７２４２０ＡＣＴ９５３００９４３０５９３０７２９０７２４２０循环次数１３５１Ｃｙｃｌｅｎｕｍｂｅｒ２６ ＂■Ｉ生规巧及化？广西大単？硕古単位论文广西田ｆｃ义苗曲病者的病原、发：色巧巧凝胶电泳检测ＰＣ民扩增产物步骤同上２．３．４所述。测序及分析；将成像系统中显示的有明亮条带的ＰＣ民扩增产物送至上海生工生物工程有限公司进行测序。测序所得结果登录到ＮＣＢＩ，与ＧｅｎＢａｎｋ中的序列进行Ｂｌａｓｔ比对，查找并下载与测序所得结果同源性最高的序列。从ＧｅｎＢａｎｋ中下载己报道的相关菌株的序列，用Ｃ山ｓｔａｌＸ软件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的ｉｉ，序列分别进行对准后，再用ＢｏＥｄｔ手工校正Ｗ优化排序匹配。经手工比对和校正，用ＭＥＧＡ４软件构建系统树最终生成的序列比对文件。２．５广西田七种子带菌情况检测２．５．１种子外部带菌检测每个样品分别随机选取１００粒表皮上有病斑的种子和表皮正常无病斑的饱满健康的种子放入３００ｍｌ锥形瓶中，加入２５ｍｌ灭菌水，充分振荡，吸取５ｍｌ悬浮液于离、４０００、屯管中，＾＾ｒ／ｍｍ离屯２０ｍｉｎ，弃上清液，加入１１１１１灭菌水定容，直接吸取ｔ转速该液００ＤＡ平板上用己灭菌的涂布涂抹均匀。＾＞１灭１阵加入到直径为９ｃｍ的Ｐ，菌水°５２５Ｃ恒温培养箱作空白对照，每个样品次重复。将处理好的平板放入中黑暗条件下培养数天，观察记录田韦种子外部带菌的种类并按公式２．３和２．４计算各种真菌的分离比例。＝Ｘ〇〇２种子带菌率（％）（带菌种子数／检测种子总数）ｌ（．３）＝某菌的分离频率（％）（带某类菌种子数／带菌种子总数）Ｘ１００（２．４）２．５．２种子内部带菌检测将表皮上有病斑的田韦种子样品和表皮正常无病斑的饱满健康的田屯种子样品分别在化１％的升隶溶液中浸泡消毒Ｉｍｉｎ，用灭菌水冲洗３次，每个样品分别取５０粒种子用己灭菌的解剖刀将其外果皮，、果壳和种仁分开并将消毒后的外果皮、果壳和种仁组织分别放在直径为９ｃｍ的ＰＤＡ培养基上，每皿放１０粒，每个处理５次重’复，于２５Ｃ恒温培养箱中光照、黑暗各１化交替培养。观察并记录各培养皿中菌落２３．４的出现情况并按公式．和２计算各种真菌的分离比例。２．５．３种子带茵种类的鉴定将所分离到的各真菌分别进行纯化和镜检，根据各茵的培养性状和形态特征运用参考王具书进行种子带菌种类的鉴定。２７ ■广西大学硕女学位论文广西田－ｅ其苗性病巧的病化、发生规巧及巧巧研兜２．６广西田七真菌性病害药剂防治试验２．６．１广西田４：圆斑病麵防治试验２５８０选用药剂１．５％多抗霉素、％丙环哇、４５％咪醜胺、％代森铺锋、７０％甲基硫２菌灵、Ａ１６，Ｗ清水处理为对照，小区面积设置为Ｉｍ，每个处理４次重复，随机设６０ｋ一计。田间所施药液量均按每亩每次ｇ计，于田间发病初期进行第次喷药，每相一一隔１５天喷施药液次，共喷３次。在每次喷药之前Ｗ及最后次喷药的１５天后，分别调查并记录田间田屯植株的发病株数和病株级别，分别按公式２２、２５和２．６（．．赖传雅，１９９８）计算当次调查的病情指数、病情増长率Ｗ及相对防治效果。病情指数增长率＝－００－（％）［（用药后病情指数用药前病情指数）／（１用药前病情指数）］Ｘｌ〇〇（２．５）＝长率－防治效果（％）［（对照组病情指数增处理组病情指数增长率）／（对照组病惰指数增长率］Ｘ１００（２．６）２．６．２杀菌剤对神子的消毒处理效果栓测２．６．２．１杀菌剂拌种处理供试种子用药剂进行Ｗ下处理：５０％多菌灵ＷＰ和５０％福美双ＷＰ按照药剂与１２００９９８０５０种子质量比：拌种；％恶霉灵ＲＰ和％代森儘锋ＷＰ按照药种比１：２拌种；７０％甲基硫菌灵ＷＰ按照药种比１：３３３拌种，将各处理种子分别放入锥形瓶中，塞紧瓶口，静置过夜后。将处理过的种子分别放于９ｃｍ的ＰＤＡ平板上，每皿放置１０粒，‘毎个处理３次重复，Ｗ未经任何处理的种子为对照，Ｗ２５Ｃ恒温条件下于培养箱中光照及黑暗各１２ｈ培养。每天观察并做好种子带菌情况的记录，按公式２．７计算药剂的消毒处理效果。％＝－药剂的消毒效果（）［（对照样品的带菌率药剂处理样品的带菌率）／对照样品的带菌率］ＸＩ００％（２．７）２．６２．２．杀菌剂浸种处理５０％Ｐ２５Ｏ供试种子用药剂进行Ｗ下处理；多菌灵Ｗ按１：１稀释（即ｌＯｇ可湿性粉剂加灭菌水１２．５ｋｇ）；７０％甲基硫菌灵ＷＰ按照１：４００稀释；５０％福美双ＷＰ和８０％代森編巧ＷＰ按照１：５００稀释；４５％味鲜胺ＥＷ按照：１０００稀释；９９％恶霉灵ＲＰ按１照１：８０００稀释。各处理种子分别充分混匀浸种１化和２４ｈ。将处理过的种子分别放于９ｃｍ的ＰＤＡ平板上，每皿放置１０粒，每个处理３次重复，Ｗ无菌水处理的种子为对２８ ＂广巧大＃领古掌化巧义广巧田■苗往巧者巧巧化ｆｅＪＩ、乂生规＃及巧巧巧巧‘照，Ｗ２５Ｃ恒温条件下于培养箱中光照及黑暗各１２ｈ培养。每天观察并做好种子带菌情况的记录，按上述公式２．７计算药剂的消毒处理效果。２６２Ｂ．．．田间种子消毒处理防治试验根据室内药剂处理种子的试验结果，选择福美双、恶霉灵及咪鲜胺进行田间药剂１２处理试验。所设处理为：Ａ：福美双浸种ｈ（４次重复分别标为Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４）、Ｂ：福美双拌种（４次重复分别标为Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４）、Ｃ：恶霉灵浸种１２ｈ（４次重复分别标为Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４）、Ｄ：恶霉灵拌种（４次重复分别标为Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、２ｈ４Ｅ一Ｄ４）、Ｅ：眯鲜胺浸种１（次重复分别标为１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４）理作为，每个处个，每小区播种５００粒，每个处理４次重复小区，Ｗ清水浸种（Ｆ）作对照（４次重复２分别标为Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４）。按播种密度为４Ｘ５ｃｍ，每６６７ｍ播种量１６万椅进行小２区设计，每小区面积为１．８ｍ。于播种季节将各处理种子播种至大田，观察记录出苗率及病害发生情况。按公式２．１、２．８和２．９分别计算幼苗的发病率、出苗率和防治效果。＝Ｘ出苗率（％）（每小区出苗数／５００）１００（２．８）＝－Ｘ防治效果（％）［（对照组发病率处理组发病率）／对照组发病率］１００（２．９）２９ 广巧太单硕古単化论义广西田女真巧性病巧的病化、乂生规泮＆防巧研巧３结果与分析－３．１广西田ｔ真菌性病害种类及发生与危害情况２０￣１４２０１５年，对广西百色市乐业、靖西、德保、田林、西林、田东、隆林、凌云等８个县的田屯种植区进行田屯病害普查，调査发现并鉴定了田屯真菌性病害７、、种，分别为黑斑病圆斑病根腐病、炭痘病、白粉病、灰霉病和疫病。圆斑病在广西田屯上发生已较为普遍，上升为主要病害，这也是首次报道广西发生田屯圆斑病；黑斑病、根腐病仍然是田尤生产上发生的主要病害。３丄１田毛圆斑病—田毛圆斑病由械菌刺Ｈｒｔ－抱ａｃｅｎＨｆｌ（ａｉｇＤｅｉｈｔｏｎ］引起。田ｂ叶）ｇ，初期病斑呈水溃状，后期逐渐变为褐色，病斑圆形部受害，具有明显轮纹。随病程一－，不规则形大斑１）发展多个病斑可合并成为。发病后期，病部逐渐腐烂（图３。叶柄受害则形成水溃状嫌缩，，而后可导致叶片脱落害则病部发生褐变；茎杆受并自病部折垂。发病严重时，，植株大片死ｔ。在潮湿条件下可见病部表面产生稀疏的白色霉层。，乐业县、靖西县、凌云县、西林县等均有该病发生乐在本次调查中，发病重的一业县花坪镇调蒼点，６．４４，，全园圆斑病发病率达４８％病情指数１发病最重的田林县浪平乡一调查点，全园圆斑病发病率高达６０％从上，田屯植株成片死亡。－图３１田屯圆斑病的田间危害症状么田间症状；ｂ．病叶；Ｃ．愈合大斑Ｆ３－１ｔＰａｔｉｇ．Ｓｙｍｐｏｍｓｏｆｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｒｏｕｎｄｓｏｐａ．Ｓｌ；ｏｍｓｉｎｔｈｅｆｉｅｌｄ．Ｄｉｓｌ．Ａｈｅａｌｉｎｌｙｍｐ；ｂｅａｓｅｄｅａｆ；ｃｇａｒｅｓｏｔｇｐ３０ ■巧巧巧广西大洋硕Ａ单位论义广巧田亡真巧性病奋的巧原、乂生规件＆巧３．１．２田白粉病３丄２．１田间发病症状田走白粉病由人参白粉菌（￡＞ｙ嘟妃ＢａｉｅｔＬｉｕ）引起。田４；：发生于叶部一，时，受害部位形成近圆形的白色霉状斑似层灰白粉覆盖于叶片，随病程发展病斑连片。一，９７％，在本次调查中，仅在德保县足荣镇调查点发现该病害发病率为２４．病情指数７．３３。图３－２田毛白粉病的田间危害症状ａ．．田间症状；ｂ症状近观Ｆ－ｍｉｉ３２ｔｏｍｓｏｆＰａｎｔｏｉｎｓｅｏｗｄｅｒｍｌｄｅｗ．Ｓｙｎａｘｏｇｎｇｇｐｐｙａ．Ｓｔｏｍｓｉｎ化ｅｆｉｅｌｄｂＳｔｂｄｉｎｈｏｒｔｄｉｍ．ｍ；ｏｍｓｏｓｅｒｖｅｓｓｔａｎｃｅｙｐ；ｙｐ３丄２．２病原菌分生抱子形态特征。分生抱子梗无色，直立不分枝，有多个隔膜分生抱子无色，備圆形至近巧状，￣Ｘ￣２１２５４７５１３ｍｌ２５ｌｍ３２２５ｘｍＸ１８ｍ。大小为．ｍｌ．ｉｍ．７５（平均．．５）＾＾＾｜｜ｎ３１ 广西大学硕古単泣论义广西田女真巧化病冉的病原、乂生规巧及议谁巧究＇；＇吊讓．ＷＭ’２０ｔｎｙ導禮图３－３田屯白粉病的分生抱子形态ａ．分生袍子链；ｂ．分生袍子梗；Ｃ．分生抱子；ｄ．抱子萌发Ｆｉ－Ｍｏ．３３ｒｈｏｌｏｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｉＰａｌｇｐｇｃｏｎｉｄａｏｆｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｏｗｄｅｒｍｉｄｅｗｐｙａ．ＣｏｎｉｄｉａｃｈａｉｎｂＣｉｉｈｏ．ｉｉ．ｏｎｄｏｒｅ；ｃＣｏｎ出ａｄ．Ｓｏｒｅｅｒｍｎａｔｉｏｎ：ｐ；ｐｇ３．１．３田走黑巧病田屯黑斑病由人参链格拖＇（如似７２ａｎｆｌ／７ａｎａｘＷｈｅｔｚｅｌ）引起，是广西田毛主要的一真菌性病害之。田屯幼嫩茎、叶及花轴、叶柄等多个部位均可受害。田毛叶部受害时多沿叶片中部、叶尖或者叶缘开始受害，产生圆形或近圆形的褐色病斑。病斑初期呈现水溃状，后期可随病斑扩展进而多个病斑合并成不规则形的大病斑，随病程进展病斑中忙、颜色变淡，干燥情况下易破裂。潮湿条件下病部可见明显的黑色霉状物。田屯苗期受害可导致幼苗发生巧倒，叶柄与茎连接处受害易导致顶部叶片萎薦、折垂。，病斑扩展迅速，发病严重时可导致植株叶片大部分脱落在潮湿多雨天气，发病中也大片植株死ｔ。在本次病害调查中，靖西县、德保县、凌云县、西林县等多个县的调査点均有黑一４６８％斑病发生，西林县八达镇的谓査点发病重，全园黑斑病发病率达．，病情指数０＞达２．５３。３２ 广西大学硕女学ｔｉｔ论义广西田女真苗化病巧巧病原、乂生规泮及巧游研巧圍３－４田走黑斑病的田间危害症状ａ．幼苗受害症状；ｂ．田间症状Ｆ３－４ｍｔｓｏｆＰｔｉｂｌａｃｋｓｏｔｉ．Ｓｏｍａｎａｘｎｏｏｇｎｓｅｎｇｇｙｐｐａｍｄｉｄｄｌｉｎｂ．ｍｔｉｎｔｈｅ行ｅｌ．Ｓｙｐｔｏｍｓｏｆｓｅａｓｅｓｅｅｇ；Ｓｙｐｏｍｓｄ－３．１．４田ｂ根巧病田屯根腐病是威胁田七生产的一大殼灭性病害。发病初期，植株地上部分叶色不正，发病严重时，可导致植株叶片发黄萎黨，甚至脱落。田毛根部受害时，导致根表面开裂或病部腐烂一一。根系腐烂有两种表现，种是根表皮腐烂；另种是先从根内开，，，始腐烂，腐烂物可用手挤出随着病情发展最终根的内部完全腐烂只留下根表皮部分。潮湿条件下可见病部产生白色霉层。在本次调查中，靖西、乐业、田东、凌云、田林、西林等多个县的调查点均发现，１〇％，发病重的七园，根腐病的发病率达１８．８有根腐病发生但发病率多在１＾下％。一２５％凌云县下甲乡调查点据介绍拔除的根腐病病株达几千株之多，发病率在Ｗ上。３－５田＾图；：根腐病的田间危害症状ａ．田间症化ｂ．根部受害症状－ｆＦｉ５Ｓｍｔｏｍｓｏ的。城化五ｅｗｒｏｏｔｒｏｔ．３ｙｐ脚各ｇａＳｍ化ｍｓｉｎｔｈｅ円ｅｌｄｂ．Ｓｍｔｏｍｓｏｆｄｉｓｅａｓｅｄｒｏｏｔ．ｙｐ；ｙｐ３３ 广西大学硕古聲化论义广西田女其苗化病客的巧原、发生规谁及巧治巧究３丄５田走炭痘病田毛炭痘病可为害田尤叶片、叶柄Ｗ及茎杆等多个部分。幼苗受害可引起幼苗折断倒伏。被害叶片初期形成黄褐色小圆点，随病程发展可见病斑有褐色边缘，发病后期病部易发生破裂穿孔。叶柄及茎杆染病，生成黄褐色梭形病斑。另外在本次的调查中还发现另一种炭疫病症状展，在潮湿多雨天气，受害植株叶片呈烫伤状，随病程进病斑变褐色或黑褐色，茎巧受害引起叶片披垂，甚至掉落，发病后期植株倒伏。在本次调查中，炭痘病在整个调查区域内属偶发病害，在局部区域零厘发生。２０１５年在靖西直的调査中发现，发病率１．８％，病情指数１．４７。闘巧祕对图３－６田屯炭谊病的田间危害症状ａ．田间症状；ｂ．黄色病斑；Ｃ．褐色病斑．３－６ｍｔｓ巧昏Ｓｙｏｍｏｆ口。ＯＸ＂〇化巧Ｍｓｅ打ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅｐ各ａ．Ｓｙｍｐｔｏｍｓｉｎ化ｅｆｉｅｌｄ；ｂ．Ｙｅｌｌｏｗｓｐｏｔ；ｃ．Ｂｒｏｗｎｓｐｏｔ３丄６田古灰霉病田尤灰霉病由灰葡萄抱菌（公ｏ呵妃ｄｎｅｒｅａＰｅｒｓ．）引起，多从叶尖部分开始发病并向内扩展。发病初期病部呈水溃状，后期变为褐色，在潮湿条件下可见病部表面产生灰色霉层。在本次调査中，仅在德保县、靖西是和乐业县观察到零星发病株，发病率低于〇１／〇。３４ 广西大古单化论文广西田女其苗化病容的病原、乂生规巧＆巧巧巧巧＂＂＂＂ｊｍＢｒ－＊＇—Ｆ７￡＝？６￥＝ｓ＾３＝？＊ｉｊｆｌＢ＊ｅａｅ＾＾ｅ＾＾＾＾＾ｅ图３－７田走灰霉病的田简危害症状Ｆ－ｔｍｏｕｉｇ．３７Ｓｙｍｐｏｍｓｏｆ戶ａ。化Ｃ巧〇化巧化５饼？各ｒｅｌｄｇｙ３丄７田古疫病田屯疫病由恶疫霉［巧脚如诚ｏｒａｃａｃ／ｏｒｗｗ（Ｌ洗．ｅｔＣｏｈｎ）Ｓｃｈｒｆｌｅｔ］引起，发病初期，叶片多沿叶尖、叶缘出现暗绿色水溃状不规则形病斑，后期叶片呈开水烫伤状，叶片低垂，病部逐渐呈现半透明状干枯。一，１４在本次调査中，疫病仅在凌云县的个调査点发现发病率为％。图３－８田尤疫病的田间危害症状Ｆ３－８ｉｇ．Ｓｙｍｐｔｏｍｓｏｆ价内化Ｃ。〇化各／船巧ｊｇＷｉｈｔｇ３．２广西田走主要病害的发生规律调查由Ｗ上对广西田韦病害的发生种类及情况的初步介绍可知，黑斑病、圆斑病、根腐病是广西田七生产上的主要病害，白粉病、炭痘病、疫病、灰霉病的发生多为偶发或者零星发病，因此对于广西田屯病害的发生规律调査，重点讲述田毛黑斑病、圆斑病和根腐病的发生规律。３５ 广巧大单巧丈學化论文广巧田女真苗化病ｇ巧巧原、乂生规樓＆化巧巧巧３．２．１海拔与田毛病舊发生的关系本次调查结果显示，黑斑病与圆斑病的发生表现为海拔高的地区比海拔低的地区￣发病重。海拔在ｌ〇００１３００ｍ的高海拔地区，发生黑斑病和圆斑病较为严重，发病最重的调查点￣，全园发病率高达６００１０００ｍ８０％；但随着海拔高度下降至，各调查点－ｔ园黑斑病和圆斑病发病率均下降至可降至４００ｍ，甚１０％＾下，而海拔下降至Ｗ下后，所调查的屯园基本不发生黑斑病和圆斑病或仅零星发病。究其原因主要是海拔高的地区受气流的影响相对较大，这种气流变化较大的条件更适宜于靠气流和雨水进行传播的黑斑病菌和圆斑病菌在此生长，、繁殖和侵染从而利于病害发生、发展。此外，处于高海拔的乐业县调查点一毛园圆斑病发病重，据了解当年６月雨水巧多，降雨持一续至６月２０号左右，此后个月时间内，圆斑病便开始发生并迅速蔓延，说明圆斑，阴雨连绵天气有利于该病的发生与流行病的发生与湿度有关。３－表１海拔与圆斑病发生的关系？Ｔ－ａｂｌｅ３１Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｌｔｉ化ｄｅａｎｄｏｃｃｕｒｒｅ打说ｏｆＰｃｍｏｘｎｏ化打ｓｅ内各ｒｏｕｎｄ巧ｓｐｏｔ调査株数（株）发病株数（株）发病率（％）海拔（ｍ）调查地点ｅｎｆｈｅｍｂＤｉ．，．ｈｕｍｂｅｒｏＴｎｕｅｒｏｆｓｅａｓｅ，，．ＴＡ．化Ａｔｕｄｅｒｅａｏｔｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｎｖｅｉｉｉｉｓｔｉｇａｔｏｎ出ｓｅａｓｅｄｌａｎｔｓｎｃｄｅｎｃｅｐ、乐业县花坪镇西林县八达镇、－１０００１３００７９００５２８６．６８±１．３２ａ隆林县克长乡、田林县浪平乡凌云皂加尤镇、西林县八达镇、－７００１０００３８００９０．２４±０．０８ｂ靖西县武平乡、德保县足荣镇凌云县下甲乡、西林县那劳镇、７００切下如００００．０化０．邮ｂ田东县印茶镇注－－－：同列数据后标注不同的小写字母表示存在显著差异Ｐ＜００５。２、、４、（．）表３表３３表３表３－５３－６３－７、表和表同。Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｂｅｈｉｎｄｔｈｅｄａｔａｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｓｔａｎｄｆｏｒｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ－－—－－—ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ巧＜０５．Ｓ２．０）ａｍｅａｓｉｎｔａｂｌｅ３３３３４３５３６ａｎｄ３７，．，，，３６ 广苗大學硕古学位论文广西田女真帯性病宙的病原－冶研突、发生规巧及巧表３－２海拔与黑斑病发生的关系－ｌｉｂｅｌ如Ｔａｂｌｅ３２Ｔｈｅｒｅａｔｏｎｓ邮ｔｗｅｅ打ａｔｉｔｕｄｅａｎｄｏｃｃｕｉＴｅ打ｃｅｏｆ尸（２。献。〇化各Ｓ仍ｂｌａｃｋ巧ｓｐｏｔ调查株数（株）发病株数（株）发病率（％）海拔（ｍ）调查地点Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆ了ｈｅｎｕｍｂ灯ｏｆＤｉｓｅａｓｅＡｌｔｉｔｕｄｅＡｒｅａｏｆｉｎｖｅｓｔｉａｔｉｏｇｎｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｄｉｓｅａｓｅｄｌａｎｔｓｉｎｃｉｄｅｎｃｅｐ乐业县花坪镇、西林县八达镇、隆？７９００３３２４１０００．２０ｉｌ．ｌ０ａ１３００林县克长乡、田林县浪平乡凌云县下甲乡、凌云县加尤镇、西？８００３７２８５±〇７６００１０１．：６ｂ００林县八达镇、靖西县武平乡、德保４．县足乗镇６００切下西林县那劳镇５０００３８０．７６±０．１０ｂ、田东县印茶镇表３－３海拔与根腐病发生的关系．Ｔ－ａｂｌｅ３３Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏ打ｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｌｔｉｔｕｄｅａｎｄｏｃｃｕｉｒｅ打ｃｅｏｆ戶幻ｎｏｒ巧０的Ｚ巧此灼ｒｏｏｔｒｏｔ各ｇ〇调Ｓ株数（株）发病株数（株）发病率（／＞）海拔（ｍ）调查地点ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＤｉｓｅａｓｅｔｔＡｌｔｉｔｕｄｅＡｒｅａｏｆｉｎｖｅｓｉｇａｉｏｎｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｄｗｅａｓｅｄｐｌａｎｔｓｉｎｃｉｄｅｎｃｅ乐业县花坪镇、西林县八达镇、０？９００２８０１００１３００７．３５±０．９３ｂ隆林县克长乡、田林县浪平乡凌云县下甲乡、凌云县加尤镇、５００？１０００５３００１６４３西林县八达镇、靖西县武平乡、．０化１．１８ｂ德保县足荣镇、西林县那劳镇５００下西林县那劳镇４５００７６２１６．９３ｉ：３Ｊ９ａ、田东县印茶镇调查发现，根腐病的发生与海拔的关系表现为：随着海拔高度的升窩，发病率降￣５００￣低。海拔在１０００ｍ的地区，发生根腐病的七园，其发病率在４％８％左右；当海００￣拔升高到１０１２００ｍ时，发病最重的七园，其根腐病的发病率也仅为５．６％；但在海拔低于５００ｍ时．８％Ｗ上。，根腐病的发病率可达１８根腐病随海拔升高发病率降低的原因可能与气温有关。低海拔地区气温较高，而较高的温度有利于止壤中病原菌达到适宜生长和繁殖的温度条件，为病原菌的侵染和传播提供了较好的温度条件；島海３７ 广西大単项古単位论义广西田女真巧性病＃的病化、发生规活及巧巧研巧一，对±传病害病原菌的生长等有定的抑制作用拔地区气温较低。３．２．２荫棚类型与田七病害发生的关系３－４可由表Ｗ看出，普通网棚叶部病害的发病率及病情指数均比其他各类型的避雨棚高，说明避雨栽培对田韦叶部病害的发生有明显的抑制作用。究其原因主要是田屯上的主要病害如黑斑病和圆斑病的发生，与园内湿度大小及叶面保持湿润的时间长短关系密切７￣９月份发病严重子在。圆斑病和黑斑病在雨水较为集中的，病原菌的袍雨量充足的季节得Ｗ迅速萌发和生长。这些病原菌的生长、繁殖及侵染过程都与水息息相关。避雨栽培可Ｗ有效地减少田间含水量并保证园内湿度不至过髙，同时还能有效减少空气中的病原茵随雨水落入田间，因而对田七病害的抑制作用明显。３－４荫棚类型与田Ｈ表；：黑斑病和圆斑病发生的关系．Ｔ－ｔｏａｂｌｅ３４Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎ化ｅｔｙｐｅｏｆｓｈｅｄａ打ｄｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｆａ円ＯＸｎｏ＇＂？ｙｅｎ各各ｂｌａｃｋｓｐｏｔａｎｄｒｏｕｎｄｓｏｔｐ荫棚类型荫棚透光率（％）调查株数（株）发病株数（株）发病率（％）ＳｈｅｄＴｈｅｆＴｈｅｂＤｉｎｕｍｂｅｒｏｎｕｍｅｒｏｆｓｅａｓｅＴｈｅｔｅｏｆｓｈｅｙｐｄｔｒａｎｓｍｉｔａｎｃｅｉｎｖｅｓｔｉａｔｉｏｎｄｉｓｅａｓｅｄｉｎｃｉｄｇｌａｎｔｓｅｎｃｅｐ普通网棚－１５１２０２１５０２９７１３．８Ｕ０．９１ａ．Ｏｒｄｉｎａｒｎｅｔｓｈｅｄｙ改良错层通风棚誦１４８９．２５±１．４１ｂＩｍｐｒｏｖｅｄｓｔａｇｇｅｒｅｄｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎｓｈｅｄ避雨棚？７９．９２５００１１０４．４０±０．５６ｃＲａｉｎｓｈｅｌｔｅｒ通风避雨棚７？９．９２５００８５３．４０±０．３２ｃＶｅｎｔｉｌａｔｅｄｒａｉｎｓｈｅｌｔｅｒ３－５由表可Ｗ看出，田走白粉病在避雨棚中发病重，在普通网棚中基本不发病，而在通风避雨棚中发病率很低，说明白粉病在相对干燥的环境中更容易发生，而通风避雨棚使得降水不能直接落到田尤叶片上，且有效降低了棚内湿度，而通风设计又使，使得棚内不易发生病害或病害不至大规模流行得棚内湿度不至过离。３８ －ｅ其苗性病巧的病原生规巧及橡娩巧免广苗大単硕古学位论文广苗田、发表３－５荫棚类型与田屯白粉病发生的关系Ｔ－ａｂｌｅ３５Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎ化ｅｔｅｏｆｓｈｅｄａｎｄｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆ戶口＾幻义化／舶抓ｙｐｇ各ｐｏｗｄｅｒｙｍｉｌｄｅｗ荫棚类型荫棚透光率（％）调查株数（株）发病株数（株）发病率（％）ＳｈｅｄＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＴｈｅ打ｕｍｂｅｒｏｆＤｉ化ａｓｅＴｈｅｔｅｏｆｓｈｅｄｙｐｔｒａｎｓｍｉｔａｎｃｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｄｉ化ａｓｅｄｐｌａｎ化ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ普通网棚？１５．１２０２１５００Ｏ．ＯＯｉＯ．ＯＯｂＯｒｄｉｎａｒｙｎｅｔｓｈｅｄ避雨棚７－９．９１１４２２７６２４．９化３．７２ａＲａｉｎｓｈｅｌｔｅｒ通风避雨棚７？９．９６４２１５２．５３±０．３６ｂＶｅｎｔｉｌａｔｅｄｒａｉｎｓｈｅｌｔｅｒ３．２．３施用生物苗肥与田古病害发生的关系３－６从表可Ｗ看出，使用生物菌剂宁盾的植株与使用咪鲜胺的植株，病害发生率一＂＂差异不大，说明生物菌剂宁盾对田韦病害有定的防治效果，符合理念绿色植保。表３－６施用生物菌肥与田屯病害发生的关系－Ｔａｂｌｅ３６ＴｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｂａｃｔｅｒｉａｌｍａｎｕｒｅａｎｄｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆＰａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｄｉｓｅａｓｅｓ调查株数＝种植模式（株）发病株数（？）发病率（％）ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＤｉｓｅａｓｅＣｒｏｉｎａｔｔｅｒｎｐｐｇｐｉｎｖｅｓｉａｔｉｏｎｉｓｅａｓｅｄａｎｔｓｎｃｄｅｎｃｅｔｇｄｐｌｉｉ生物菌剂宁盾＋有机肥７５０１６８２２．４０±１．９１ａＮＤ＋ｏｒａｎｃｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｇｉ生物菌剂宁盾＋氮稱钟肥１０００１３２１３．２０±０．７６ｂＮＤ＋ＮＰＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ咪鲜胺＋有机肥＊９００１８６２０．６７±１．３６ａＰｒｏｃｈｉｏｒａｚ＋ｏｒａｎｃｆｅｒｌｉｚｅｒｇｉｔｉ味鲜胺＋氮碟钟肥９００１３５１５．００±１．２６ｂＰｒｏｃｈｉｏｒａｚ＋ＮＰＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅ３９ ＊ｔ－广西大学硕古単位论文广西田ｒ乂苗性病巧的巧原发生规帝＆巧：宵巧免、３．２．４困古年龄与田走病害发生的关系－由表３７可知，随着田古古龄的增长，田韦叶部病害的发病率降化：：处于较。田＾一为幼嫩的年生时，病害发生较为严重，；王年生植株病害发生相对较捏。随着年限的增长，田走植株各部分发育更加成熟，植株细胞胞壁逐渐增厚，对病原菌入侵的抵御能力增强，，使得植株的抗病性也随么增强病原菌穿透植株表皮的难度也相对增大。３－７七龄与田屯叶斑病表（含黑斑病和圆斑病）发生的关系■－ｌｉｉｂｔ幻ｗａ了ａｂｌｅ３７了ｈｅｒｅａｔｏ打ｓｈｐｅｗｅｅ打ｔｈｅａｅｏｆｘ灼＊ｙｃｗａｎｄｏｃｃｕｒｒｅ打ｃｅｏｆ戶幻打幻ｘｇｇ？巧巧此＂ｄｉｓｅａｓｅｓ容毛龄调查株数（株）发病株数（株）发：病率（％）ＴｈｅａｇｅｏｆＰａｎａｘＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＴｈｅ口ｕｍｂｅｒｏｆＤｉｓｅａｓｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅ沁．内ｎｖｅｓｔｉａｔｉｏｎｅｄａｎｔｓｏ各ｚ内ｓｅ巧ｇｉｇｄｉ化ａｓｐｌ一年七２３００２９５１２．８３±０．６８ａＯｎｅ－ｅａｒｙ尸幻ｎｏｔｏｇｉｎｓ色ｎｇ二年七±〇！４〇〇１０４７．４３．８０ｂＴｗｏ－ｙｅａｒｓＰａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ三年毛１３５０３０２．２２±０．４４ｃＴｈｒｅｅ－ｅａｒｓＰａｎａｘｙｎｏｔｏｇｉｎｓ色巧ｇ３．３广西田七真菌性病害的消长规律调查田屯真菌性病害消长规律调查所选地块在田走出苗后发生圆斑病和根腐病。通过每月对试验地田屯病害发病率的调查发现，试验所采用的有机玻璃罩对阻断气传病害病原菌的传播有效，。在田屯未出苗前放置有机玻璃罩于畦面每月观察病害的发生倩况并记录病害的侵染率，结果发现从４月调查开始直至９月调查结束期间，全程未打开过玻璃罩的对照组，其罩内田走始终长势良好，未发现有圆斑病、黑斑病等叶斑病的发生。全程打开玻璃罩的对照组，其病情指数规律即为病害在该试验小区内的田间自然３－９￣？可知，４５月，田屯圆斑病病情指数呈上升趋势６７月消长规律，在。由图病情指数上升最快，随后病情指数上升幅度减缓。４０ 广西太単硕古単化论义广西田女莫宙往病＃巧巧化、发生规＃及巧途巧３＆一４月份打开个月有机玻璃罩的试验组病情指数为１１．２７，与全程开罩的对照组（３．％）及大田自然病害发展情况（病情指数１０７８）差病情指数１．异不大。重新盖回玻璃罩后继续进行观察记录的几个月内，该试验组病害的病情指数有所上升，但上升幅度小。５一个月有机玻璃罩的试验组病情指数为％７月份打开．６，低于全程开罩的对照组（病情指数３６．９７）。重新盖回玻璃罩后继续进行观察记录，该试验组病害的病情指数呈上升造势，但病情指数上升幅度逐渐减缓。一５５近于全程开罩的６月份打开个月有机玻璃罩的试验组病情指数为６０．，己接对照组（病情指数６３．１６）。说明７月进行观察记录时，已处在病害发生高峰期，病情迅速发展。重新盖回玻璃罩后继续进行观察记录，，其病情指数上升幅度减缓与全程一致开罩的对照组及大田自然病害发展情况病情指数走势。一７月份打开个月有机玻璃罩的试验組病倩指数为３５．３７，显著低于全程开罩的对照组（病情指数７０．５７）。重新盖回玻璃罩后继续进行观察记录，其病情指数仍缓慢上升，但上升幅度小。一８２０．６月份打开个月有机玻璃罩的试验组病情指数为，显著低于全程开覃的对照组（病情指数７３．０１）。全程开罩的对照姐其病情指数呈上升趋势６￣７，在月病情指数上升幅度最大，这一与大田自然病害消长规律调查得出的病情指数走势相致，但由图可知，全程开罩的对照组其各个月的病情指数高于大田调查对照组，这是由于全程开罩对照组局限于试一验小区中，从，，试验小区不进行喷药处理定程度上能反映出病害在田间的消长规律但其值高于大田调査所得出的病情指数。，观察发现通过用有机玻璃罩遮挡，可观察到各月份田屯圆斑病的侵染数量，田屯圆斑病病害发病高峰在６￣７月６月６￣７，，，前随病害发展病情指数逐渐上升在７￣月病情发展最为迅速，病情指数上升趋势逐渐减缓。５６月是降水相对较多；月后的月份，多雨季节为田七病害的病原菌提供了充足的水分供其萌发和生长，适宜的温７度条件也有利于病原菌的生长繁殖，Ｉ病情在此期间扩展迅速使得月成为发病盛期。，，全程不打开的玻璃罩此外从图中还可看出，每月观察其中的田屯植株均长势良好，无病害发生，说明有机玻璃罩可＾有效阻断病原菌的侵染，也间接证明了田＾：：圆斑病通过气流和雨水进行传播。在调查过程中，发现该园有根腐病发生。５１８４０％，６月调查时根腐病发病率为．４１ 广巧大单巧古掌位论文广巧田－ｆｃ真苗化巧ｇ的巧康乂生规泮及巧论巧巧、１１２０月进行调査时．％，７月发病率继续下降至８．４％８，发病率下降至，到月仅零星发病。广西田屯圓斑病病害消长规律图—￣￣８０？兰兰——？４７０月试验沮－＞＾—５６０：ｆ月试验姐￣－－—－－崭５０－＾６月试验姐７／守■４０—？－７巧ｙ月试验组—■￣＾３０＂＾８试验組＾瑕７月２０－？－全程开罩对照…■、１／全程不开罩对照￣＾°－Ａ－全园大田调査对照■－＇＊＇＊＇＊１０４５６７８９月份（月）３－９广西田七圆斑病病害消长规律－Ｆｉｇ．３９Ｍｏｎ化ｌｙｖａｒｉａｔｉｏ打ｏｆ戶幻ｗａｘｎｏｆｏｇ／Ｔｕｅｗ各ｒｏｕｎｄｓｏｔｉｎＧｕａｎｘｉｐｇ３．４病原鉴定３．４．１田屯根腐病病原鉴定３．４丄１病原菌的致病性测定采用离体接种方法将待试菌株接种到健康无病的二年生田屯根部后，于接种第二天开始观察田屯发病情况。ＪＸＧＦ７菌株接种后第二天，刺伤和无伤接种均开始发病，刺伤接种第二天发病率７０％，接种第Ｈ天发病率达１００％；无伤接种第二天发病率４０％，接种第Ｈ天发病率６０％，接种第四天发病率９０％，接种第五天发病率达１００％，为强致病菌；对照处理不发病。病部初期呈水溃状病斑，后逐渐扩展，病部出现白色霉层，病部逐渐软腐。从病部横切剖开，可见根剖面呈褐色或灰褐色，病部组织较软，继续保湿培养可见病一部逐渐产生白色霉层。从发病部位进行再分离，得到与待测菌株形态致的病原菌。ＪＸＧＦ１９菌株接种后，刺伤接种第二天发病率６０％，接种第Ｈ天发病率９０％，接种第四天发病率达１００％；无伤接种不发病，为条件致病菌！对照不发病。病部初期呈水溃状病斑，后逐渐扩展，病部出现白色霉层，病姐织逐渐软腐。从发病部位进行一再分离，得到与待测菌株形态致的病原菌。４２ 广西大単硕古聲位论义广巧田女哀巧使病＊的病化、义生规资次化治巧巧纖３－国１０田屯根腐病菌接种发病症状ａ．．．．健康田屯根部；ｂ健康田毛根横切面Ｃ；接种后发病根横切面；ｄ水溃状病斑；ｅ．接种对照；ｆ．病斑上的白色霉层Ｆ－ｍｉ３１０ＳｔｏｍｓｏｆＰａｎａｘｔｏｉｎｓｒｏｏｔｒｏｔａｆｔｅｒｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｇ．ｙｐｎｏｇｅｎｇａＨｅａｌ化ｒｏｏｔｂ．Ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｓｅｅｄ０打ｏｆｈｅａｌ化ｒｏｏｔｃ．Ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆｄｉｓｅａｓｅｄｒｏｏｔ．ｙ；；ｙａｆｔｅｒｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ；ｄ．Ｗａｔｅｒｙｓｐｏｔ；ｅ．Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｃｈｅｃｋ；ｆ．Ｗｈｉｔｅｍｏｌｄｌａｙｅｒｏｎｔｈｅｓｐｏｔ３．４丄２病原菌的形态特征ＸＧ‘ＪＦ７菌株在２８Ｃ条件下，病原菌在ＰＤＡ平板上生长良好。菌落圆形，平铺，搜状，质密，茵丝体初为白色，后中间变为淡紫色或玫瑰紫色。大分生抱子无色，嫌２６２５￣３７５３７５￣５００￣刀形或新月形，大小．ｌｍ４．ｍｌＸ．ｌｍ．ｌｍ，具３５个隔膜；小型分生＾＾＾＾￣ｍ￣抱子棒形，大小７．５ｉｍ１１．２５ｍＸ２．５０ｉ３．７５ｉｍ。｜ｎ｜｜ＸＧ‘ＪＦ１９菌株在２８Ｃ条件下，病原菌在ＰＤＡ平板上生长良好。菌落圆形，平铺。。菌落正面白色，背面初期白色，随后微黄分生抱子无色，大型分生抱子镶刀形，大￣０￣４￣ｍ小リ．５ｌｍ１．２５ｎｍＸ２．５ｉｍ５．００，具３５个隔膜！小型分生袍子未见。＾＾ｎ４３ 广巧大学硕古单值论义广西田女其巧性病在巧巧巧乂棟交巧合巧巧、－■ＳＴＴｎ＾三邸阳＾＾＾Ｒ．＞ｍ［‘誦图３－１１田韦根腐病菌ＪＸＧＦ７的形态特征ａ．ＪＸＧＦ７菌落形志（正面）；ｂ．ＪＸＧＦ７菌落形态（反面）；Ｃ．ＪＸＧＦ７的大型分生抱子；ｄ．ＪＸＧＦ７的小型分生袍子？－ｉｒｉＦｉ．３１１Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｃａｌｃｈａｒａｃｔ；ｅｓｔｉｃｓｏｆａｔｈｏｅｎｏｆ戶幻／２妨ＷＯ化巧此ｎｒｏｏｔｒｏｔＪＸＧＦ７ｇｐ呂巧各ａ．ＣｏｌｏｎｙｏｆＪＸＧＦ７（ｆｒｏｎｔｓｉｄｅ）；ｂ．ＣｏｌｏｎｙｏｆＪＸＧＦ７（ｂａｃｋｓｉｄｅ）；ｃ．ＭａｃｒｏｃｏｎｉｄｉａｏｆＪＸＧＦ７ＭｉｉｉＧＦ７ｄ．ｃｒｏｃｏｎｄａｏｆＪＸ；＾ｉ－ＡＷｊ－＇－＇．冒－．．，／雨Ｉ生巡：麵Ｂｉ．—－ｒｉ＆ＬｄＢ３－９图１２巧Ｈｉｌ根腐病菌ＪＸＧＦ１的形态特征ａＸ邸１９菌（正面）１９．Ｊ．Ｊｂ．ＪＸＧＦ菌落形态（反面）ｃｄＸ佛１９的分生拖子落形态：；，Ｆ－ｉｌｈａｒｉｉ３１２Ｍｏｒｈｏｌｏｃａｃｒａｃ化ｓｔｉｃｓｏｆａｔｈｏｅｎｏｆｆ口ｎｏｘｎｏｔｏｆｒｏｏｔｒｏｔＸＧＦ１９ｇ．ｐｇｐｇｇｊｎｓｅｎ各Ｊａｏｌｏ打ｏｆＪＸＧＦ１９ｆｒｏｎｔｓｉｄｅｔｉ．ＣｏｌｏｎｏｆＪＸＧＦ１９ｂａｃｋｓｉｄｅｃｄ．Ｃｏｎｉｄｉａｏｆ．Ｃｙ（）；ｙ；，（）ＪＸＧＦ１９４４ ？广西大単硕古単化化文广巧田－ｔ真苗性病者巧巧康Ａ生规＊戊巧满研巧、３．４丄３病原菌的分子生物学鉴定供试田七根腐病病原菌菌株经ＩＴＳ基因上、下游引物进行ＰＣＲ扩增后，得到约５００ｂ－ｐ左右大小的片段（如图３１３所示），所得条带清晰明亮且无杂带，条带所显示的分子量大小与预期大小一ＤＮＡ致，可用于后续工作。经测序、分析５０抓，获得Ｐ的序列。从ＧｅｎＢａｕｋ下载用于构建系统发育树的银刀菌菌株的打Ｓ序列。用ＣｌｕｓｔａｌＸ软件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的序列分别进斤对准后，再用ＢｉｏＥｄｉｔ手工校正Ｗ优化排序匹配。经手工比对和校正，最终生成的序列比对文件，用ＭＥＧＡ４软件构建系统树。ＩＴＳ区碱基序列数据集合共有５１７个碱基用于分析。ＷＴＨｃＡｏ沁ｍａＡａ切ａ－／ＧＡ４ｈｂｏｊＭｍ为外群，用ＭＥ软件Ｗ邻接法（ＮｅｉｇｒＪｏｉｎｉｎｇ）进行１０００次Ｂｏ－ｏｔｓｔｒａｐｓ重复后构建系统发育树。系统发育树显示；ＪＸＧＦ７菌株Ｗ１００％的支持率’Ｆｕ一与ｓａｎｕｍｐｒａ／矿ｅｒａｆＭＷ的四株菌株聚在起。ＪＸＧＦ１９菌株Ｗ７２％的支持率与＇机一ｉＷｚＭｍ／ｎｃｗＴｉａ化讯的兰株菌株聚在起。Ｈ３－Ｉ图１３供试菌株的ＴＳ序列ＰＣ民产物电泳图－Ｆｉｇ．３１３ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍｏｆＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆｔｈｅ化Ｓｉｔｅｄｓｔｒａｉｎｓ＂注：Ｍ：ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＮＡＵｄｄｅｒ；泳道１：ＪＸＧＦ７；泳道２：ＪＸＧＦＷ？Ｎｏｔｅ：Ｍ：ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒ；Ｌａ打ｅ１：ＪＸＧＦ７；Ｌａｎｅ２：ＪＸＧＦ１９４５ 广巧太单硕女学位论义广西田＾乂生规济＆巧‘冶研突７真巧化巧客的巧尿、．Ｆ＂ｓａｎｉ／ｍｏｘｓｐｏ／Ｔ／ｍＡＦ０６９３１０８５ｙ（）Ｉ＂＇ＩＦｗｓａｎｉ／ｍｏｘｙｓｐｏｆｗｍＥＦ４６４１６Ｆｕｓａｉｕｍｏｘｓｐｏｒｕｍ（巧ｙＬ９ｕｓａｎｕｍｏ９ｆｘｓｐｏ化ｍＵ巧５５巧作）＿ｙ．ｆｕｓａｎｕｍｕ打／ｒｍｅ０４６４６２９ｇｆｏ於）Ｆｕｓａｒｉｕｍｕ仿仿ｎｎｅｄｇＦｕｓａｒｉｕｍｕｔｔｉｆｏｒｍｅＧＵ２０５４２７ｇ（）ｕｓａ机ｆ／ｍ／ｈＨ７８ｐｏｙｐ，如出ｃｉ／ｍ８０（Ｑ朗）ｊＦｕｓａｒｉｕｍｏｌｈｉａｌｉ曲ｃｕｍ其ｐ．．．ｙｐ巧Ｌ－ｗＦ＂ｓａ口ｒ？ｏ／ｙｐＷａ／／ｄ，ｃｗｎＨＭ９９９９０４ｐ（）化「片巧ａｎｉ／ｍｅｇｗｓｅｆ＇（ＫＣ５Ｔ７１９４）ＦｔｉｓａＷｕｍｅｉ／ｆｓｓｉＨｑｔ—＊ＦｕｓａｒｉｕｍｅｑｕｉｓｅｔｉＥＵ３２６２０２（）ＩＪＸＧＦ１》巧ｔｏｏ片巧３片１ｔ／ｍｍｃａ／Ｔ７。化ｍＫＭ５１９（ｇ巧ＩＦｕｓａｒｉｕｍｍｃａｒｎａｔｕｍ．７２ＢＳ１３２１９０Ｆｗｎ／ＣｕｓａｎｎｃａｍＷｗｎＣＢＳ１３２８９４Ｆｕｓｓ加ｍ化巧ｍａ化ｍ０Ｆｕｓａｎｕｍｃｔｉ／ｍｏｍｍＤＱ４５３饥９１０「（）——１ｕｓａｒｉｕｍｌｍｏｒｕｍＦｃｕｐＬ．户＂ｓａｎ＂ｍｗ／ｍｏｍｍ０５７７１９１９於），．９９Ｆｕｓａ／ｍ如ｏｃ／ＨｏｅｓＮ９４２８３４成邱ＷＷＷ）Ｉ＊ｕｍｕｓａｒｓｏｒｏｔｃｈｉｏｄｅｓＦｉｐｒｉｉ９９、向ＦｕｓａｓｐｏｒｏＭｃｏｆｄ的ＫＦ３加Ｗ１３１００（）Ｆｕｓ加。巧如也ｂｏｓｕｍ＂Ｘ８６７２扣１００厂ｙｇ）加ｍ６口扣烛站〇誦ＩｕｓａｒｉｕｍｆｂｆｗｈＡｂｏｓｕｍ了ＭＭ３ｙｇＷ）ＩＦｕｓａｒｉｕｍＸｂｅｏｍｉｆｏｒｍｅ９４１７８Ｉ９９（）Ｉ—ＦｕｓａｒｉｕｍｂｅｏｍｉｆｏｍｅＩ＾ｒ衍．Ｉ化ｔ／ｓａｎｕｍｂａｏｍ＇ｆｏｒｍｅ户ＢＵ６７４１ｆ）＾ＪＸＧ巧Ｉ：巧Ｔｒ／府７４內化ａｎｕｍｒｏ巧化ｍＧＵ００１０Ｉ（）ｐＩ１００ｆｕｓａｎｕｍｐｒａＡｆｅ巧化ｍＨＭ巧９９５巧Ｆｕｓａｒｉｕｍｐ化Ｈｆｅｒａｉｕｍ（７１ＣＢＳ１８９．３８ＦｕｓａｒｉｕｍｒｏｌｉｆｅｒａｉｕｍｐＣ．ＢＳ２的．５４行巧ａｎｗｎｍ／，ｆｅ巧化ｍｐ’ｓａｒｉｕｍＦｕｓｏｆｅｆＷＨ〇６５＂的（）ＩＦｕｓａｒｉｕｍＦｕｓａ订ｕｍｓｏａｎｓｏｔｏ扣巧Ｕ３２化０７ｉｔ１００）１＇５３ＩＦｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉＤＱ０９４７０６（）７向＞：ｌｃ／４６４ｒｒｆｃｉｏｅｒｍ。ｈａｎｒａｍ／ｍ）〇ｄｅｍ７ａ相３。。／７１（ＥＦ１６９／ｄ／）ｊＩ１０．的３－１４Ｊ图Ｘ邸７、化邱１９及其近缘种基于ＩＴＳ序列的系统发育树－ｗｎＦｉ呂？３１４Ｔｈｅｈｙｌｏｅ打ｅｔｉｃｔｒｅｅｓｈｏｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｂｅｔｗｅｅｎＪＸＧＦ７、ＪＸＧＦ１９ａｎｄｉｔｓｐｇｐｒｅｌａｔｅｄｓｐｅｃｉｅｓｂａｓｅｄｏｎＩＴＳｓｅｕｅｎｃｅｑ供试田走根腐病病原菌茜株经ＴＥＦ－ｌａ基因上、下游引物进行ＰＣＲ扩增后，得到６００ｂ－约ｐ左右大小的片段（如图３１５所示），所得条带清晰明亮且无杂带，条带所湿一致，可用于后续工作。经测序、分析６４０ｂ示的分子量大小与预期大小，获得ｐ的ＤＮＡ序列。从ＧｅｎＢａｎｋ下载用于构建系统发育树的嫌刀菌菌株的ＴＥＦ－ｌａ序列。用ＣｌｕｓｔａｌＸ欢件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的序列分别进行对准后，再ｔ用Ｂｉ化ｄｉ，最终生成的序列比对文件手工校正Ｗ优化排序匹配。经手工比对和校正，－用ＭＥＧＡ４软件构建系统树。ＴＥＦｌａ区碱基序列数据集合共有４６６个碱基用于分析。４６ －冶巧免广西大学颂女単化论文广巧田女真巧化病者巧病巧：乂生规难及巧、ＴＨｃＡｏｒｆｅｎｎｃＡａｒｚｉａｗｗｍＭＥＧＡ４（Ｎｈｂｏ－Ｊｏｉｎｉｎ）为外群，用软件１＾１邻接法ｅｉｇｒｇ进００－行１０次Ｂｏｏｔｓｔｒａｐｓ重复后构建系统发育树。系统发育树显示；ＪＸＧＦ７菌株［＾９８％‘一ＪＸ９的支持率与机ｓ０／７Ｍｍ；ｒａ化？ｎ的两株菌株聚在起ＧＦ１１００％／巧加；菌株科的支持側的斯《化ｍ的Ｈ株一率与巧ｍｃａｍａ菌株聚在起。線合待试菌株的致病性测定情况、培养性状、其分生诞子等的形态特征，及基于ＴＳＴＥＦ－ｌＩ，：序列和ａ序列的系统发育树分祈确定引起广西旧Ｈ：根腐病的病原菌为风和护似加ＷＷ如ｅａｒｎ沁ＷＷ，属于真菌界（Ｆｕｎｇｉ），子囊茜口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），子囊菌纲（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ），肉座菌ｃ化ｏｍｃｅｔｉｄａｅ）目（Ｈｏｃｒｅａｌｅｓ），ＡＮｅｃｔｒｉａｃｅａｅ），镶亚纲（Ｈｙｐｏｙ，肉座菌ｙｐ赤壳科（刀ＭＭ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）。ｌＯＯＯｂｐ—３００ｂｐ—２００ｂｐ—３－－图１５供试菌株的ＴＥＦｌａ序列ＰＣＲ产物电泳图－Ｆｉ３－１５Ｔｈｅｅｇ．ｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍｏｆＴＥＦｌａｓｅｑｕｅ打ｃｅＰＣＲｒｏｄｕｃｔｓｏｆｔｈｅｔ：ｅｓｔｅｄｓｔｒａｉｎｓｐ？注：Ｍ：ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒ；泳道１：ＪＸＧ巧；泳道２：ＪＸＧＦ１９？Ｎｏｔｅ：ＮｔＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＭｌａｄｄｅｒ；Ｌａｎｅ１：ＪＸＧＦ７；Ｌａｎｅ２：ＪＸＧＦ１９４７ 广巧大単项古洋值论文广西田女其巧化巧＊的病原、发生规巧＆巧洁巧免ＪＸＧＦ１９５７ｆｔ／ｓａｒｉｗｒｗｎｃａｍｗｎＫＦ巧巧１００劫９９３（■ＩＦｕｓａｔｉｕｍｉｎｃａｍａｔｕｍＣＢＳ１３２１９４ＦｕｓａｒｉｕｍｉｎｃａｍａｉｕｍＩｗ＾７５１ＣＢＳ１３２３１７ｕｓａｒｉｕｍｉｎｃａｍａｔｕｍＦｓａｎｕｍ」Ｆ４郎５７４化Ｉ叫（）ＩＦｕｓａｒｉｕｍｅｕｆａｅｔｆｑ＂甘山泌＇Ｆ４９｜向站ｒｆｕｍｅｑ，Ｊ化阳（）ｒＦｕｓａｒｉｕｍｂｒａｃｈｙｇｉｂｂｏｓｕｍＪＦ７４０７２２ｌＯＯ（）Ｆｕｓａｒｉｕｍｒａｃｈｈｙｇ化ｈｏｓｕｍＩ＇ｕｓａｒｉｕｍＦｂｒａｃｈｉｂｂｏｓｕｍＧＱ５０５４１８ｙｇ（）ｏｒｏ９＂户ｕｓａｎｕｍｓｐｏｆｏ的（力／ｏＷｅｓＪＦ２７Ｓ５８１ＦｕｓａｒｉｕｍｓｔｒｉｃＭｏｆｄｅｓ（）ｐ＾／ＢＦｕｓａ所／ｍｃｕｍｏｒｕｍＦ２７８５９０ｙ）ＱＩＩＦｕｓａｒｉｕｍｃｕｈｎｏｒｕｍ１００？ＦｕｓａｒｉｕｍｒｕＦＪ９３９６６９ｃｕｌｍｏｍ（）Ｆ’‘ｕｓｓｎｗｎｓｏｔｅｎ／Ｆ７４０７Ｗ１００ｙ）厂Ｕ．Ｆ＊＾Ｈ＂ｍｓｏ＇ａｎ＇ｕｓａ＂ｕｍｓｏ，ａ？＂Ｆ７４０７Ｍ）户ｕｓａｎｗｎｒｏ府巧化ｍＧＱ９９ｐ／（８４８５３６广）巧—Ｈ１＾ｕｓａＦｒｉｕｍｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍＧＱ９２２９２６Ｆｕｓａｒｉｕｍｒｏｌｌｆｅｒａｔｕｍｐ（）ｐ—？ＪＸＧＦ７９８ＩＦ此ａ加ｍｏｗ邱＞〇ｗｍ（ＫＦ３０１６３６）＾厂．ｕｍｆ．．Ｊ９８５２９９巧化ａｎｏｘｓｐｏｍｍｓｐｓｅｓａｍｅＦｕｓａｄｃｍｉｏｘｓｐｏｒｗｎ９９ｙ（）Ｆｙ「１Ｆｕｓｒ巧ａ／ｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ＜Ｆ０３０５９１〇）－＂－．ｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｄ口ｎｕｍ１ＴＷｃｈｏｒｍ。／ｉａｒｚ／ａｎ＂／ｎＴｈ虹ＦＪ７化６艺ｄｅ（、ｊＩ１０．０５－图３１６ＪＸＧＦ７、ＪＸＧＦ９及其近缘种基于ＴＥＦ－ｌａ１序列的系统发育树－巧１ｈｌｏｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｓｈｏｗｎｈｅｌａｔｉｓｈｉｂｅｔｗｅｅ打ＪＸＧＦ７、ＸＧＦ１ｓｇ．３６Ｔｈｅｔ代ｏｎＪ９ａｎｄｉｔｐｙｇｐ－ｒｅｌａｔｅｄｓｐｅｃｉｅｓｂａｓｅｄｏｎＴＥＦｌａｓｅｕｅｎｃｅｑ３乂２田毛黑斑病病原鉴定３．４．２．１病原菌的致病性测定采用菌丝块活体接种法进行接种，于接种第二天开始观察田七发病情况。接种后第二天刺伤和无伤接种均开始发病，刺伤接种第二天发病率５０％，接种第兰天发病率７０％，接种第四天发病率１００％，对照处理不发病。从发病部位进行再分离，得到与一待测菌株形态致的病原菌。３４２２病原菌的形态鉴定．．．’病菌在２８Ｃ条件下，病原菌在ＰＤＡ平板上生长良好。茵落圆形，平铺，初期菌一。落颜色为白色，生长段时间后，菌落变为灰褐色菌落背面黑绿色。分生抱子梗褐￣，倒棍棒形８色，不分枝生抱子单生或串生，黄褐色至褐色，３；分个隔膜，有的含￣￣？１４个纵隔处略溢缩。分生抱子大小（３０．００．ｉｍＸ（１．１．１１。，隔膜８７５０）〇〇〇７５）叫ｆ根据待试菌株的培养性状及其分生抱子等的形态特征，鉴定本研巧中所分离得到４８ 广巧大单巧古掌化论义广苗巧女其苗促巧者的病原、乂泮＆巧台巧兜的田尤黑斑病的病原同前人所报道的人参链格抱（＾／ｅｒｗｊＴ／ｃｐｔｗｏｘＷｈｅｔｚｅｌ），属于真菌界（Ｆｕｎｇｉ），子襄菌口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），座囊菌纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ），恪抱菌亚纲（Ｐｌｅｏ巧ｏｒｏｍｙｃｅｔｉｄａｅ），格抱腔菌目（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ），格袍腔菌科（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ），链格抱属图３－１７田毛黑斑病菌形态持征ａ．菌藩形态；ｂ．分生抱子Ｆ－ｉｈｏｌｈｔｉｇ．３１７Ｍｏｒｐｌｏｇｉｃａｃａｒａｃｅｒｉｓｔｃｓｏｆａｔｈｏｅ打ｏｆ户０灼化Ｃ巧０化知化ｙｅ巧ｂｌａｃｋｓｏｔｐｇｇｐａ．ＣｏｌｏｎｏｆＰａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｂｌａｃｋｓｏｔ．Ｃｏｎｉｄｉａｙ；ｂｐ３．４．３田走圆巧病病原鉴定３．．４．３１病原菌的形态鉴定于畳微镜下直接取病叶组织病健交界部分置于载玻片上镜检观察，观察到田屯圆斑病病原菌的分生袍子梗色淡，有分隔，呈直立状或曲膝状。分生抱子倒棍棒形，顶＾Ｘｍ￣，有的可形成长嗦。分生抱子无色，６０ｍｖ２３５ｌｎ６１２５？ｌｍ部逐渐变细大小＾ｎ．２５■．ｐ＾￣（平均１８７．５ｍｌＸ９．２５ｕｎ），具６１４个隔膜，有的分生袍子在其基部细胞上可侧生出＾＾一￣￣２〇＿刺状附属丝，大小ｎｍ１１７．５ｎＸ１．５ｉｍ３ｊｍ。）叫）根据该病原菌镜检到的形态特征，鉴定引起广西田毛圆斑病的病原菌同前人所报＇ＨＤ道的械菌刺抱ａｃｍｎａａｒｔｉｅｉｈｔｏｎ］Ｆｕｎｉ（ｇ）ｇ，属于真菌界（ｇ），子囊菌口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），座囊菌纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ），座囊菌亚纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｉｄａｅ），煤食目（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ），小球壳科（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｄｌａｃｅａｅ），中央抱子菌属４９ 广西大华硕古聲位论义广巧田女其巧化巧宙巧巧化、乂生规珠＆防治研兜ｍ６Ｇ？ｍ師＾￡—．。．＇．’社巧释］、：ｔｅＦＷ－：ｊ巧ｉＩ誦！ｉ；ｉ這酉３－１８田韦圆斑病的分生拖子形态ａ．有附属丝的分生抱子；ｂ．有长塚的分生抱子－１ｈｏｌｏｉｌｒｉｔｆｃｏｎｉ出ａｆｄｔＦｉｇ．３８Ｍｏｒｐｇｃａｃｈａｒａｃｔｅｓｉｃｓｏｏｆａｗｏｘｎｏ化各／ｗｓｅｎｇｒｏｕｎｓｏｐａｉｉｉｈ．ｉｄｉｉｈｒｏ．Ｃｏｎｄａｗｔａｐｐｅｎｄａｇｅ；ｂＣｏ凸ａｗｔｓｔｒｕｍ３．４．４田屯炭痕病病原鉴定３４４．１．．病原菌的致病性测定采用菌丝块活体接种法进行接种。刺伤接种后Ｈ天，所有供试菌株均开始发病，－－－Ｘ－６Ｈ－１１－５Ｈ－２７４０％天其中ＪＣ４、ＪＣ３２、ＪＣ３１、Ｊ、、Ｈ１、发病率大于；接种第四，－－－ＪＣ－４Ｃ－３２－３１ＪＸ１－１５Ｈ－２７－、Ｊ、ＪＣ、６、Ｈ１、Ｈ、发病率大于６０％，ＬＢＨ１、ＬＢＨ１１、－－－３０ＹＢ２３１、ＹＢ２３１发病％，种第五天ＪＣ４、率大于其余菌株发病率在２０％Ｗ下，；接－－－－－－－－－ＪＣ３２、ＪＣ３１、段６发病率达７０％Ｗ上，Ｈ１１、Ｈ１５、Ｈ２７、ＬＢＨ１、ＬＢＨ１１、ＹＢ２３１０％ＬＪ发病率６：Ｉ上，其余菌株发病率大于３０％；接种毛天后，仍没有菌株发病率可达－１００ＪＣ－４Ｃ３２ＪＣ－３１％照处理不发病。无伤接种仅、Ｊ发病，且发病率小于６０％。；对和３４Ａ２病原菌的．形态特征１７株供试菌株在ＰＤＡ平板上的菌落形态特征，菌落平均直径及分生抱子大小等３－８ＰＤＡ平特征见表。供试菌株在板上初期为白色，Ｈ天后部分菌丝颜色有所改变；培养五天后，部分菌株产生朱红色抱子堆，部分菌株产生白色或灰白色菌核状分生抱一子盘，。通过镜检发现田走炭疫病菌共有Ｈ种形态型包括种细长的长圆筒形分生抱子一一，种短粗的圆筒形分生抱子及种新月形的分生抱子。５０ 广西大舉硕女学位论文广巧田女真巧化病巧的巧巧、乂生规萍及防难研究＾：〇＂ｍＩ。口ｊＩ司＊－３－１９ＣＷ／ｅ做加／ｍｗ／２９图ｉ六Ｍｃｒｉｃ０ａ的菌株ＢＷ的形态特征ａ．ｄ．．Ｃ．分生抱子和附着胞菌落形态；ｂ分生抱子；；分生抱子盘’’－－Ｆｉ．３１９ＭｏｒｈｏｌｏｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｉｎＢＷ２９ｆＣｏ妒ｚ／ｉ／ｇｐｇｓｔｒａｏ／ｔｏｏｃｗｗ如ＭｃＯｃｏ口ａ．Ｃｏｌｏｎ．ｉｉ．ｉｒｅｓｓｏｒｉａｄ．Ａｃｅｒｖｕｌｕｓ；ｂＣｏｎｄａｃＣｏｎｉｄａａｎｄａｐｐ；ｙ；＾ｉ｜．ＪＨ－＾ｉｔ＊－３２０／／－國Ｃｂ／ｅ化的ｃＡｗｗ各０£哗？〇７如此５的蘭株ＪＣ３１的形态特征ａ．菌落形态；ｂ．分生抱子；ｃ．分生拖子和附着胞；ｄ．分生抱子盘？ｉｌｈａｒｉ－Ｆｉ３－２０ＭｏｒｈｏｌｏｃａｃｒａｃｔｅｓｊｔｉｃｓｏｆｓｔｒａｉｎＪＣ３１ｏｆ０）／沁化仍ｃＡｗｍ／口£０口ｒ／ｏｚ如Ｊｇ．ｐｇ各巧Ｃｏｎｉｉａｃ．ｌａ．ＣｏｎｉｄｉａａｎｄａｒｅｓｓｏｒｉａｄＡｃｅｒｖｕｕｓ．Ｃｏｌｏｎｙｂ．ｄ；；；ｐｐ５１ 广西大单硕古单位论义广巧田女真苗化巧者的巧化、乂生规萍次巧诺巧究ｄ３－２１Ｃｂ／／ｅ化的ｃＡ－图ｉ／ｍ的菌株ＪＣ４的形态特征ａ．菌落形态；ｂ．分生拖子；ｃ．分生抱子和附着胞；ｄ．分生抱子盘Ｆｉ－２ｈｏｉｌｈａ－．３１ＭｏｒｌｏｃａｃｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｔｒａｉｎＪＣ４ｏｆｏｌｌｅｔｏＵｉｉｇｐｇＣｃｈｕｍａｌｅｎｕｍａ．Ｃｏｌｏｎｂ．Ｃｏ打ｉｄｉａｃｉ．．ＣｏｎｄｉａａｎｄａｒｅｓｓｏｒｉａｄＡｃｅｒｖｕｌｕｓｙ；；ｐｐ；＾３ｈ§ｉｋ＾ｈ？ｉｉｒ３－２２Ｃｂ船化的ｃＡｗｗｒｗ化ｍ的菌株ＹＢ－２３１图ｒ２〇２的形态特征ａ．ｃ．．．菌落形态ｂ分生抱子分生抱子盘和刚毛；；分生抱子和附着胞；ｄ－Ｆ－ｉ．３２２ＭｏｒｈｏｌｏｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｔｒａＹＢ２３１ｏｆＣｏｌｒｇｐｇｉｎｌｅｔｏｔｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍａ．ＣｏｌｏｎｂＣｏｎｉｄｉａｃＣｏｎｉｉａａｎｄａｒｅｓｓｒｉａ．Ａｃｅｒｖｕ山ｓａｎｄｂｒｉｔｌ．；．ｄｏｄｓｅｙ；ｐｐ；５２ 广西大単项古举位论文广西田女其苗從病宙的病原、备巧巧、乂生规珠＆巧：表３－８田４：炭痕病菌菌落形态及分生拖子大小Ｔａｂｅ－ｌ３８Ｔｈｅｃｏｌｏｎｙｃｈａｒａｃｂｒｓａｎｄｃｏｎｉｄｉａｓｉｚｅｏｆａｔｈｏｅ打Ｓｏｆｆ口ｎｏｘ各／巧文ｅ巧ｐｇｇａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ平均直径生长速率分生抱子大小种类誰娜形ＳｍｎＶｄ（长阿Ｘ宽（圆）（）以ｍ）ＳｅｃｅｓＩｓｏａｅｓＣｏｏｎｙｍｏｒｐｈｏｌｏｉｅｓｐｉｌｔｌｇＡｖｅｒａｇｅＧｒｏｗｔｈＣｏｎ础ｕｍｓｉｚｅ执ａｍｅｔｅｒｒａｔｅｓ中间白色绒毛状菌丝，旁边灰黑色ＹＢ－２３丝呈放射状化．±１．．．２７２４．５Ｘ．３１菌，边缘不整齐，菌落６７６７８９９６０８３３背面呈墨绿色菌丝稀疏，茜落墨绿色，边缘不整ＬＢＨ－±±１５０．巧１．００７．２００．１４２６．０４Ｘ３．５４齐，布满白色茜横状分生抱子盘菌丝稀疏，菌落盤绿色，边缘不整Ｘ－±２Ｊ６４８．００．９４６．８６±０，４２２５．５．５Ｘ３齐，密布灰白色茜梭状分生抱子蟲，菌丝稀疏菌落墨绿色，边缘不整Ｈ－２７±±４７．３３１．８６６．７６０．２６２５．５Ｘ２．７５齐，布满灰白色菌横状分生抱子盘茜丝稀疏，菌落璧绿色，边缘不整Ｂ－２３２６７Ｃ）化．３３±１．５３．止．２２４．Ｘ．ｏＵｅＵｉｃｈｕｍＹ９６２０２８２３５７齐，布满灰白色菌核状分生袍子盘ｔｒｕｎｃａｕｍｔ灰白色绒毛状茜丝，茜丝稀疏，边－６ＺＢ１１４７．６化１．２７．８１±〇．１８１５Ｘ３．５缘不整齐菌丝稀疏，，菌落壁绿色迪缘不整－Ｌ目Ｈ１１５１１８±１１７７．±．．３１０．１７２６．０４Ｘ３．１３齐，布满白色蘭核状分生抱子摄菌丝稀疏，茜落壁绿色，边缘不整－５０ＹＢ３６．００±１．５６７．１４±０．２２１４．１１Ｘ４．０７齐，布满白色茜核状分生抱子盘中间白色绒毛状茜丝，旁边灰黑色－±０２５Ｈ１１４８．６７Ｗ．９９６．９５．２８．６３Ｘ２．８１茜丝呈放射状，边缘不整齐菌丝稀疏，菌落墨绿色，边缘不整－±０Ｈ１５５１．６７±１．７１７．３８．２４２５Ｘ３４３．齐，密布灰白色菌横状分生抱子盎５３ 广西大単项古掌化论文广西田七真巧化病＃巧病化发生规带及巧泌巧究、３－８续上表：平均直径生长速率分生抱子大小种类菌株菌落形态ｆ巧长ｕ阿ｍ乂Ｘ巧冗ｍｍｍ／ｄ（）脚）＾ｍ）ＳｐｅｃｉｅｓＩｓｏｌａｔｅｓＣｏｌｏｎｙｍｏｒｈｏｌｏｇｉｅｓｐＡｖｅｒａｇｅＧｒｏｗｔｈＣｏｎｉｄｉｕｍｓｉｚｅＤｔｒｔｉａｍｅｅｒａｅｓ－ＢＲ４０灰白色绒毛状菌丝，边缘整齐６７．３３±２．０３９．６２±０．２９１４．３１Ｘ４．５ｏｌｌｅｔｏｃｈｕｍＢＷ－竺拍３±１５７．４７±０．２４５６Ｃｔｒｉ２９灰黑色绒毛状菌，边缘整齐．３．６１．２Ｘ．０４ｒｕｃ－±±０ｆｔｉｃｏｌａ１２灰黑色绒毛状菌结，边缘整齐５７．００２．３．１４．Ｘ５．６ＢＮ１８３３１５９－１竺ＬＹＺＢ５灰黑色绒毛状菌，边缘整齐６０．６５±１．５９８．６．２３４．０Ｑ虹０１６Ｘ５．６７气生苗丝灰白色，菌丝较稀疏，菌－±ＪＣ４６９．６７±１．７５９．９５０．２５化．５Ｘ４．６６Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ落偏绿色ａｉｅｍｉｍ气生茜丝灰，菌ｌ白色丝较稀疏，菌－７２±±ＪＣ３２．００５．２６１０．巧０．３４１７．１１Ｘ５．１５落偏绿色白色绒毛状茜丝，中间部分茜丝发ＣｏＵｅｔｏ化ｉｃｈｕｍ－１达，７３．０＊２．１０１．４±．３１５．６Ｘ５７８ＪＣ３旁边灰黑色绒毛状茜丝，边缘０３００３．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ不整齐３．５广西田走炭痘菌的单基因、多基因系统学分析在本研究过程中，针对田屯炭痘病，共分离了４００块病组织，分离得到了兰种形态的炭痘菌一，其中两种菌分生抱子圆筒形，种菌分生抱子为新月形。短粗圆筒形分５１５３８．八生抱子的菌株分离比例为．％，细长圆筒形分生抱子的菌株分离比例为％，９＾％。韦继９８９新月形分生抱子的菌株分离比例为．光（１）在Ｗ前的研究中将田七炭痘病菌分为了四种形态型。目前分子生物学技术已大量应用到病原菌研究中，结合前人对忙果炭痘菌做出的多基因分析研究，将多基因分析应用到田屯炭痘菌的研究中。选取Ｈ种形态型的菌株进行多基因分析，。对各菌株进行ＰＣ民扩增扩增结束后送往生物公司进行测序工作，测序所得结果登录ＮＣＢＩ，与ＧｅｎＢａｎｋ中的序列进行Ｂｌａｓｔ比对，查找并下载与测序所得结果同源性最高的序列。从ＧｅｎＢａｎｋ中下载已报道的相关菌株的序列，用ＣｌｕｓｔａｌＸ软件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的序列进行分别进行对准后，再用化ｏＥｄｉｔ手工校正Ｗ优化排序匹配。经手工比对和校一正，最终生成的序列比对文件，在所形成的同个合并基因数据集上，用ＭＥＧＡ４软５４ 广巧大単项古掌位论乂广巧田■其苗佐病者的病原、乂生规化＆巧巧研巧－Ｎ－件Ｗ邻接法（ｅｉｈｂｏｒＪｏｉｎｉｎ）进行１０００次Ｂｏｏｔｓｔｒａｓ重复后构建系统发育树，ｇｇｐ确定广西田七炭痘病病原菌共可分为几个类群。３．５．１田毛炭担病病原茵ＩＴＳ基因的分子系统学分析供试田走炭垣病病原菌菌株经ＩＴＳ基因上、下游引物（ＩＴＳ１和打Ｓ４）进行ＰＣＲ－扩増后，得到约５００ｂ左右大小的片段（如图３２３所示）ｐ，所得条带清晰明亮且无杂一，带，条带所显示的分子量大小与预期大小致可用于后续工作。从ＧｅｎＢａｎｋ下载用于构建系统发育树的炭痘菌模式菌株及经Ｂｌａｓｔ比对后同源性最高的打Ｓ序列。用ＣｌｕｓｔａｌＸ软件对各个自测基因序列及从ＧｅｎＢａ址上下载的序列分别进行对准后，再ｉｏＥｄｉｔ手工校正Ｗ优化排序匹配，，用Ｂ。经手工比对和校正最终生成的序列比对文件用ＭＥＧＡ４软件构建系统树。ＩＴＳ区碱基序列数据集合共有４８５个碱基用于分析，其中保守位点４５１个碱基，突变位点３４个碱基，简约信息位点３２个碱基。ＮＪ１７２构建的系统发育树盈示：本试验选取的株田毛炭痘病病原菌菌株共分为个类群一，其自举支持率均超过５０％。其中，第个类群分出２个分枝，分枝Ａ包含‘－－－４０－２９－５Ｃｏ化ｔｏ化／、ＢＮ１２、ＢＲ、ＢＷ、ＱＬＹＺＢ１５、ＪＣ３１等株供试菌株和ｃ／ｊＭ／ｗｙｈ／ｃｒｉｃｏａＣｏ／／ｅ化化各／ｏｅｏｓｐｏｒ／ｏ献Ｓ的模式菌株各１株，ｔｉｌ及２株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同Ｊ－４ＪＣ－源性最高的打Ｓ序列，得到８６％的支持率Ｃ和３２；分枝Ｂ包含２株供试菌株’及１株Ｃｏ／／ｅ化化ｃＡｗｎ的模式菌株，得到８６％的支持率。第二个类群Ｃ包’－－－化含ＬＢＨ１、ＪＸ６、ＹＢ３６等８株供试菌株和１株Ｃｏ／ｆｅ化化ｃＡｍ／ｍ？ｎ模式菌株及２株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的打Ｓ序列，得到１００％的支持率。图３－２３田走炭痕病供试菌蛛的ＩＴＳ基因ＰＣ民产物电泳图－Ｆｉｇ．３２３ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍｏｆＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌ戶幻ｉｓｏａｔｅｓｆｒｏｍ巧ｏｘ鱗切齡巧各５５ 广巧大単硕女单位论义广西田女其巧化病誓的巧原、乂生规巧Ａ巧巧巧死？注ＭＧ－－－：ｌｌｋｂｌｓＤＮＡｌａｄｄｒ泳道１Ｌ拙１２Ｙ目３６ＪＸ６：ｅｎｅＲｕｅｒｐｕｅ：泳道：泳道３：泳；；；；－－－－４Ｈ２７ＹＢ２３－－：泳道５：１泳道６ＪＣ３２７ＪＣ４ＬＹＺＢ１５ＢＮ１２道；；：；泳道：泳道８：泳道９：；Ｑ；；－－－１０：ＢＷ２９道１１；ＢＲ４０道１２ＪＣ３１永道；泳；泳：？ＮｏｅＭＧｅｎｅＲｕｌ－－－ｔ：：ｌｅｒｋｂｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒＬａｎｅｌＬ３ＨｌＬａｎｅ２ＹＢ３６ＬａｎｅＸ６Ｌａｎｅｐ：：３：Ｊ；；；；－－－４－－－：Ｈ２７Ｌａｎｅ５：ＹＢ２３１Ｌａｎｅ６ＬａｎｅＣ４ＬＬＹＺＢ；ＪＣ３２７：Ｊ：１ＳＬａｎ：ＢＮ１２Ｌａｎｅ；；；ａｎｅ８Ｑｅ９；；；１０－－－：ＯＴ２９Ｌａｎｅｌｌ：ＢＲ４０Ｌａｎｅ１２：ＪＣ３１；；３２－１ＪＣ３１６３—ＩＭ、３５６的６ＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌｏｅｏｓｐｏｌｉｏｉｄｅｓｏＨｅｔｏｔｃｈｕｍｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓｇＣｒｉｌｇＣａＨｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏ／ｉｏｉｄｅｓＪＮ９４３Ｑ９０（）曰Ｒ－４０ＢＷ－２９－ＢＮ１２８６—Ｃｏ化化ｈｕｍＡｔｆｉｃｆｒｕｃｔｉｃｏｌａＩＣｏ＇ｌｌｅｆｏ的ｃｈｕｍｆｒｖｃＵｃｏｌａＫＴ２２４７７９（）ＭＰ１８Ｃｏｔｉｅｔｏｔｃｈｕｍｒｕｃｏ／ｓＩＣ５＆１ｒｉｆ妃ＱＬＹＺ８■巧ＣＭＰ１２０７ＣｏｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍａｅｎｕｍＩ１ｌｌｌｉＢＪＣ＂４ｃ的帕〇／／ａ化ｃｈｕｍａｎｕｍ化ＪＣ－３２ＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＧＵ２２７８８７、（）—ＬＢＨ－１ｃＹＢ－３６Ｈ－２７１００－１ＬＢＨ１Ｊ父ＣｏＷＷｏＷｃｈｕ／ｎ化ｉｎｃａｆｗｎ巧ＹＢ－２３１ＣＢＳ．３ｔｏｔｔｒｕｎｔｕｍ１５１５ＣｏＨｅｒｉｃｈｕｍｃａＹＢ－２３２Ｃｏ／ｔｅ化折ｃｈｕｍ时ｎｃａ山ｍＱ的６２巧＂，ＨＭ５Ｉ１０．００５３－２４田韦炭擅病供试菌株的图ＩＴＳ基因的邻接法系统发育树？Ｆ－ｉｇ．３２４Ｐｈｙｌｏｇｒａｍｏｆ化／ｎｃＡｗｍｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍｆａｎ似？２０化巧做ｅｗｇｒｅｓｕｌｔｉｎｆｒｏｍｇＮ－ｅｉｇｈｂｏｒｏｉｎｉｎＮＪａｎａｌｓｉｓｂａｓｅｄｏｎＩＴＳｄａｔａｓｅｔｓｊｇ（）ｙ３．５．２田尤炭痕病病原苗ＡＣＴ基因的分子系统学分析供试田屯炭痘病病原菌菌株经ＡＣＴ基因上－－、下游引物（ＡＣＴ５１２Ｆ和ＡＣＴ７８３民）－进行ＰＣ民扩增后，得到约３００ｂ左右大小的片段（如图３２５所示ｐ），所得条带清晰明亮且无杂带一，条带所显示的分子量大小与预期大小致，可用于后续工作。ＡＣＴ区碱基序列数据集合共有１９８个碱基用于分析，其中保守位点１４８个碱基，突变位点５６ 广巧大单领女単位论义广巧田女其苗性病＃的巧原、乂生规泮及防巧巧究４９个碱基，简约信息位点４８个碱基。构建的ＮＪ系统发育树显示：本试验选取的１７株田七炭痘病病原菌菌株共分为２５０％一２个类群，其自举支持率均超过。其中，第个类群分出个分枝，分枝Ａ包含－－ＢＮ１２ＢＲ－４０、ＢＷ－巧１５等７ｃＡｍｍ、、、ＱＬＹＺＢ株供试菌株和ａ？舱化化／ＷＣ化〇／口．Ｃｏ舱化的ｃＡｗｍａ化ｅｎｗ讯的模式菌株各１株，及２株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高ＪＣ－３１的ＡＣＴ序列，９３％的支持率和１株Ｃｏ游ｔｏＷｃＡｗｍ得到；分枝Ｂ包含供试菌株＇ＡＣＴ１Ｂ如？ｅｏＳＰｏｎｏＷｅｓ的模式菌株｜＾１及株从Ｇｅｎａｎｋ上下载的同源性最高的序列，ｊ－２－６－得到９％的支持率。第二个类群Ｃ包含ＬＢＨ１、ＪＸ、ＹＢ２３１等９株供试菌株和１’ｃＡｍｗ化ｗｃａ化ｍ模式菌株１ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的ＡＣＴ株化化ｔｉｌ及株从序列，得到１００％的支持率。图３－２５田屯炭痘病供试菌株的ＡＣＴ基因ＰＣ民产物电泳图－Ｆｉ．３２５ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｔｏｒａｍｏｆＡＣ了ｓｅｕｅｎｃｅＰＣ民ｒｏｄｕｃｔｓｏｆＣＷ／ｅ化仍ｃ／ｗｗｇｐｇｑｐｚ？ｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍ／Ｖｚｗａｘ＂ｏ化各ｚ化ｙｅｎｇ？ＧｅｎｅＲｕ－－－注：Ｍ；ｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒ泳道１：Ｌ削１泳道２：ＹＢ３６泳道３：ＪＸ６；；；；泳－－－－道－－道４：Ｈ２７泳道５：ＹＢ２３１泳道６：ＪＣ３２泳道７：ＪＣ４；泳８：Ｑｌ＾ＹＺＢ１５泳道９：ＢＮ１２；；；；；－０ＢＷ－－泳道１２９道１１ＢＲ４０泳道１２ＪＣ３１：；泳：；：ＴＨＮｏｅＧｅｎ－－－ｔｌｅｆ１ｋｂｌｓＤＭＡｌａｄｄｅｒ１：ＬＢＨ１Ｌａｎｅ２：ＹＢ３６Ｌａｎｅ６Ｌａｎｅ：化ｅＲｕｐｕＬａ打ｅ３：ＪＸ；；；；４Ｈ－２７Ｌａｎｅ５－－－－－：ＹＢ２３１Ｌｎｅ６：ＪＣ３２Ｌ４Ｌａｎｅ８：ＬＹＺＢ１５Ｌａｎｅ９：ＢＮ１２Ｌａｎｅ：ａａｎｅ７；ＪＣ；；；；Ｑ；；－－—１０：ＢＷ２９Ｌａｎｅ１１：抓４０Ｌａｎｅ１２：ＪＣ３１；；５７ 广巧大＾｜＾广西田女真巧往巧＊巧巧化发生规常义巧＾古掌従论文；舍研巧、ＣＷＰ１１ＣｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｎｉｔｉｌＩ８５８ｃｃｏａＢＷ－２９—ＱＬＹＺＢ－１５ＢＮ－１２２１ＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒｕｃｔｉｃｏｌａＣｏＷｅ拍Ｗｃｈｕｍ（ＪＸ００９５０１）４５￣’Ｃｏ怡化（ｒｉｃｈｕｍｆｒｕ州ｃｏｆａＫＣ说６９２目（）６３ＢＲ－４０＂ｔＺＢ＊１１ＪＣ－３２９３ＡＩＩ；￣４ＪＣ４Ｃ〇＂０化的ｃｈｕｍａ＂ｅ／ｉｕｍＣＭＰＣｏｌｌｅｔｏｉＩ１２０７、ｔｒｃｈｕｍａｌｆｅｎｕｍｊＣｏｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｏｅｏｓｐｏｒｉｏｅｓ９５４４５０ｌｌｌｉｄＫＪｇ（）ＲＬ—＿＿－９２记則ＣｏＨｅ化ｔｒｉｃｈｕｍｌｏｅｏｓｒｉｏｉｅｓｇｐｏｄ４１—１如關３妨８７８Ｃｏ帖ｔｏ折ｃｈｕｍ／ｏｅｏ邱ＴＯ，曲ｓｇＣ６Ｓ１５１．３５ＣｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｕｍｔＨ－２７００１Ｉ—Ｈ－巧６４－６ＪＸ１２Ｈ－１１９ＹＢ－３６ＣｏＨｅｔｏｔｒｉａｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＣｏｔｅ化Ｗｃｈｕｍ，ｎ／ｎｃａｆｉ／ｍＸ９７５３５６ｙ）ＬＢＨ－１６ＳＢ－２Ｙ３２ＹＢ＊２ＷＵＢＨ－１１Ｉ１０，２０图３－２６田七炭痕病供试菌株的ＡＣＴ基因的邻接法系统发育树Ｆ－２６Ｐｈｏｉｇ．３ｙｌｇｒａｍｏｆＣｏ／／知０的ｃＡｗ／ｗｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍｎｏ化知恥饼容巧ｓｕｉｔｉｎｇｆｒｏｍＮｅ－ｉｈｂｏｒｏ打ｎＮＪａｎａｓｓａｓｅｄｏｎＡＣＴｔｓｇｊｉｉｇ（）ｌｙｉｂｄａｔａｓｅ３．５．３田毛炭痘病病原苗ＣＨＳ基因的分子系统学分析－－供试田七炭痘病病原菌菌株经ＣＨＳ基因上、下游引物（ＣＨＳ７９Ｆ和ＣＨＳ３５４Ｒ）ＣＲ－，３００ｂ左右大小的片段（如图３２７所示进行Ｐ扩增后得到约ｐ），所得条带清晰一明亮且无杂带，条带所显示的分子量大小与预期大小，可用于后续工作致。ＣＨＳ区碱基序列数据集合共有２２０个碱基用于分析，其中保守位点１８４个碱基，突变位点％个碱基，简约信息位点３２个碱基。构建的ＮＪ系统发育树显示；本试验选取的１７株田七炭担病病原菌菌株共分为２一－－－个类群，其自举支持率巧超过５０％。其中，第个类群Ａ包含ＢＮ１２、ＢＲ４０、ＢＷ２９、＇—ＬＹＺＢ－Ｗｏ的Ｑ１５等８株供试菌株和Ｃｏ／／ｃＡｗｍ＾Ｍｃｎｃｏ／ａ、Ｃｏ／／ｅ化饥ｃＡｍｗ）如ｃｆｅｙ、如Ｃｏ此化ＷｃＡｗｍａ沁ｎｗｗ的模式菌株各１株，及２株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高５８ 广面大単硕古単位论文广西田－ｆｃ真苗化病＊的病原乂生规律及巧冷研巧、－ＣＨＳ序１００％的支持率－１、权６、ＹＢ－２３１等９的列，得到第二个类群Ｂ包含ＬＢＨ；株供试菌株和１株ＣｏＷｅｔｏＷｃＡｗｍｆｒａｎｃａ／ｕｍ模式菌株＾＾及１株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的ＣＨＳ序列，得到１００％的支持率。ＨＨＨＩｈ图３－２７田走炭痘病供试菌株的Ｃ照基因ＰＣ民产物电泳图－Ｆｉ３２７ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｔｏｒａｍｏｆＨＳｅｕｅｎｃｅＰＣ民ｒｏｄｕｃｔｓｏｆ化价ｃＡｗｗｇ．ｐｇＣｓｑｐｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍ户。。ｏｘ。。化各切於ｗ容＂ＭＧｅｎｅＲｕｋｂ－－－注ｌｅｒ１ｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒ泳道１ＬＢＨ１泳道２ＹＢ３６泳道３ＪＸ６泳：：ｐ；：；：；：；ＹＢ－２－－－－道４：泳道５：３１泳道６：ＪＣ３２泳道７：ＪＣ４道８：ＬＹＺＢ１５泳道９：目Ｎ１２；；；泳Ｑ；；０－２９泳道－４０２－３１泳道１；ＢＷ１１：ＢＲ泳道１：ＪＣ；；？ＮｏＷ－－ｔｅ［：ＧｅｎｅＲｕｋｂｌｌＬａｎｅ１Ｌａｎｅ２ＹＢ３６ＬａｎｅＸ６Ｌａ打ｅ：ｌｅｒ１ｐｕｓＤＮＡａｄｄｅｒ：３：Ｊ；；；；—－－－－－４：Ｈ２７Ｌａｎｅ５：ＹＢ２３１Ｌａｎｅ６Ｌ：Ｌａｎｅ８：（ＬＹＺＢ１５Ｌａ打ｅＢＮ１２Ｌａ打ｅ：ＪＣ３２ａｎｅ７ＪＣ４９：；；；；Ｊ；；－２９？说－２－１０ＢＷＬａｎｅ１１？１４０Ｕ打ｅ１ＪＣ３１：：；；５９ 广西大単巧古学位论文广西田女＊苗＜＆＾容巧巧原乂生规泮Ａ防冷研免、２Ｂ－１１ＢＲ－４０ＣｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒｕｃｉｉｃｏｌａＫＴ３７２３８２）（—Ｌ－ＱＹＺＢｔｏｉｒｉｃｈｕｉｎｒｕｃｔｃｏ巧Ｃｏ＂ｅｆｉｉａ巨－Ｎ１２巧ＢＷ－巧ＣＭＰ１８１ＣｏＪｕｍｆｒｕｃｏ＇ａＩ巧贴化化对如松５６的３ＯｏＨｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓＡＡｒｇ１００ＩＩＪ３１０ｏＭｅｔｏｔｒｉｃｈｕ历ｌｏａｏｓｏｒｉａｄｅｓ６１Ｃｇｐｌ｜＿ｊ＾ＣＳｌｆ１１９２０４Ｃｏｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｏｅｏｓｉｄｅｓ３ｇｐｏｒｉｏＩＣＭＰ１２０７１Ｃｏ／ｔｅ虹怖ｈｕｍａ贴ｎｕｍｊＪＣ－３２Ｃｏｉｌｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍａｅｎｕｍ３７｜Ｉ化ＩｊＭＹＢ－３６ＢＹＢ￣Ｍ２ｔｏｕＨ－巧，，－ＬＢＨ１３ＹＢ－２３１ＪＸ－６ＣｏＨｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔ／ｖｎｃＭｕ讯Ｈ－２７－Ｈ１１ＬＢＨ－１１础Ｃ良Ｓ１５１．３５ＣｅｔｏＭｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｆｕｍＩ＂１Ｃｏ＂ｅ的ｎｍ如ｍ７４３２＇ｏｃｈｕｍＫＰｆ化（巧）Ｉ１００１．團３－２８田毛炭痕病供试菌株的畑Ｓ基因的邻接法系统发育树－Ｆｉ．３２８ＰｈｌｏｒａｍｏｆＣｔｉｌｔｆｒＰｌｔｇｙｇｏｌｌｅｏｔｒｉｃｈｕｍｓｏａｅｓｏｍａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｒｅｓｕｉｎｆｒｏｍｇＮｅ－ｉｇｈｂｏｒｏｉｎｉｎｇＮＪａｎａｌｙｓｉｓｂａｓｅｄｏ打ＣＨＳｄａｔａｓｅｔｓｊ（）３．５．４田相＾痕病病原菌ＧＡＰＤＨ基因的折系统学分析供试田七炭痘病病原菌菌株经ＧＡＰＤＨ基因上、下游引物（ＧＤＦ１和ＧＤＲ１）进００ｂ３－２９所示行ＰＣＲ扩增后，得到约３ｐ左右大小的片段（如图），所得条带清晰明亮且无杂带一，条带所显示的分子量大小与预期大小致，可用于后续工作。ＧＡＰＤＨ区碱基序列数据集合共有２２４个碱基用于分析，其中保守位点１１３个碱基，突变位点１０７个碱基，简约信息位点１０３个碱基。构建的ＮＪ系统发育树显示；本试验选取的１７株田屯炭痘病病原菌茵株巧分为２一，５０％。其中个类群其自举支持率均超过，第个类群分出２个分枝，分枝Ａ包含－１２－－２９－ＢＮ、ＢＲ４０、ＢＷ、１５等７株供试菌株和Ｃｏ舱ｔｏ化妃〇／幻ＱＬＹＺＢ、Ｃ’’ｏ舱Ｗｎｃ＆Ｍｍａ／ｚｅｍｗｉ的模式菌株各１株，Ｗ及１株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高＇ＰＤＨ－ｃＡｍｗ的ＧＡ序列，得到７６％的支持率ＪＣ３１；分枝Ｂ包含供试菌株和１株Ｃｏ恥化饥６０ 广巧大学硕古学位论文广西田女真巧化病巧巧巧化发生规律及巧治巧究、‘ｇ７ｏｅａｓ；ｐｏｎ０／沁Ｓ的模式菌株从及１株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的ＧＡＰＤＨ序列，－８６－ＹＢ－２３９得到％的支持率。第二个类群Ｃ包含ＬＢＨ１、ＪＸ６、１等株供试菌株和１株／ｒｗＭＣｆｌｆＭｗ模式菌株（ｉｉ＊及２株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的ＧＡＰＤＨ序列，得到１００％的支持率。图３－巧田屯炭痘病供试菌株的ＧＡＰＤＨ基因ＰＣ反产物电泳图＊Ｆ－ｉｌｈｏＡＰＤＨｇ．３２９Ｔｈｅｅｅｃｔｒｏｐｒｅｔ：ｏｇｒａｍｏｆＧｓｅｑｕｅｎｃｅＰＣ艮ｒｏｄｕｃｔｓｏｆＣｏＷｅ化化ｚｃＡｗ／ｗｐｉｓｏｌ过ｔｃｓｆｒｏｍｉ＼２巧ｆｌｘｗｏｆｏｇｉｗ文£ｗｇ＂ＭＧｅｎｅＲｕ－－－注ｌｅｒ１ｋｂｌｕｓＤＭｌａｄｄｅｒ泳道１ＬＢＨ１泳道２：ＹＢ３６泳道３ＪＸ６泳：：ｐ；：；；：；４－－－’－－－道：Ｈ２７５：ＹＢ２３１６：ＪＣ３２７：ＪＣ４：ＬＹＺＢＩＳ：ＢＮ１２泳道泳道冰道泳道８泳道９；；；；Ｑ；；０ＢＷ－巧ＢＲ－４０ＪＣ－３泳道１：泳道１１：泳道１２；１；；？Ｎｏｅ－－－ｔ：化ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｐｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒＬａｎｅ１：ＬＢＨ１Ｌａｎｅ２：ＹＢ３６Ｌａｎｅ３：ＪＸ６Ｌａｎｅ；；；；－２７ＬＹＢ—２３—－－－４：Ｈａ订ｅ５１Ｌ糾Ｌ７ＪＣ４ＬａｎＬＹＺＢ１５Ｌａ打ｅ９ＢＮ１２Ｌ：ａｎｅ６：ＪＣａｎｅ：ｅ８：Ｑ：ａｎｅ；；；；；；－－１０ＢＷ２９ＬａｎｅＩ１ＢＲ４０Ｌａｎｅ１２Ｊ１：：；：Ｗ；６１ 广西大単巧女弟位论义广帝田女真巧化病冉巧巧床乂棟＆巧巧巧免、ＢＲ－４０Ｐ１Ｃ杞Ｍ１８５８ｏ帖ｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒｕｃｔｉｃｏｆａＢＮ－２１—－ｏ＂Ｍｏｒｉｆｉ虹ＱＬＹＺＢ１５ＣｔｃｈｕｍｒｖｃｔｃｏＢＷ－２９５ＳＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ（ＫＰ７４３３６９）ｆ化１１ＭＡＡＣＭＰ１２１ｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌｉｅｎｕｍＩ０７ＣｏａＪ－３２ＣｏｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍａｌｌｅｎｕｍＯｌｌＩ４３Ｉ—ＪＣ－４—／（ｒｉｒｉｏｉｄｅｓｌＭｉ３５６８７８Ｃ〇／ｅｔｏｃｈｕｍｔｏｅｏｓｐｏｇＩＢ－ＪＣ３１ｉｃｈｕｍｉｆＣｏｔｅｔｏｔｆｉｏｅｏｓｏｒｏｄｅｓｊｇｐ。？’８ＣｏＷｅｔｏｆｎ如ｕｍｔｏｅｏｓｐｏ／７０ｓ械｛ＨＭ５７巧扣ｇ）ＹＢ－２３１６１ｕｍ？ｎ１０９ｒＣｏＷｅｔｏ折ｃｈｆｃａ化ｍＫＣ５巧（）ＹＢ＊２３２ＣＢＳ．Ｃ巧１３５Ｃｏ／ｔｅｈ地ｆｃｆｔｗｎｆｒｉ仍ｃａｆｔ／ｍｐＬｂＨ－１１１００ＬＢＨ－１Ｃｏｌｈｔｏｔｒｉｃｈｕｍ机ｎｃａｔｕｍＪＸ－６Ｈ－１１４５ＹＢ－３６Ｈ？巧Ｈ－２７ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＨＭ５７５３１９（）￣￣ＩＩ０．０２图３－３０田七炭痘病供试菌株的ＧＡＰＤＨ基因的邻接法系统发育树＊－ｉｌｉｆｒＦｇ．３３０Ｐｈｙｏｇｒａｍｏｆｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍ戶幻《＾２＾巧〇化＞／５£巧复ｒｅｓｕｌｔｉｎｏｍ巧ｇＮｅ－ｉＰＤＨｔｓｉｇｈｂｏｒｏｉｎｉｎＮＪａｎａｌｓｓｂａｓｅｄｏｎＧＡｄａｔａｓｅｊｇ（）ｙ３．５．５田毛炭痘病病原菌ＴＵＢ２基因的舒系统学分析供试田４：：炭痕病病原菌菌株经ＴＵＢ２基因上、下游引物（ＴＦ１和ｐｔ２ｂ）进行ＰＣＲ３－３１）扩增后７００ｂ的片段（如图，，得到约ｐ左右大小所示所得条带清晰明亮且无杂一，致２带条带所显示的分子量大小与预期大小，可用于后续工作。ＴＵＢ区碱基序列数据集合共有４８９个碱基用于分析，其中保守位点３９６个碱基，突变位点９３个碱基，简约信息位点９３个碱基。ＮＪ系１７构建的统发育树显示；本试验选取的株田七炭痘病病原菌菌株共分为２一个类群，其自举支持率均超过５０％。其中，第个类群分出２个分枝，分枝Ａ包含’’－－ＢＮ－－ＹＺＢ１２、ＢＲ４０、ＢＷ２９、ＱＬ１５等７株供试菌株和Ｃｏ恥化化ｃＡＭｗ／ｒｗｃｎｃｏ／幻、’Ｃ’ｏ舱Ｗｎｃ＆ｗｗａｈｅｎｗＯＴ的模式菌株各１株，Ｗ及１株从ＧｅｔｉＢａｎｋ上下载的同源性最高２－，９２％的支持率Ｊ３１ｏ狀化化ｃＡｗｍ的ＴＵＢ序列得到；分枝Ｂ包含供试菌株Ｃ和１株Ｃ６２ ＊广西大学硕古学化论义广西田ｔｒ真街化病宙的病原、乂生规球及巧巧研免的模式菌株！＾１及１株从ＧｅｎＢａｎｋ上下载的同源性最高的ＴＵＢ２序列，－－得到７７％的支持率二ＬＢＨ－１、ＪＸ６、ＹＢ２３１等９株供。第个类群Ｃ包含试菌株和１株仇旅化的ｃ／ｍｗ／ｒｕｎｅ如ＭＷ模式菌株臥及２株从Ｇｅｎ目ａｎｋ上下载的同源性最高的ＴＵＢ２序列，得到１００％的支持率。３－３图ｉ田屯炭痘病供试菌株的ＴＵＢ２基因ＰＣＲ产物电泳图Ｆ－ｉ３３１ＴｈｅｈｏｔｆＴＵＢ２ＰＣ民ｒｔｓｆＣｂ／化化／ｇ．ｅｌｅｃｔｒｏｐｒｅ：ｏｇｒａｍｏｓｅｑｕｅ打ｃｅｏｄｕｃｏ／ｅｃ７ｍｗｐｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍＰａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ＂ｎｅＲｕ－－％－注；Ｍ：Ｇｅｌｅｒ！ｋｂｐｌｕｓＤＮＡｌａｄｄｅｒ泳道１：Ｌ閒１泳道２：ＹＢ泳道３：ＪＸ６；；；；泳４Ｈ－２－－－－－道：７泳道５：ＹＢ２３１泳道６ＪＣ３２泳道７：ＪＣ４泳道８：ＬＹＺＢ１５泳道９：ＢＮ１２；；：；；Ｑ；；０－－－泳道１；ＢＶ２９道１１ＢＲ４０３１：泳道ｎ：ＪＣ；泳；？－ＮｏｅＤＭＬＬ２Ｌａｎｅ３Ｘ－ｔ：化ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ１ｋｂｌｕｓｌａｄｄｅｒａｎｅａｎｅＹＢ％Ｊ６Ｌａ打ｅｐ：；：；；－－－－－４Ｈ－２７Ｌａｎｅ５ＹＢ２３１Ｌａｎｅ６：ＪＣ３２Ｌａｎｅ７：ＪＣ４Ｌａｎｅ８：ＬＹＺＢ１５Ｌａｎｅ９：ＢＮ１２Ｌａｎｅ：：；；；；Ｑ；；－—１０ＢＷ－２９ＬＲ４０Ｌａｎｅ１２：ａｎｅｌｌ：Ｂ：ＪＣ別；；６３ 广巧大古學他论义广巧田女真苗化病巧巧巧原、乂生规巧＆化绝巧巧Ｃ－３２ＪＩ？Ｉｊｗ［ＢＷ－２９ＬＹＺＢ－Ｑ１５ＢＲ－４０Ｃｏｅｔｏｔｒｃｈｕｍｕｃｔｆｃｏａｌｌｌｆｒ／之Ｂ－＂ＣｏＨｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍａｆｔｅｎｕｍＣｏ怕ｔｏｔｒｉｃｆｗｍｆｉｖｃｔｆｃｏｆａ（ＧＱ８Ａ９４３５）ＩＣＭＰ８５８１ｌｌｅｔｏｔｈｃｈｕｍｍｃｔｉｃｏｌａＡ１ＣｏｆＢＮ－１２Ｐ２０７Ｃｏｔｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍａｌｉｅｎｕｍ１ＣＭ１１Ｊ－ｒＣ３１ＢＣＩＭ巧５６折８ｏ＂ｅｆ地ｉｃｈｕ／ｎｔｏｅｏｓｏｒｔｏＷｅｓｏｌｔｅｔｏｆｒｉｃｈｕｍｌｏｅｏｓｏｒＪｏＷｅｓｇｐＣ句ｊｇｐ＇Ｃｏｌｅｔｏｌｒｉｃｈｕｍｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｓ４９４３４ｉｄｅＱＱ８ｇ（）－ＬＢＨ１１ＣＢＳ１１Ｃｉ５．３５ｏＨｅｔｏｔｒｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＹＢ－２３２Ｈ－１１ＹＢ－２３１ＣＣｏ／ｔｅｔｏｆｒ／ｃ／ｕ侃化饥ｃａ／ｕｍ〇＜Ｃ１０９４５巧＂＇ＣｏＵ＾ｉｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍ０－１０ＨＬＢ１Ｈ－１５ＹＢ－３６ＪＸ－６Ｈ－２７ＣｏＨｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍ（ＫＣ１０９４７６）—ＩＩ００．１图３－３２田古炭痕病供试菌株的ＴＵＢ２基因的邻接法系统发育树＊Ｆ３－ｉｌＣＷｆｒｇ．３２Ｐｈｙｏｇｒａｍｏｆ於化化ｃＡｗｗｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍ户幻舟ＯＸｎｏ化巧Ｗ此巧各ｉｅｓｕｌｔｉｎｏｍｇ－ＵＢ２ＮｅｉｇｈｂｏｒｏｉｎｉｎＮＪａｎａｌｓｉｓｂａｓｅｄ０打Ｔｄａｔａｓｅｔｓｊｇ（）ｙ３．５．６田屯炭痕病病原菌多基因的分子系统学分析将五个经Ｂｉ祀化Ｖ７．０．５和ＣｋｉｓｔａｌＸ软件进行比对、切齐后的碱基序列，按照－－－－－ＡＣＴ１１９７，ＴＵＢ２１９８６８６，ＣＨＳ６８７９０６，ＧＡＰＤＨ９０７１１２５，ＩＴＳ１１２６１６１０的顺序…进行拼接。在所形成的同个合并基因数据集上，用ＭＥＧＡ４软件上选择邻接法－－（ＮｅｉｈｂｏｒＪｏｉｎｉｎ）进行１０００次重复的Ｂｏｏｔｓｔｒａｓ统计学检验后构建系统发育树。ｇｇｐ多基因合并基因区碱基序列数据集合共有１６１０个碱基用于分析，其中保守位点１２８６个碱基，３２０个碱基３０８突变位点，简约信息位点个碱基。构建的ＮＪ系统发育树显示：本试验选取的１７株田屯炭迫病病原菌菌株共分为２一５０％。Ａ包个类群，其自举支持率均超过其中，第个类群分出２个分枝，分枝含－？－－－ＢＮ１２、ＢＲ４０、ＢＷ２９、ＱＬＹＺＢ１５等６株供试菌株和Ｃｏ航ｔｏＷｃＡｗｗＭＣ妃〇／〇、作Ｃ＇ｏ舱化ＷｃＡｉ／ｍａ／ｚｅｎＭＷ的模式菌株各１株，得到９７％的支持率；分枝Ｂ包含供试菌株６４ 广西大単硕古学位论文广西田女其苗性病巧巧巧化、乂生规带及防语巧免’－ＣＷ二ＪＣ３１和１株／斜０的ｃ／ｚＭｗ如）£０１？／７０诚础ｅｓ的模式菌株得到１００％的支持率。第个－－－Ｃｂ类群Ｃ包含ＬＢＨ１、ＪＸ６、ＹＢ２３１等８株供试菌株和１株／ｔｏｏ化／ｃ／ｍｍ／ｎｍｃ加励００模式菌株，得到１％的支持率。ＢＮ－１２６８ＩＣＭＰ化５８１Ｃｏ／／ｅｔｏ化ｃｈｕｍｆｒｕ州ｃｏ／ａＢＷ－２９ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒｕｃｔｉｃｏｌａｗ￣ＱＬＹＺＢ－１５９７ＢＲ－４０Ａ－ＰｈｕｍＩＣＭ１２０７１ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃａ帖ｎｕｍ－ＣｏＨｅｔｏ的ｃｈｕｍａＨｅｎｕｍ６３ＪＣ３２Ｉ９訂Ｃ￣４ＪＪＣ－３１广Ｉ＊ＣｏＵｅｉｌｉｉｄＢｔｏｔｒｃｈｕｍｏｅｏｓｐｏｒｏｅｓｇ一Ｉ１００ＩＭＩ３５６８７８ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌｏｅｏｓｏｒｉｏｉｄｅｓＩｇｐＣＢＳ１５１．３５ＣｏＵｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍｐＣＪＸ－６－巧１００ＨＨ－２７ＹＢ－２３１ＣｏＨｅｔｏ的ｃｈｕｍｔｒｕｎｃａｔｕｍＩＩＹＢ－２３２ＹＢ－３６ＬＢＨ－１１ＬＢＨ－１１Ｉ１０．０５图３－３３田毛炭痘病供试菌株的多基因的邻接法系统发育树？Ｆ－ｉｎｆｒｉ３３３ＰｌｏｒａｍｏｆＣｏ／／別０於ｃ／ｗｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍ尸ａｎｏｘ打此内ｒｅｓｕｌｔｏｍｇ．ｈｙｇＡｗ各ｇ－ｈｂｏ－ＮｅｉｇｒｏｉｎｉｎＮＪａｎａｌｓｉｓｂａｓｅｄｏｎＭｕｔｉＧｅｎｅｓｅｕｅｎｃｅｊｇ（）ｙｑ通过ＩＴＳ、ＡＣＴ、ＣＨＳ、ＧＡＰＤＨ和ＴＵＢ２五个基因联合建树综合分析得出，供试的１７株田七炭追病病原菌株共分为四个种群：果生炭痘菌ＣＷ／幻０化／ｃ／ｍｗ如ＷＣ沾如把的’ｔ．ｉ＆ＫＤ．ＨＣｂ／／Ｂ．ＳＷｅｉｒ足ＲＲＰｒｉｈａｓ．ＬＣａ．ｄｅ、异形炭痘菌／／ｅｃｍｗ口ｚｅｗｗｗ．．，ｙＪｏｈｔ、Ｓ．＆ＷＤＭｎｓ豆类炭痘菌把妒／ｃ／ｚＭｚｗ的／ｎｃ。献ｍｃｈｗｅｉｎ）Ａｎｄｒｕｓ．．ｏｏｒｅ和胶抱（’Ｃｏ／／ｅ化奶ｃ／Ｐ？Ｐ．＆．。炭擅菌ｉｗｍｅｎ之ｅｎｚＳａｃｃ各（）６５ 广巧大学项古学位论文广西田女其苗性病巧的巧原、发生规棟及防冷巧究３．６广西田七种子带菌检测３瓜１田＾：郝子外部带菌检测结果对四个田毛种子样品进行外部带菌检测，检测到田屯种子外部携带的真菌种类有’加Ｃｏ／沁ＷｎｃＡｗｗｓ／似Ｔｗｒ．ｆｗｍ．炭痘菌属（ｐｐ．）、链格抱属（？／ｉ／ｆｌｓｐｐ）、青霉属（化／？山ｓｐｐ）、）根霉属（Ｗｚｂｏｗｓ）、ｒｓ、）、曲霉ｐｐｐ．毛霉属（Ｍｗｃｏｐｐ．雜刀菌属（Ｆｍｓｗ山ｍｓｐｐ．属＇（乂巧ｅｒ奶／ｗｓｐｐ．）和枝拖属（Ｃ／ａｄｏ巧）〇／７函ｓｐｐ．），优势菌群为青霉属（化ｎ妃侃側—ｓｐｐ．）、嫌刀菌属（仇ｓａｎｗｎｓｐｐ．）和曲霉属（心咕／／ｗｓｐｐ．），其中镶刀菌属所占比一例最大，四，。结果表明个田屯样品种子外部携带的真菌种类存在定差异仅在文山样中分离出枝抱和链格抱，且分离比例较小，。另外带病斑种子与正常种子所携带的真菌种类相似，，带病斑种子带菌率高于正常种子２号样品中，但带菌率略有不同。在不论带病斑种子或正常种子，均发现携带有炭痘菌。所检测的四个样品中，１号样品所携带的真菌种类及数量较多。３．６．２田韦种子巧部带苗检测结果从各样品种子内部所携带的真菌分离比例来看，种子内部所携带的真菌种类有炭痘菌、青霉、根霉、毛霉、谦刀菌、曲霉和枝抱，优势菌群为嫌刀菌属和青霉属。表３－－１０、３１１的结果表明，不同样品的种子其内部所带真菌的种类差异明显，且各样品种子内部所携带的真菌种类也与外部带菌存在一定差异。所有样品种子内部均携带青，鎌刀菌属真菌的携带比例也较高霉属真菌。所有样品带病斑种子带菌率均高于正常种子，１号样品所携带的真菌种类相对较多。在２号样品的带病斑的种子上，仍分离到炭痘菌。田七种壳的带菌率比种仁多，但种壳与种仁所携带的优势菌群和劣势菌群的种类相近。各样品带病斑种子的带菌率高于正常种子。６６ ：？？３￡ｄ；：ｄｗｗ｛忠｝陋£ｕ５６巧枢／巧ｏ。０ｗ，區巧妄１Ｉ６ＳＩＩＩ控一０片张呈０》／＾０挺３＼产，誘泰ｍｄ却Ｓ如？０Ｐ泛叫一若。醒ｓ３，。巧ｓ９》、ＳＩＩＩ嗦茫客ＳＩＩＩＩ节提抵芝卷密粗巧中一巧黎？起〇泛０担ｓ峻ｚ巧．寸￡ＺＬＯＪ暖桓％ｉ５９９￡￡ＺＺＳ０ｏ／，‘？遊Ｉ．娜９９ＺＬ０砖ｎＷ号１兰２曰＾１其ＺＺ／Ｕ０維ＱＩ恤．５０木ｙｇ＾驾占ｏＭ爸：田｜一＾ｃ寬．ｌ０。ｙＣ拉ｃ０。Ｕｕ礎：内＾Ｕ噪ｉ０－晏Ｂ％ｖｄｏ巨Ｊ／ｐ｛ｄ－ｐ陋ｄＬ６Ｉｓ９￡６＾ｗ也ｓ３ＷｓＺ￡？ｓｍ、’０ｓ’鄭０Ｉｗ当。三９Ｌｓ三６私一Ｊ云１Ｉ０姬Ｏ／＾１。極Ｖ叫一＝占ｃ：ｏ宙一余朱．ｎ鸣Ｕ战ｊｏ展。ｅ秦巧ｊ＾踩－０ｏｄ。山絲ｓｄ是达ｓＵｇＺ９０内ｕ巧一是ｎ極框ＷＳ￡萬Ｓ萬￡Ｚ’？，Ｗｓ一ｊＳ＇秦三＇Ｉ９Ｔ９Ｔ础Ｓ１运ＲＺ８复９Ｓ策《Ｉ３ＩＳＳＯ怒—臣溃ＳｗＳ？ＪＪＵＩ極ＪＺ｛ｏ聲＾Ｘｐ，ｃｅＪｓ姆Ｊ§ｄＷｓＬ兩内ｕ．９取？Ｕｌ０ｄ－ｄ餐帶Ｐｓｄ：０Ｕ醒寸￡６０婚ｗ乙２￡９二０＾／Ｕ０帯／？’０／Ｗ触９￡—一２二６中巧梦三Ｉ１台。泰叫坦ａＯｃ．／丧＾Ｉ０，ｓ一Ｊ中Ｕｙｔ需ｏＯ己』起＾Ｐ苗Ｏ．Ｊ的ＩｑＯ．噪巧－ｄｄ）旧ｏ疗９ｓ０掉山巧暇Ｚ巨Ｊ９二ｌ￡０ｓＺ，？叫田０８／ｄ触赛Ｚ９１ＩＩ．＾。二１ｌ１《－巧摩遣唉巧ｅ进》Ｏ东Ｕ巧＂Ｗ龄｛。歷８？０一占泛：一ｐｓ二ｅｓ０－１麼ｓＡｅＣ１ｗ／９００、０１１Ｉ窝ＯＩＩｗ９Ｉ＾；Ａ１ｓ杂山ｗｕ担？ｏ名ｐ一ａ口ｓｕ０ｗＧ－１ｄ１ｅＷｓ一＇己分ｆ＾０Ｉ１—％１占Ｊｍ３＾／Ｏ％００９０００Ａ．ｚ？一／一ＭＷｌ０００００９９ｕ骄里ｓ３，‘含‘？‘‘粗舌ｆ００９９山極田ｐＣｑ＞Ｉ９？９等Ｓ￡巧１占ｉｙ畔：ｗ樂一ｉ＾ｊ雨Ｋ富内ＷＳＷＳ怒ＭＰＷＰＷＰｗＰ３ｌ副ＰＰＰ３＞Ｕ讀ＸＳＳ３３３３３３｜ｌ扫是忘Ｓ是忘Ｓ是是？最起３９Ｕ３一ｇｗ三載ＳＳＳ百石寻ｅ一ｐ度班度】報度Ｊ麵炭】雖邦１１中３ｓ１０挡Ｏ０世ｕ巧３摆ｄ马１据目驅Ｃ甘￡繫。ｕ０书焉１３ｗｗ０岩０Ｗ０的〇Ｒ占坛艺３玄ＭＳ—巧，，己郵Ｉ０Ｘ恥ｓＳ＂岩ｑ０一－的八＾：巧ｕ１一包ｉｍ０３狸ｗｕ每玄一 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ｄ每ｄｓ安ｕ醒ｍ巧極ｌｐ兵．担ｕ１ＩＩＩＩＩＩ￡裝ｆ》张ｓ担会Ｏ契Ｕ却ｄ（ｄ，ｌ万ｓｉｓｕ０ｒ嗎８０ｉＡ日０英０ｒｎＫ９－ｚ马裝二哗三Ｓｚ１Ｔ９适征二１台Ｉｚ３台否）。Ｓｗ曲Ｐ苗０框３Ｓ结粗％／１ｄＷ爸３ｄ１１ｉ０￡０Ｗｆｓ寸妄．＆Ｉ５半另运‘？１窃／Ｔ：Ｉｍ．Ｘｎ宙晏Ｓ薄Ｉ３封ｓ恆迫Ｏｘｘ－ＣｉｒｂＺ極：。／ｖ００／ｐ？余１晏／ｓ口ｓｄ展迫一ｄｓ０陋祀０Ｚ０Ｃ公々．Ｕ９０钱朱極§巧？Ｏ７為．三Ｉ９｛ＵＲＩ是Ｊ氏泛＾９冷封咚Ｏ§５岩端ｄ境■極ｏ二受３是包视１洒巧１３运另柿１Ｓ０ｄ祗＾ＩＳｄ１ｓ１｜ｐ＾ｕ陋挂８０ｉ６０繫二０某３５１巧’ｒ，／．１Ｗ触Ｓ受１寸７（１内窃ｓＩ芒二一￥公坦／３Ｕａ－３巧ｄ義最＾ｗス）沒蒂冶．ｄ１１ｄ它０ｓ／０１￡０｝嗎Ｓ．７／０寸０和石７／，０她０５１１—１＆￡台１３白£裝２是１？０＾§技田巧进１召ｄ１ｄ－０ｓ￡８一Ｓ０Ｍ０恥巧Ｏ密ＩＩ１ＩＩＩ養赵封封這一３廷５；二／％ｉ％／ｏ￡６０－Ｌ｜—／１巧０９９价？公或巧苗．’，’．￡９９０９田ｕ０極寸９Ｚ等￡等ＺＩ另立蒂－巧Ｋ１ＳＳＷＷ舍ＰＰＷＰｐＷＷ為ＰＵ巧Ｐ３剧Ｏ－３岂－９Ｓ３３扫是長爱志－是Ｓ是＿長Ｓ是長ＳＯ３３３—一一「一縣ＷＨＷＭ＾郵度】麵留致一麵０密：雖玻牺ｅ中００Ｕ，０ｕｓｕＨ｛、１提＆Ｉｓ昭肯Ｕ搔甘ｕ据ａ世ｕ书！是＾的ｏ於Ｏ方ｏｗｏ厚之Ｚｚ之补Ｊ＾恥皂３ｑ墙－八八々归養匙ＷｉＵ 生规带及巧‘广西大単项古単位论文广西田亡真苗化病＃的巧原：台、发研巧３点３田柳子带苗致病性测定由上述对田Ａ种子外部和内部的带菌检测结果不难看出，田七种子携带的真菌优势菌群中有嫌抱霉属真菌，而从２号样品中检测到了炭痕菌属真菌，从１号样品中也，检测到了链格抱属真菌：而嫌抱属真菌可引起田屯根腐病炭痘菌属可引起田尤炭痘病，链格抱属可引起田七黑斑病，但田走根腐病、炭痘病和黑斑病是否是由种子带菌引起，还需要进行更深层次的研究加Ｗ验证。在本研巧中，作者对从种子带菌检测中分离得到的链格抱、嫌刀菌和炭痘菌进行了致病性测定。，采用活体接种的方法进行致病性测定对于链格袍和炭痘菌。测定结果显示，从１号样品外部分离得到的链格抱菌无论是刺伤接种或无伤接种均不发病，为非致病菌。从２号样品中分离得到的炭痘病菌仅在刺伤条件下部分发病，发病率仅１０％，经形态学及ＩＴＳ序列分析鉴定属于果生炭痘菌（Ｃｏ／／如９化妃〇／口）。对于样品中分离到的谦刀菌，采用离体接种的方式进行致病性测定。测定结果显，１４示号和号样品中分离到的嫌刀菌无论是刺伤接种或无伤接种均不发病，为非致病菌。２号和３号样品中分离到的嫌刀菌接种后，刺伤接种发病，无伤接种不发病，为条件致病菌。２号样品菌株刺伤接种后第二天发病率３０％，接种第Ｈ天发病率７０％，９０００％接种第四天发病率％，接种第五天发病率达１，对照组不发病。３号样品菌株刺伤接种后第二天发病率５０％，接种第四天发病率达１００％，对照组不发病。３．７田＾：：真菌性病害药剂防治试验结果３．７．１田韦圆巧病药剂防治试验由于目前在生产上发生最为严重的主要病害为黑斑病、圆斑病和根腐病，黑斑病一，进而导致发病区域植株大片死亡和圆斑病均可导致田七植株叶片死ｔ；根腐病旦植株发病则是不可逆转的绝症，植株患病后需即刻拔除，。在当年实验进行时找到发病较为均匀的试验地为圆斑病，因此本次研巧中田间药剂防治实验针对圆斑病进行。３－由表１２可知，本次选用做田间药剂防治的几种药防治效果都在６０％Ｗ上。其１６中丙环性，８０．８４％、８３．４２％、味鲜胺及Ａ防治效果相对较好相对防治效果分别达８０一和．２９％。其１６作为种生物菌剂，中Ａ其田间防效与化学农药制剂相当，对田七圆斑病病有较好的防治效果＂＂，符合绿色植保的理念，相信在未来的田屯圆斑病防治工作中将大有作为。７０ 广西大単硕古単化论文广苗田七真苗性病存的病原、发生规常及防巧巧双３－表１２几种杀菌剂对田屯圆斑病的防治效果Ｔａｂ－ｌｅ３１２ＣｏｎｔｒｏｌｒｅｓｕｌｔｓｏｆｓｅｖｅｒａｌｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓｏｎＰａｎａｘｎｏｔｏｉｎｓｅｎｇｒｏｕｎｄｓｏｔｇｐ病情指数病情指数細名称獅倍数猶帅］防滅果（％）平雌±１长率（％）ＤｉｌｕｔｉｏｎＩｎｖｅ巧ｉａｔｉｏ打ｇＦｕｎｇｉｃｉｄｅｓＣｏｎｔｒｏｌｅ瓶ｃｔＡｖｅｒａｇｅｏｆＤｉｓｅａｓｅｉｎｄｅｘ加〇ｄｍｅｄｉｓｅａｓｅｉｎｄｅｘｒｏｗｔｈｒａｔｅｇ施药前ｎ＇６８±１．９４１．５％多抗霉素３００６４．巧±２．９１６８．５８±２．６化Ｂ１．５％Ｐｏｌｙｏｘｉｎ施药后４９．７８±２．０１〇施药前１７．６１±１．８８２５／〇丙环性２０００２０．５３±５．４３８０．８４±０．９５Ａ：ａ２５％Ｐｒｏｐｉｃｏｎａｚｏｌｅ施药后４０．９７±３．５５４〇施药前１６．７９±１．１４５／〇眯鲜胺１５００３５．１２止４．６７８３．４２±０．５４ａＡ４５％Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ施药后３８．１３口．８１２５１狂２．５８０％代森铺锋施药前．８１２００８０．００±５．３７６１．１９±２．６６ｃＣ８０％Ｍａｎｃｏｚｅｂ施药后５８．１６±２．７５２０．７９±２．２２７０％甲基硫菌灵施药前口５０６２．８．７９±６７７０．０虹１．２６祀７０％孔－ｉｏｐｈａｎａｔｅ如．９０巧．５１ｍｅｔｈｌ施药后ｙ２２６±３．７６施药前．９Ａ１６６０４０．９６±３．６０８０．２９±１．１０ａＡ施药后４５．１５＊３．５６施药前１９．８６±１．４９清水对照—２—１１．５４±２７．７３度最戸一次沁ＣＬｈｎｅｅｋＫ始；Ｔｉ调查时注：同列数据后标注不同的小写字母表示存在显著差异（Ｐ＜〇．０５），标注不同大写字母表示差异Ｐ＜－－－－极显著（０．０１）。表３１３、表３１４、表３１５和表３１６同。Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｂｅｈｉ打ｄｔｈｅｄａｔａｉ打ｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎＳｔａｎｄｆｏｒｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅ打ｃｅＰ＜００５ａ打ｄｄｉｆｆｅｒｅ打ｔｍａｕｓｃｕｌｅｓｓｔａｎｄｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｅｘｅｍｅｌｓｉｎｉｆｉｃａｎ（．）ｔｒｔ，ｊｙｇ－ａｓ—－－＜０．Ｓｉｎｌｅ３１３３１５ａｎｄ３化．０１）ａｍｅｔａｂ３１４１６．，，７１ 广西大単项女単位论义广西田－ｆｃ？真苗性巧＊的巧化、发生规体及巧绝巧巧３．７．２杀苗剂对种子的消毒处理效果根据种子带菌检测情况，选择１号和２号样品进行种子消毒效果实验。３．７．２．１拌种处理３－表１３的结果表明，福美双和恶霉灵对田屯种子的消毒效果较好，对１号样品的消毒效果可达９０％Ｗ上；而甲基硫菌灵、多菌灵和代森猛巧对田韦种子的消毒效果较差。表３－１３药剂拌种处理对种子的消毒效果Ｔ－ａｂｌｅ３１３Ｔｈｅｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｆ扣ｎｉｃｉｄｅｓｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｎｇｓｅｅｄｄｒｅｓｓｇ样品号样品号Ｓａｍｌｅｎｕｍｂｅｒｐ药种比药剂名称．１２。ｆ民加ｏ０１Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓｆｕｎｇｉｃｉｄｅ带解／％带齡／％消毒效果／％猶效果／％化ｓｅｅｄＲａｔｅｏｆＲａｔｅｏｆＤｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎＤｉｓｉｎ耗ｃｔｉｏｎｓｅｅｄｓｗｉｔｈｓｅｅｄｓｗｉｔｈｏｏｅ能ｃｔ／／ｏｅｆｅｃｔ／／ｉｆ／ｆｉｍｇｉ％ｕｎｇｉ／％７０％甲基硫菌灵１：３如５０．００４６．４３±０．００ｂＢ９３．３３１６．６７主３．３３ｃＣＴｈ－ｍｅ７０％ｉｏｈａｎａｔｅｔｈｐｙｌ５０％多菌灵１：２００６３．３３３２．１４±３．５７ｃＢＣ９０．００ｌＯ．ＯＯｉＯ．ＯＯｃＣ〇５０／〇Ｃａｒｂｅ打ｄａｚｉｍ９９％恶霉灵１：２５０３．３３９６－４３±３．５７ａＡ３０．００７０．００±５．７７ａＡ９９％Ｈｙｍｅｘａｚｏｌ５０％福美双１：２００６．６７９２．％±３．５７ａＡ２３．３３７５．００±２．８９ａＡ５０％Ｔｈｉｒａｍ８０％代森濡鲜１：２５０７６．６７１７．８社３．９３ｄＣ６６．６７３３．巧±３．３３ｂＢ８０％Ｍａｎｃｏｚｅｂ—９３——对照（ＣＫ）．３３１００．００７２ ？－其苗化病宙的病化广西大学巧古単位论义广西田ｆｃ、发生规部及巧巧巧巧３．７．２．２浸种处理３－４和３－表１１５的结果表明，福美双和眯鲜胺对田走种子的消毒效果较好，甲基硫菌灵、多菌灵和代森猛鲜对田尤种子的消毒效果较差。浸种１化和２４ｈ杀菌剂的消－，因此浸种选择１２ｈ即可３１３，毒效果相差不大。结合表还可看出福美双与恶霉灵采用拌种消毒比浸种消毒效果好。３－表１４药剂浸种（１２ｈ）处理对种子的消毒效果Ｔ－ａｂｌｅ３１４Ｔｈｅ出ｓｉｎ耗ｃｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｆｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇ（１２ｈ）样品号Ｓａｍｌｅ打ｕｍｂ灯ｐ药剂名称浸种浓度１２＇Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ＾胃％’。。记省？。獅效果麟效果／％Ｒａｔｅｏｆ民ａ化ｏｆＤ巧ｉｎｆｅｃｔｉｏｎＤｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓｅｅｄｓｗｉｔｈｓｅｅｄｓｗｉｔｈｅｆｆｅｃｔ／％ｅｆｆｅｃｔ／％，ｆｕｎｇｉ／％ｆｔｉｎｇｉ／％７０％甲基硫菌灵１：４００７０．００２２．２２±０．００ｃＣ７６．６７１７．％±３．５７ｃＣＴｈａｎａ－ｔ７０％ｉｏｐｈｔｅｍｅｈｙｌ５０％多菌灵１：１２５７３．３３２４．４４±４．４４ｃＣ８６．６７１１．４社１．４３ｃＣ５０％Ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ９９％恶霉灵１：８０００４３．３３５７．４１±４．９０ｂＢ６０．００％．４９±４．０３ｂＢ９９％Ｈｙｍｅｘａｚｏｌ５０％福美双１００３．３３８５．８ｉｈ３．７ａ３０．００６７：５１１１Ａ．８６主６．１９ａＡ５０％Ｔｈｉｒａｍ８０％代森儘巧１０６３．３３２５．９２±３０Ｃ巧．３３１２：５０．７ｃ．８５±１．４３ｃＣ８０％Ｍａｎｃｏｚｅｂ４５％咪鲜胺３．３３９６．３００．００７８１：１０００±３．７０ａＡ２．５７±６．１９ａＡ４５％Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ—９０——对照（ＣＫ）．００９３．３３７３ 广西大掌硕古单位论文广西田古其前性病存的病原发生规棟及巧径巧免、－表３１５药剂浸种（２４ｈ）处理对种子的消毒效果－ｈＴａｂｌｅ３１５Ｔｅｄｉｓｉ打ｆｅｃｔｉｏ打ｅｆｅｃｔｏｆｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ０打化ｅａｔｍｅ打ｔｏｆｓｅｅｄｓｏａｋｉ打ｇ２４ｈ）（样品号Ｓａｍｐｌｅｎｕｍｂｅｒ药剂名称浸种浓度１２ＳｅｅｄｓｏａｋｉｎｇＦｕｎｇｉｃｉｄｅｓ带解化＝ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ姑毒效果／％姑毒效果／％ＲａｔｅｏｆＲａｔｅｏｆＤ．ｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎＤｉｓｉｎｔｉｏｎｉｆｅｃｓｅｅｄｓｉｔｗｉｔｈｓｅｅｄｓｗｈ？＿ｏｅｆｅｃｔ／％ｅ祗ｃｔ／／）ｆｕｎｇｉ／％ｆｔｉｎｇｉ／％７０％甲基硫菌灵１：４００７３．３３２４．４３±４．４４ｃＣ９０．００ｌＯ．ＯＯｉＯ．ＯＯｄＤ７０ｈ－％Ｔｉｏｐｈａｎａｔｅｍｅｔｈｙｌ５０％多菌灵．００ＯＯ±０．ＯＯｃ８６６．６７３．３３ｄＤ１：１２５７０３．０Ｃ．６７１￡５０％Ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ９９％恶霉灵１８０００４０．００５８．±１．４８ｂＢ４６．６．３３±６．６７Ｃ：５２７５３ｃ９９％Ｈｍｅｘａｚｏｌｙ〇双５０／〇福美００２３．３３８６．４３±８．７８ａＡ２３．３３９２．８６±３．５７ａＡ１：５５０％Ｔｈｉｒａｍ８０％代森猛锋１：５００６３．３３３７７８±６１９ｃＢ０００１７．０４±２．９６ｄＤ．．Ｃ８．８０％Ｍａｎｃｏｚｅｂ４５％咪鲜胺１：１０００３．３３９６．６７±３．３３ａＡ２６．６７７３．３３±３．３３ｂＢ４５％Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ———对照（ＣＫ）１００．００１００．００３．７２３．．田间种子消毒处理防治试验根据室内药剂处理种子的试验结果，选择福美双、恶霉灵及巧鲜胺进行田间药剂一－处理试验。表３１６的结果表明，用药剂对种子进行处理对田毛苗期的病害有定的抑制效果。眯鲜胺对田七种子的影响最小，且防病效果好。从结果中还可Ｗ看出福美双、恶霉灵及咪鲜胺兰种药剂浸种后种子的出苗率相差不大，但经药剂处理后种子的出苗率还是有一定减少。浸种对田屯种子的影响相对于拌种要小，尤其是田毛种子经福美双拌种后出苗显著减少，在使用福美双对田韦种子进行处理时采用浸种的方法较７４ 广西大单硕古学位论文广西旧－ｅ真苗化病巧的巧化发生规巧及防巧巧突、好；恶霉灵拌种和浸种两种处理方式对田古种子的影响相差不大。－表３１６种子消毒处理田间防治效果ａｂ－Ｔｌｅ３１６Ｔｈｅｃｏｎ社〇１ｒｅｓｕｌ化ｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｅｅｄ出ｓｉｎｆｅｃｔｉｏ打ｉｎ化ｅｆｉｅｌｄ出苗率（％）发病株数（株）发病率（％）〇处理防治效果（／〇）ＥｍｅｒｇｅｎｃｅＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＤｉｓｅａｓｅＴｒｅａｔｍｅｎｔＣｏｎｔｒｏｌｅｆｆｅｃｔｒａｅｒｎｔｄｉｓｅａ化ｄｐｌａＵｓｉｃｉｄｅｎｃｅ５０％福美双浸种１２ｈ４３８ａ４０．３３７４．２２巧．１３±．５０％Ｔｈｉｒａｍｓｏａｋｉｎｇ１２ｈ５０％福美双拌种巧．９３±４．０４ｂ１０．２５８０．４７５０％Ｔｈｉｒａｍｄｒｅｓｓｉｎｇ９９％恶霉灵浸种１２ｈ７４．２０±３．７２ａｂ５０．３９６９．５３〇Ｈ９９／〇ｍｅｘ犯ｏｌｓｏａｋｉｎ１２ｈｙｇ９９％恶霉灵拌种７２．６０±３．９７ａｂ３０．２７７８．９１９９ｍｅｘａｚｏｌｒｅｓｓｉｎ％Ｈｙｄｇ４５％眯鲜胺浸种１２ｈ７５５３±７．６１ａｂ３０．２２８２１．．８４５％Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚｓｏａｋｉｎｇ１２ｈ清水对照７—１．４７±２９５ａｂ８１．２８．１Ｃｈｅｃｋ７５ 广巧大单硕女単泣论文广巧田女真苗健病誓巧巧康、台巧免、乂生规巧及巧：４结论与讨论４．１结论４丄１田屯真茵性病害种类及发生与危害情况２０４？２０８１１５年间，对广西百色市乐业、靖西、德保等个县的田屯种植区进行田七病害普查，调查共发现田毛真菌性病害７种，分别为黑斑病、圆斑病、根腐病、炭痘病，，、白粉病、灰霉病和疫病。目前圆斑病在广西田毛上发生己较为普遍上升为主要病害，这也是首次报道广西发生田毛圆斑病；黑斑病、根腐病仍然是田屯生产上发生的主要病害。４丄２田＊主要真苗輸害的；＾规律在百色市，田七黑斑病与圆斑病的发生表现为高海拔地区比低海拔地区发病重；，根腐病发病率降低根腐病的发生则表现为随着海拔离度升高。普通网棚叶部病害的发病率及病情指数均比其他各类型的避雨棚高，说明避雨栽培对田韦叶部病害的发生有明显的抑制作用。，使用生物菌剂宁盾的试验区病害的发生率与使用常规农药的试验区差异不大，一＂＂，理念说明生物菌剂宁盾对田屯病害有定的防治效果符合绿色植保。田毛病害发生与田屯屯龄的关系表现为：随着田尤尤龄的増长，田走叶部病害的一二发病率降低，；兰年。田七处于较为幼嫩的年生和年生植株时病害发生较为严重生植株，病害发生相对较轻。４．１．３田屯圆斑病病寄消长规律￣综合各个试验组病情指数规律可知，田尤圆斑病病害发病高峰在６７月，６月前￣，６７，随病害发展，病情指数逐渐上升在７月病情发展最为迅速：月后病情指数上，，升趋势逐渐减缓。此外从调查结果还可看出全程不打开玻璃罩的对照组，每月观察其中的田屯植株均长势良好，无病害发生，说明有机玻璃罩可Ｗ有效阻断病原菌的，也间接证明了田七圆斑病通过气流和雨水进行传播侵染。４丄４广西田毛主要真菌性病害病原鉴定综合待试菌株的致病性测定情况、培养性状、其分生抱子等的形态特征，及基于Ｓ－ＩＴ序列和ＴＥＦｌａ序列的系统发育树分析，首次确定引起广西田七根腐病的病原菌＇为风■ｓａｎｗｍｒａ／ｒａ化Ｗ和仇■ｙａＷＭＷｍｅｗ巧ａｆｗｗ，属于真菌界（Ｆｕｎｉ），子囊菌口ｐ诉ｇ（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），子囊菌纲（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ），肉座菌７６ －ｔ真苗性病宙的病原生规巧及巧广西大学硕古単化论文广西田、乂；备研突亚纲（Ｈｙｐｏｃｒｅｏｍｙｃｅｔｉｄａｅ），肉座菌目（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ），丛赤壳科（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ），嫌’／）。刀菌属（仍／Ｍｎｉｗ根据待试菌株的培养性状及其分生抱子等的形态特征，鉴定本硏究中所分离得到的田古黑斑病的病原同前人所报道的人参链格抱（如属于真菌界（Ｆｕｎｇｉ），子囊菌口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），座囊菌纲（Ｄｏ也ｉｄｅｏｍｃｅｔｅｓ）跑菌亚纲（Ｐｌｅｏｏｍｃｅｔｉｄａｅ），ｏｌ）ｙ，格巧ｒｏｙ格抱腔菌目（Ｐｌｅｏｓｐｒａｅｓ，格抱腔菌科（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ），链格抱属加幻）。根据该病原菌镜检到的形态特征，鉴定引起广西田七圆斑病的病原菌同前人所报道的械菌刺袍［Ａ斬於Ｍ；７〇ｒａｏｃｅＷｗａ（Ｈａｒｔｉｇ）Ｄｅｉｇｈｔｏｎ］，属于真菌界（Ｆｕｎｇｉ），子囊菌口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），蟲菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），座囊菌纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ），座囊菌亚纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｉｄａｅ），煤食目（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ），小球壳科（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ），中央跑子菌属（）。ＩＴＳＡＣＴ、ＣＨＳ、ＧＡＰＤＨ和ＴＵＢ２五首次通过、个基因联合建树综合分析得出，供试的１７株田屯炭痘病病原菌株共分为四个种群：果生炭痕菌ＣＷｆｃ化的ｃＡｗｗ’ｈ／ｃ此〇／幻Ｐｒｉｈａ巧．Ｌ．Ｃａｉ足Ｋ．Ｄ．Ｈｄｅ、异形炭痘菌Ｃｏ／／ｅ化／ｎｃ／ｉＭｗＢ．Ｓ．Ｗｅｉｒ＆ｙ，ｙＲＲ．Ｊｏｈｎｓｔ、豆类炭痘菌／ｒｗｗｃ幻化ｍＳｃｈｗｅｉｎ．Ａｎｄｒｕｓ＆Ｗ．Ｄ．Ｍｏｏｒｅ和（）ｃ／Ｐ．Ｐ．＆．，ｉ胶抱炭擅菌Ｃｏ瓜化的ｚｗｗ姑ｓｅｎｚｅｎｚＳａｃｃ属于真菌界（Ｆｕｎｇ），（）子囊茜口（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），盘菌亚口（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ），粪壳菌纲（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ），肉座菌亚钢（Ｈｙｏｃｒｅｏｍｃｅｔｉｄａｅ），小丛壳目（Ｇｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ），ｐｙｌ小丛壳科’（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）炭痕菌属（仿／／如０的ｃＡｗｍ）。４．１．５田屯种子带菌检測对四个田七种子样品进行带菌检测，结果表明，田尤种子外部携带的真菌优势菌）（戶ｓ．心？）群为鎌刀菌属ｓｐｐ．、青霉属ｐｐ）和曲霉属（／£巧７７／ｗｓｐｐ．，其中鎌刀茜属所占比例最大；田尤种子内部所携带的优势菌群为嫌刀菌属和青霉属，劣势菌群为枝抱属、根霉属和曲霉属。对从种子带茜检测中分离得到的链格抱、嫌刀菌和炭痘菌进行了致病性测定，其中炭痘菌在刺伤条件下致病，发病率仅０％，１经形态学及ＩＴＳ序列分析鉴定属于果生炭痘菌（ＣＷ／ｃ化护献７０／ｇ），；部分鎌刀菌菌株为根部条件致病菌链恪袍和其余真菌为非致病茜。１１ 广西大単硕古单位论文广西田－ｔｊ＊？苗性病害的巧巧、发生规帝及巧巧巧巧４．１．６田４：主要真苗性病害的防治研巧对广西田屯主要真菌性病害的防治研究主要包括田间药剂防治试验、药剂处理种子对病害的防治试验、避雨栽培与畦面滴灌相结合防治病害的效果Ｗ及错层荫棚对病害的抑制作用的研究几个部分。４丄６．１田间药剂防治试验本次研究中针对圆斑病进行的田间药剂防治实验结果表明，所选几种药剂对田七圆斑病均有一６定的防治效果，Ｗ丙环哇、咪鲜胺和Ａ１防治效果最佳。Ａ１６为从山豆根上分离到的内生细菌制成的生物菌剂（由广西大学农学院药用植物研巧课题小组研究制备），在绿色植保的大方向下有较好的应用前景。４丄６．２药剂处理种子对病害的防治试验选取六种药剂对田七种子进行了浸种１２ｈ、浸种２４ｈＷ及拌种处理。研究结果表明，福美双和咪鲜胺对田韦种子的消毒效果较好。浸种１化和２化杀菌剂的消毒效果，因此浸种选择口ｈ即可，、相差不大。根据室内药剂处理种子的试验结果选择福美双恶霉灵及咪鲜胺进行田间药剂处理试验，结果表明，咪鲜胺对田屯种子的影响最小，且防病效果最好，因此在使用福美双对田尤。田屯种子经福美双拌种后出苗显著减少种子进行处理时采用浸种的方法较好。４丄６．３避雨栽培与哇面滴灌相结合防治病害的效果レッ及错层荫棚对病害的抑制作用在前期及前人的研究中我们不难发现，田七本身独特的生存环境需求己使其局限于及其狭窄的地域范围内进行种植，而规模化的种植又常常导致病害发生。广西是田一大区域屯种植，其低海拔所形成的多雨高媪的气候特点恰恰有利于病害发生。因此本研究在靖西武平和德保足荣的两个试验基地分别搭设了传统荫棚、通风荫棚及避雨荫棚等类型的田屯棚用Ｗ研究避雨栽培及通风环境对病害的抑制作用。研究结果显示，避雨栽培可Ｗ大大减少棚内病害的发病率，而园内采用错层搭棚的办法増加园肉通风可Ｗ降低棚内温度并带走多余水汽。４２．讨论４．２．１田＾：真菌性病害的姓与发展在对广西田Ｈ，：：主产区进行的普查中发现广西田走上发生的主要病害与云南Ｈ屯，１９８０００２的主要病害有相似之处（王淑琴等；刘云龙等，２），这可能与近年来百色＂＂实施田屯回家王程，从云南文山州大量调进种子和幼苗有关。７８ ？广西大単硕古単位－生病者的病原发生规带及仑文广巧田ｅ其苗１ｐ方台研巧ｉ、，田＾：在本次调查中得出圆斑病与黑斑病等叶部病害随海拔升高：病害发病率增加；根腐病随海拔升高发病率降低的结论。这与云南研巧者王勇（２００３）Ｗ及陈畳君等（２００１，２００３）所报道的田七圆斑病、黑斑病和根腐病的发生情况与海拔的关系时一所得出的结论是致的，云南研究者对田病害与海拔。但由于云南的实际种植情况的关系的探讨多在１０００米Ｗ上，海拔跨度较小；而本研究针对广西田七病害与海拔的关系的探讨从２００米的低海拔到１０００米ｌｉＡ上的高海拔均进行了调查。对于田屯低，本研巧进行了实际调查海拔种植的病害发生情况。在今后对广西田毛病害的研究工，探索田七的低海拔种植经验，也将成为推动广西田七作中，结合广西自身种植特点产业发展的一条有效途径。本研究还对施用生物菌肥、七园遮荫棚类型与田屯病害的关系进行了探讨，调查一定的防治效果一种发现使用生物菌剂宁盾对田韦病害有，但本次只对生物菌剂宁盾菌剂对田七病害的控制效果进行了调查。在今后的研巧工作中，探讨生物菌剂对于田屯病害控制的效果，是发展绿色、生态农业的必由之路。，，是广西田＾田韦病害种类多尤１＾黑斑病、圆斑病和根腐病危害最大；：的主要病害。由病害调查结果可知，几种主要病害的发生与温湿度条件有关，在高温多雨的季，田节，降水丰沛屯病害发病重。为此，在建园前应避免选择地势低法的地方建园，免排水不畅导致田间湿度过高诱发病害。选用健壮饱满的田尤种子并于播种前进行浸种有利于病害防控。设计避雨荫棚，保持园内通风，达到降温除湿的目的，可Ｗ大大降低病害的发生程度。适当增加网棚层数可Ｗ有效解决荫棚透光率过大问题，在増加网棚层数的同时适当增加层间空隙高度可使全园通风透气。４．２．２田毛真苗巧病害的病原鉴定本研究首次将引起广西田屯根腐病的病原鉴定为巧ｗａｒ山Ｗ於ｒａ化ｍ和浙江省卫生局（１％２）将根腐病的主要病原菌鉴定为薦草嫌拖＇．霉ＣＦｗａｒｚｗｎｓｃｚ咕ｆＬａｍｂ＆Ｆａｕｔｒ），阮兴业等（１９８６）报道田走根腐病的病原菌为＇Ｍ王腐皮谦刀菌ｗ／ａｗ（ａｒｔ．）Ｓａｃｃ．］，之后，人参链格抱Ｗｈｅｔｚｅｌ）（９８９）、ｏｏｒｗｍＥ．Ｆｌ淑琴等尖抱鎌刀菌化．Ｓｍ．＆Ｓｗｉｎｅ）和串珠雜抱中间变种，１巧巧ｇｏｎ加ｍｅＶ化扣似７？ｅ况ＭＷＮｅｉｓｈ＆Ｍ．Ｌｅ（王拱辰，１９９１）化ｗ於ｇｇ）等等均有报道为田毛根腐病的病原菌。缪作清等（２００６）报道引起田韦根腐病的病原种类很多，包含Ｃｙｌｒｏｃａｒｏｎｄｅｓｔｒｕｃ化ｎｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｓｏｒｕｍ、Ｐｈｏｍａｈｅｒｂａｍｍｉｎｄｐｙｐ＜等。本研究中鉴定出广西田４＾根腐病的病原有仇说（油／？＾００化７？，且为强致病茜＇巧如；７９ 广西大学硕古単位论义广晒田女共苗化病誓的病化、发生规化及巧巧研免’鉴定出的巧／加机＾朋ｍｃｏｒｗ論／Ｗ为广西田七根腐病的条件致病菌，属首次报道ｍｅ幻ｍａ化Ｗ可引起田尤根腐病。４．２．３旧古炭痘病病原菌多基因分析韦继光等（巧８９）将广西田韦炭痘病的病原菌鉴定为胶抱炭痘菌（Ｃｏ／／£ｆＷｒ／ｃ／ｍｍ诚’Ｐｅｎｚ．）和黑线炭痘菌［Ｃｏ／／ｅ化妍ｃ／ｚｗｗ瓜ｗａ献ｍ（Ｐｅｒｓ．ｅｘＦｒ．）Ｇｒｏｖｅ］，，本研究发现广西田尤炭痕菌的王种形态型并分为四种形态型，其中包含细长型抱子、短粗型抱子和新月型抱子ｅｉｒ２０１２）。通过Ｗ等（提供的胶抱刺盘抱复合群的多基因ｌ鉴定分析方法，本研究采用核糖体转录间隔区序列（ＩｎｔｅｒｎａＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳｐａｃｅｒ，ＩＴＳ）、３－－扣ｂｕ－２－ＴＵＢ２３－微管蛋白基因（ｌｉｎｅｎｅ）、磯酸甘油醒脱氨酶基因｜ｐｇ－－ｈｏｈｄｄ－（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄ巧３ｐｓｐａｔｅｅｈｙｒｏｇｅｎａｓｅｇｅｎｅＧＡＰＤＨ）、几了质合成酶Ａ基因ｈ－－（ｃｉｔｉｎｓｙｎｔｈａｓｅＡｇｅｎｅＣＨＳＩ）、肌动蛋白基因（ＡｃｔｉｎｇｅｎｅＡＣＴ）进行单基因及多基因联合系统发育分析，综合对田走炭痘病菌的形态学鉴定结果，确定广西田走炭痕病病原菌可分为四个种群：果生炭痕菌ＣｏＷｃ化的ｃ／ｍｗｙｈ佔、异形炭痘菌’Ｃｏ／／ｃ化／ｎｃ／ｍｍ、亞类炭擅菌ＣＷ／ｅ化的ｃ／ｉｗｗｆｒｗＭｃａ化／Ｗ和胶袍炭痕菌‘’＇沁仿Ｃｂ／／ｃ化的ｃ／ｚｗｍ各／０£６邸０７細５。在本研究中，通过ＩＴＳ基因无法使／／幻〇扔ｃＡｗｍｗｍｔｏ■Ｗ和仿／／£（０折ｃ／ｚｅｏｙＪｏＷｏ／瓜Ｓ分离出独立分枝，结果与ｅｉｒ等（２０１２）ｇ／‘一认为的Ｃｂ／／ｅ化的如〇？／幻不能通过ＩＴＳ个独立的种的结果相同分离出。而本一研究中ＡＣＴ基因可使Ｃｂ／ｆｃ化的ｃ／ｍｗｙｈ／ｃ舱〇／口分离出单独的个分枝，这与ＷｅｉｒＡＣＴＣ旅的的’’得出的基因不能分离出ｏｃＡｗｗ如ｗｅｆｆｃｏ／ａ，而是与Ｃｏ／／別０仍ｃＡｗ／ｗＺ如〇化ｗｔ一混杂在个大分枝上的结论有差异。ＴＵＢ２基因不能有效分离出Ｃｏ／ｔｏｏｍＷｒｎｒｎ’’Ｃｂ＊和／ｔｏｏ仍ｃＡｗ／ｎｙｈ／ｅｎｅｏ／ａ，这与Ｗｅｉｌ的研究结果也相同。通过５个基因的’。／／／／／／如／多基因联合建树，可将诚ｃｏａ、（ｒ０ｅ的护／ｃＡｗｗ口／ｅｗｗｗ、９矿／ｃｍｍ／ｒｗｎｏｊＴｆｗｗ和Ｃｂ旅化於ｃ／ｍ／ｎ有效分离，由此可知，单基因分析区分能力有限，通过多基因分析往往能得出更为准确的结果。采用多基因系统学分析鉴定真菌将是今后真菌分类学鉴定更为准确的鉴定手段。在过去的田＾＾炭痘病病原的相关研究中，研究者都是采用形态学特征来鉴定田走炭痘病毒病原（韦继光等，１９８９），而目前，分子生物学技术己广泛应用到真菌性病害的病原鉴定中，，。本研究首次利用分子生物学技术并采用多基因联合分析的方法将广西田古炭痘病的病原分为４个种。８０ 广西大単项古単化论文广西田女黑帝性病存的病化、发生规活及防冷研巧４．２．４田蝴子带苗情况ａｅｒｂｅｒｅｔａｌ．．ｌ．从粮食作物（Ｌｇｇ，１９９５；Ｓｃｈａａｄｅｔａｌ，２０１３；Ｔａｙｏｒｅｔａｌ，２００２）到经济作物（Ｓａｌｅｅｍｅｔａｌ．，２０１４；Ｓｈｅｔｔｙｅｔａｌ．，２０１１；Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋｅｔａｌ．，２００２；闭现华等，２０１１），种子带菌检测得到了广泛应用。检测的目的是阻断种传病害的传播。越来越多的研究者开始关注种子消毒处理对防病的积极作用。张成霞（２００４）用福美双、甲基硫菌灵等药剂对草坪草种进行拌种，使得草坪草的出苗率有所提高。吴国平等（２００９）用４０％的福尔马林３００倍稀释液对葫芦种子进行浸种，有效降低了葫芦种传病害的发生且对种子活力无影响（２０１３）。陈畳君等采用温汤浸种的方法对°￣Ｐ口ｎｏｘｗｈｅｔｚ所致的田走种腐病的控制效果进行研究，得出３５４０Ｃ的温水对田七￣种子浸种１５２０分钟，对田４。：种腐病有较好的控制效果从对广西田尤真菌性病害调查的结果不难看出，对种子进行消毒处理是防治田屯一病害的种有效途径。本研巧中所采集的种子分别来自文山州及广西百色市靖西县有圆斑病和炭痘发生的毛园，但从种子带菌检测的情况来看，却基本没有检测到引起黑斑病的链格抱属真菌Ｗ及引起圆斑病的械菌刺袍，而在有炭痘病发生的走园所采集的种子上检测到了炭痘茵，推测这可能与链格抱及械菌刺抱的抱子表面较为干燥，分生抱子不易粘在种子上，，因而不容易检测到带菌率低；而炭痘菌分生袍子表面含有一层胶质物，易粘在种子表面，因而容易检测到。广西在未从云南引进种子时，区内＂田屯并未发生圆斑病，，２００２）田韦回而圆斑病在云南省早已发生（刘云龙等，在＂工程实施一家，从云南大量引进种子之后，目前已成为广西田上大主要病害。因此推测圆斑病的初侵染源可能来自于种子带菌。但从本次的种子带菌检测中未检测出械菌刺抱。分析造成此种结果的原因可能是所采的样本数有限。在所采集的样品中未能检测到种子携带黑斑病和圆斑病的病原，但结合广西地区田走的种植实际，加强种子消毒环节很有必要。在今后的研究中，可通过扩大种子带菌样本的采集区域、采集数量等方法对种子带菌进行更深入的研究。在广西田尤圆斑病的侵染来源及之后的侵染规律等方面的研究将是今后广西田走病害研究的又一课题。４．２．５田相韩Ｉ性病害的防治研究对田尤病害的防治工作，前人在研究中多局限于化学药剂防治及生防菌的研究一中。汪静等（２０１５）、杨建忠等（２０１０）筛选了些对田走根腐病有较好控制效果的药剂，如甲基硫菌灵、多菌灵２０００）、腐霉利等。冯光泉等（的研究结果表明腐霉利、菌绝王对田屯黑斑病的防效高于生产上常用的多抗霉素和代森镑两种杀菌剂。曾莉等８１ 广西大単项古単位论文广西田女其苗化病＊的病原、发带及巧色研巧一（２００３）、陈畳君（２００４）、王勇（２００４）等筛选了些对田七圆斑病控制效果较好的＋药剂，如圆斑净、代森儘巧、福星春雷霉素等。王勇等（２０１３）分析了几种杀菌剂的保苗，、防病效果Ｗ及对田走质量的影响并得出了丙环嗤、爱苗和腊菌嗤Ｈ种推荐在生产上进行推广使用的药剂。在生物防治方面，刘立志等（２００４）筛选了３株对田七根腐病病原菌坏损柱抱菌（。細办（似？如Ｗ旅如括抗作用较好的芽抱杆菌Ｙ－４－７０－－－－、Ｘ５１５和Ｘ５３２。张玉洁等（２０１１，２０１２）对田毛的内生菌进行了分离，筛选到了３株对田尤根腐病的主要病原菌坏损柱抱菌（ＣｃｆｅＷｒａｃｔｏｗ）有很强抑制作用的内生菌。张伟等（２０１３）通过对８种植物的挥发物及浸提液对田走根腐病病原菌的抑制活性的测定，发现大蒜挥发物及浸提液对田尤根腐病菌的抑菌活性最强。陈畳君等（２０口）通过不同药材对田尤黑斑病病原的控制作用研巧发现，泽兰、山蔡所含的物质对田七黑斑病菌的抑制作用较强。王勇等（２０１４）还用７种生物源农药对田走黑斑病进行了田间防效试验，筛选出多抗霉素和宁南霉素作为田韦种植安全生产可施用＂＂的绿色农药。本研巧中对田七真菌性病害的防治研究，除了常规的田间药剂防治试验和药剂处＾理种子对病害的防治试验外＜，还对避雨栽培与畦面滴灌相结合防治病害的效果（＾及错层荫棚对病害的抑制作用进行了研究。传统的田韦种植主要采用搭建田走专用网或普通遮阳网的方式来建造田七园，二。在本次研究的实际调查过程中发现许多农户采用层网搭建七棚，在生产过程中，田毛植株出现生理性日，这往往造成棚内透光率偏大田屯病害的发生。田七根腐病（王朝梁等，１９９８灼的后果。而透光率过大往往有利于；陈呈君等，２００１）、黑斑病（王朝梁等，１Ｗ８；陈畳君等，２００３）、圆斑病（王勇等，２００３），１９８８继光等，１９９０）、疫病（王勇等，２００７）等的发、炭痘病（何振兴等；韦一一生均与荫棚透光率有定关系。在调查中发。通风不畅也是多数屯园面临的大问题现，采用错层的方法搭建荫棚，可Ｗ保证棚内通风要求，在棚内可Ｗ明显感觉到相比其他传统搭建方式的荫棚温度低很多，病害发生少。。在这样的屯棚中植株生长好田韦的几种主要病害大都与水关系密切，当阴雨连绵天气持续时间长时，田屯病害往往发生严重。如何解决田韦种植过程中因田间持水量过大或田间相对湿度过高及长时间降雨带来的田七病害发生严重的问题值得思考。而本研究首次探讨了避雨棚对田毛病害的控制作用。采用避雨棚种植田走打破了Ｗ往的田韦种植常规。但在实际，，通风避雨棚成为又种植过程中发现，避雨棚种植田屯往往导致棚内温度过高因此一大创新，田走病，。在通风避雨棚内害基本不发生结合畦面滴灌直接避免了田毛叶８２ 广西大単硕古学化论文广西田女其苗化病＃巧巧化乂生规体及巧台研巧、一部积水及王壤持水量过大的问题，步降低了田击病害发生的可能性进。采用通风避一雨棚防治田走病害是在田毛病害研究中从无到有的大突破，相信在今后的田屯病害防治工作中将有所作为。８３ 广西大学硕古学位论文广西田女其巧性病巧的病康、发生规巧＆巧绝研免致谢一，，感慨万千走年寒暑易弹指挥间。回望在广西大学这片学术热±生活的七年。走年时间里留下了太多的感动和美好回忆。四年的本科学习阶段我积累了专业方面的知识，为Ｈ年的硕±研究生学习打下了基础。Ｈ年的硕±研巧生生活仿佛白骑过隙般＝匆匆而过，、同学、朋友的帮助。。年来我得到了很多老师首先要感谢我的导师韦继光教授。我的硕：ｔ毕业论文从选题、试验研巧到论文写作，都是在导师韦继光教授的悉如指导下完成的。从２０１３年进入实验室开展课题研，。对于课题研究的进展情况究Ｗ来韦老师给予我了莫大的支持与鼓励，韦老师不厌其烦地指导，；在课题研究遭遇困难和失败的时候韦老师给予我关怀和鼓励。在韦老师的指导与帮助下，我逐渐具备了在研究中独立思考、善于分析、力求严谨等科研素，养，而且学到了矜矜业业、吃苦耐劳、。从韦老师身上我不仅学到了严谨的学术作风一永不懈怠的工作作风，，。Ｓ年时光韦老师始终像位慈爱而又不失严格的父亲教会一，能够跟随韦老师学习实乃人生大幸事我做人、做事的道理。在Ｈ年的硕±学习生＂！涯即将结束么际，我把最诚擎的敬意送给我的导师韦继光教授：韦老师，谢谢您＂Ｈ年来，您辛苦了！，由衷地感谢韦老师在学习和生活上给予我的关也和帮助！其次，我要感谢黎起秦教授、廖咏梅教授、张君成教、吴海燕教授、袁高庆教授授、王忠文教授、彭好文教授、蒙狡荣教授等对我课程学习的悉也教导Ｗ及在开题报告；感、中期考核和进展报告等环节中对我课题研究的指导与帮助谢李界秋老师、熊英老师等在我的课题研究过程中为我提供试验仪器及药品等方面的帮助，在此我致Ｗ、最衷屯的感谢！感谢龙艳艳、柳凤、潘功健、谢红辉、宋利沙、蓝霞、王琳、蔡文娇、张艳明等，汪彼雪师兄师姐、陈潇航、杨平、何琼、莫爱素、黄小贤、贺玉龙等师弟师妹Ｗ及时婷婷、、、、范平民、、李志锋、许雨晨、高淋淋魏昌英、李悦、杜颜宇孙磊张美敬、黄利利等同学对我课题试验的帮助及生活的关屯与照顾！本课题得到了国家自然科学基金和广西科技重大专项计划项目的资助，在此对在我课题实验中付出辛劳的黄荣韶教授、甘凤琼教授Ｗ及在病害调查中予Ｗ大力支持的百色市农业局及各县农业局、植保站等部口的领导和工作人员致Ｗ最诚孽的感谢！最后，我要感谢我的家人，是你。感谢父母在我漫漫求学路上默默的支持和鼓励一！们无怨无悔的付出，给我换来了今天美好的切８４ ■广西大學项古单位论义广西田其荫１生病誓的病尿、乂生规体＆巧；台巧免参考文献一１．１９９０Ｓ１：２７陈树旋．Ｈ七新病害灰霉病植物保护（）［，］艳．２０１３０８等．甘肃省黄巧白粉病病原鉴定及田间药效试验农药（）：口，］陈泰祥，陈秀蓉，王，５９９－６０１Ｐ，等药剂控制Ｈ七圆斑病试验初採中药材，２００４，２７（０３）：１６２］陈县君，刘云化王勇４陈县君王勇冯光泉等．Ｈ尤根腐病发生与生态因子的关系．云南农业科技，２００１（０６）：［，，，］巧－３５５．云南农业科技陈豆君王勇等．冯光泉Ｓ七黑斑病发生与生态因子关系调查初报，［，，，］２００３０１－：３３３４（）６陈畳君王勇．Ｈ七黑斑病病原生物学特性研究．植物病理学报２００５３５［冯光泉，等，，，，］胞）：Ｗ７Ｊ６９＾＂ｗａｍＷｈｅ７畳君七黑斑病病原如似ｔｚ抑制作用，王勇，刘云芝，等不同中药材对＾［］陈２０－１２２５０６：１１８（）６研化文山学院学根，王勇刘云芝，等温汤浸种就４沁ｍ口ｗｈｅｔｚ所致种腐控制研化文山学院阀陈县君，，２０－学报１３（０６）：１３，－９刘丽．三韦和产业概况．当代生态农业２００１（０３）；１１６１２１，，华修国，［褚建君］１０．：１戴芳满．中国真菌汇总北京科学出版化９巧［］方中么植病研究法；１（第；版）．北京中国农业出版化９％［川＝王勇韦黑斑病的防治效果■２０００１２１１２李忠义．腐霉利、菌绝王对人参研究（０）：冯光泉，，［］，，４６－４８１３．：２０１４丹丹．中国苹果炭拒病病原菌的遗传多样性［学位论文］陕西西北农林科技大学［］符，１４官会林．Ｈ走种植止壤微生物类群动态与根腐病的关系．西南农业大，陈豆君，刘±清，等［］２００６２８化５－学学报：７０６７０９（自然科学版）），，－１５何晶．２００４１６（０５：５８６０．王走的药理作用及研究进展天津药学），，［］－１９８８０３：１２１３１６何振兴罗丽飞．Ｈ韦炭痘病的发生及防治．中药材（），，［］９９８１７赖传雅．关于作物病害药剂防治中几种防治效果计算方法的应用问题．广西植保１，［］０３－：３２３４（）一－１８烈．三七的现代研究与进展（）．世界中西医结合杂志２００８（１０）：６１９６２３］李冠，［８５ 广西大単硕古単位化文广西田女真苗性病宙的病原、发生规带及巧游研巧－１９刘刚刘育辰鲍建才等．Ｈ七药理作用的研巧进展．人参研巧２００５（０３）：１２１７［］，，，，口０］刘立志，王启方，张克勤，等．Ｈ击根腐病枯抗菌的筛选及活性产物的初步分离．云南大学学报（自然科学版）２００４２６－３５９（０４）：３５７，，口１刘西莉，李健强朱春雨等．不同水巧品种种子带苗检测及药剂消毒处理效果．中国农业］，，大学学报２００００５０５４２＊４７（）：，，２２刘云龙呈君何永宏．兰走圆斑病的初步研巧．云南农业大学学报２００２１７（０３）：［，陈］，，，２９７－２％２３刘玉萍之杨华伟．从田屯发展情况看广西需要振兴中药产业［．计划与市场探索，黄敬，，］２００２（０４）：１５４刘志勇．大豆种子主要寄藏真菌及其分布［学位论文］．黑龙江：东北农业大学２０１２口，］－２５陆宁．Ｈ屯圆斑病病原菌分生抱子的生物学特性．中药材２００５２８（０９）：９Ｈ［］，，县君．三七．云南农２００５口巧陆宁，陈鲁海菊等圆斑病病原菌生物学特性研究业大学学报，，，，２００２－（）：１９３１９５２７罗文富，喻盛甫贺承福，等．王尤根腐病病原及复合侵染的研究．植物病理学报１９９７［］，，，２７０－（１）：８６９２２８．．２００６％（０７：［缕作清，李世东，刘杏忠，等根腐病病原研究中国农业科学，，）］－１３７１１３７８２ｔｅｄ－刊巧现华ｅｓＰＣ民．２０１１，刘鲁，韩跃晚等Ｎ检测种传番茄细苗性溃瘍病菌西北农业学化，［２０－３（０７）：２８１０齐善属不同药剂对Ｓ走灰霉病菌的抑制效黑江苏农业科学２０１４４２０２９７－９８口］（）；，，＇＇ｉｖｗｍａｖ州ａｅｓｕｓ趴心！成ｂ．Ｃ！（ｒｗ化危害新寄主巧瓜和病菌的快速］任髓也李国裝李挥，集ｐ－检测．西北农业学报２００７１６０２：２１４２１９（），，３２阮兴业，罗文富．云南省谦刀菌属（Ｆｉｔｆｗｆｗｎ）种类鉴定．云南农业大学学报１９８６０１０１：（）［］，，１－１３一３３一一郑晓鹰．．蔬菜２００８（１［］宋顺华干热灭菌处理技术：４１，种防治种传病害的有效方法，的３９９８２１０７－叫王朝染崔秀明：３２８３３０，李忠义黑斑病侵染及发病条件研化中药化１（）［，３５王朝梁崔秀明忠文．Ｈ屯根腐病发生与环境条件关系的研究．中国中药杂志１９９８［］，，李，等，，２３（１２）１０－２：１［３６］王拱辰，陈鸿逵，骆平西．三４：根腐病病原菌分离、接种和药剂试验．植物病理学报，巧９１，２１０２：６６（）８６ 广西大単项古単位论文广西田－ｆｃＡ苗性病＃的病化生规体及巧兑巧免、发３７梁宗锁康冰．文山三屯根腐病病原真菌的鉴定与药剂防治．西北林学院学报］汪静，，，等，［２０１５（０１－：１５８１６３）３８９８９０２７－１０［王淑琴于洪军．根腐病的初步研究．特产研究１（）：，，］３９－王淑琴洪军仙华．１９８０（０４）：８１４］．Ｈ屯黑斑病的防治研究，于，陈特产科学实验，［－４０李建义．１９８〇４；２１１２１８．陕西省炭痕菌的研巧真菌学报Ｗ）王晓鸣，［］，２００３２６０８－（）；５４１５４２Ｗ王勇，［，陈县君，范昌，集Ｈ韦圆斑病发生与环境关系中药化４２王勇陈畳君冯光泉，等．Ｓ七根腐病与施化关系试验研究．中药材２００７３０（０９）：，，，［］，－１０６３１０６５４３王勇陈畳君杨建忠．几种杀菌剂对Ｈ七黑斑病防效及与Ｈ屯质量关系研巧．文山学［］，，等，２０１３２６－院学报（０６）：４７，，４４王勇．几种生物农药对Ｈ韦黑斑病防效及与Ｈ毛质量关系研究．文山［陈互君，杨建忠，等］，２０＊１４（０３：１４学院学报，）４５．王勇刘云芝陈畳君等．文山三尤疫病病原菌的分离与鉴定文山师范高等专科学校学［］，，，２００７０１）－０７报：１０４１（，－４６．２００７０２１王勇刘云芝陈畳君．Ｈ中药材（）：３４Ｂ６走疫霉病发生相关因子调查，［］，，４７王勇刘云芝杨建忠三击疫病病菌化献ｒａｃａｃｔｏｎ／ｍ生物学特性初步研究．西南，，等［］，巧ｙ如２００８３－农业学报扣：６７１６７４），４８－王勇陆宁范昌．．中药材２００４２７（１１）：８０２Ｈ４：圆斑病防治药剂筛选试验，８０４，，，等，［］２－１４４９．田４：黑斑病的调查．广西植保１９９１（０１）：１［韦继光，陈育新，］－５０．广西ＨＨ．中药材１９％１５（０１）：７８韦继光；：黑斑病调查初报，陈育新，，［］５１韦继光陈育新吴景华，田＾：炭痘病的病原及其生物学特性的研究．广西农学院学报，［］，，９８０８０－１２５１乂（）：３３５陈育新宗做．田走炭痘病的调査和防治试验．广西农学院学报１９９０９，，许靖西，化［３韦继光－０２１７２４（）：５３国平毛忠良姚悦梅等．福尔马林浸种对葫芦种传病害和种子活力的影响．江西农业，［］吴，，２００９０８－学报：１０１１０（）２，［５４］吴文平，张志铭．河北省的炭痕菌属［学位论文］．河北：河北农业大学，Ｗ８８－等．．云七的生物学特性研究进展中药化２０１２３５他）：８３１８３５口引夏鹏国，，崔秀明，韦美腾５６东光．２００１０２；２９［］邢．棚室黄瓜菌核病发生与防治北方园艺（），Ｈ击名称及其有文字记载时间的考证２００００３９－９２５７．广西中医学院学报（）：１徐冬英．，［］８７ ■广西大単项古单位论文广西田－ｆｃ？真苗化病宙的病巧Ｌ、发生规带及巧：爸巧究５８徐良秦言省杨海菊，等．广西靖西县田七种植业发展的现状与展望．广西农业生物科学［］，，，２００７％０１－：７１７５（），＝５９忠秀明陈呈君．连作地王壌处理对走根腐病的控制效果．２０１０［］杨建，崔，，等特产研究，０２－：３７３９（）６０杨友联．：［］．中国贵州、云南、广西炭痘菌属真菌多基因分子系统学研究［学位论文］湖北华中农业大学，２０１０６１喻盛甫罗文富胡先奇．三七根腐病中线虫病原问题的研究．云南农业大学学报１９９８［］，，，等，，１３０３－：２２２５（）防］喻窜河南省炭值菌（Ｃｏ扣幻０的础ｗｍＣｏｒｄａ）分类的研化喻璋论文集，２００２６３曾莉李家瑞．４５％圆斑净可湿性粉剂防治Ｈ走圆斑病田间药效试验．农药科学与管理２００３［］，，，２４－：１３１４似６４张成霞南志标李春杰等．Ｈ种草坪草的种带与主传真菌及杀菌剂拌种的防效．生态学［］，，，２００４０３－报（）：４９５５０２，６５张伟廖静静朱贵李等．８种植物挥发物和浸提液对兰走根腐病菌的抑制活性研究．中国［］，，，农学通报２０１３２９３０）－：１９７２０１，，（６６张玉洁和泽高唐龙山等．三屯根腐病病原抗性真菌的分离鉴定．文山学院学报２０１２［］，，，，，－２５（０３）１３：－６７．２０１１２３张玉洁Ｈ走内生菌分离及抗根腐病病原真菌筛选．北方园艺：１３０１３２，李洪超，（）［］６８浙江省卫生局．浙江省栽培药用植物病虫害防治．：浙江省卫生局１９５２［］杭州，［６９］郑光植，杨崇仁．＿吉七生物学及其应用．北京：科学出版社，１９９４７０Ａｓ－ｌａｍＭＲａｕｔＡＭ．Ｓｔｕｄｅｓｏｎｓｅｅｄｂｏｍｅｆｕｎｉｏｆｗｈｅａｔｉｎｓｉｎｒｏｖｉｎｃｅａｎｄｔｅｉｒｅｆｆｅｃｔ［］ｉｄｈｈ，ｊｐ，ｇｐｏｎｓｅｅｄｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．ＰａｋｉｓａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｏｔａｎ２００５３７ｇｔｙ，（）７１ＡｖｉｌｌａＭＡＢＩＭｅｔａｌｉ．Ｓｏｗ打ｓｅａｓｏｎａｎｄｕａｌｉｏｆｓｏｂｅａｎｓｅｅｄ．ＳｃｉｅｎｔｉａＡｒｉｃｏｌａ２００３，ｔｓ［］，，ｇｑｙｙｇ，，６００２－：２４５２５２（）’７ＢａｄＪＡＪｅｅｒＭＪ．Ｃｏ能沁的ｃ／ｒｗ／Ｍ：ｂｉｏｌｏａ化ｏｌｏａｎｄｃｏｎｔｒｏｌ．ＷａｌｌｉｎｆｂｒｄＵＫ：ＣＡＢ［＾巧，ｇｇｙ，ｐｇｙｇ，ＩｉＵｅｍａｔｉｏｎａｉ１９％，７３ＢａｅｓＪＡＴａ－也ｔｌｏｒＥＫｅｎｏ打ＤＭｅｔａｌ．ＴｈｅａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｅａｌｔｉｍｅＰＣ民化ｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ［］，ｙ：ｙ，ｐｐ，ｄｅｔｅｃｔｉｏ凸ａｎｄｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆ戶幻ｓｅｃｉｅｓｉｎｂａｒｌｅｓｅｅｄ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｑｐｙｇｙ，２００－１０２０１：４９５７，（）７４ＣａｉＬＨｄｅＫＤＴａｌｏｒＰＷｅａｌ．ＡｏｌａｉｃａｒｏａｃｈｆｓｄｉＺ／ｌｔｓｏｒｔｕｎＣｂｅｔｏｆｎｃＡＭ／ｎ．Ｆｕｎａ［］，ｙ，ｙ，ｐｙｐｈｐｐｙｇｇ８８ 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－ｅ真苗性病巧的病原及防－合巧免广巧大单项女学位论文广西田、发生规巧：附录作者在攻读硕±学位期间科研、论文发表等徹ａ一、科研项目＂＂（１）科研项目名称：广西科技重大专项计划广西Ｈ走种植关键技术研究与开发－（桂科重１３５５００１１）＂Ｈ（２）科研项目名称：广西科技重大专项计划＾：良种选育、推广种植关键技术研＂２４００２－究与产业化开发（桂科重１４１１）二、发表论文１周颖江洁．张艳明．竹柏Ｊ江苏农业科学２０１５［］，，，等叶部真菌性病害病原鉴定［］，，４３－１２５１２８．：（巧２周颖继光．．，韦，黄朝贵，等广西田屯病害及其与生态因子关系的调查的南方农［］业学报（已录用）９１
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