ELISA法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义 薛春杨.doc

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1、•医学论坛・ELISA法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义薛春杨，周建波东南大学页学院附属江阴医院检验科，江苏江阴214400摘要:目的探讨ELISA法检测乙肝两对半常见影响因索和临床意义。方法回顾分析ELISA法检测乙肝两対半的检验步骤，总结乙肝两对半检测的影响因素，并炖临床意义进行探讨。结果检验前标本的准备、检验人员的业务水平、检验过程中的标准操作规程、检验结果的研读等是ELISA法检测乙肝乙肝两对半的影响因索，两对半各项指标对临床诊治乙肝具有指导慈义。结论乙肝两对半是乙肝临床治疗依据的垂要指标，ELISA法是检

2、测乙肝的灵敏方法，严格按照操作步骤，加强质量控制，可有效排除影响因素干扰。主题词肝炎，乙型/诊断;肝炎抗侬乙型/分析;肝炎抗原，乙型/分析;酚联免疫吸附测定中图分类号亦262文献标识码3009-6647(2011)16-3913-0237°C10-40min反应彻底完成，底物液受光照会自行变色，显色反应需在避光环境进行。2.4亂色显色是ELISA法测定乙肝两对半中最丿Q温?199-2015ChinacaemicournaElcctiomci^ub1isliin£>乙肝两炖半是诊断、治疗乙肝的有效指标，常用的检测方ELI

3、SA法检测乙肝两对半的影响因素和临床意义进行探讨，为临床诊疗提供参考。1检测前的影响因素1.1标本的影响标本应避免溶血，红细胞破裂可释放过氧化物酶活性物质干扰与显色剂发生显色反应。血块完全收缩使标本中的非特异性活性物质部分或全部失活，若在血液还未开始凝固时强行离心分离血清，ELISA测定过程中可形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果【21。1.2试剂盒的影响试剂盒的质量楚保证实验结果准确性的必耍前提，备厂家的试剂盒灵敏度、特界性、精密度、稳定性和操作简便性有一定的差异。试剂盒保存要求在2〜8°C环境,实验时将试剂盒

4、必须放到室温平衡0.5ho1.3检验人员的影响检验医师应学握ELISA用于乙肝两对半测定的质控方法原理及失控处理原则，熟悉操作中易出现问题的实验环节，学握乙肝两对半各标志物Z间存在意义，正确使川测定仪器及加样器。2检验过程的影响因素2.1加样吸嘴的消洁与否和吸虽的准确性直接影响检测结果，严格执行加样器使用操作规程，向反应孔加标本时应将吸头尖触及到反应孔侧壁下1/3处，决不能污染其他反应孔。放到温育箱前，必须将所加样用振荡器混匀30S以上。2.2温育标本加入板孔后，易产牛边缘效应，抗原抗体结合及酶促反应因酶标板周围与内部

5、孔升降温速率不同，造成周边与内部孔结果差异。干育容易产牛周边效应，即反应板周边孔温度与中间孔温度差界，这样升温速率差会彩响到结果准确性〔3］。在实验操作中应该采取水育使反应孔底部接触到恒温水，尽戢保证整板温度迅速达到温度平衡，减少边缘效应造成的误差。2.3洗板通过洗涤分离结合与未结合抗原抗体复合物及酚标记物,也可以把非特异性吸附蛋白质、血球、细菌中酶等干扰去掉。每次洗板都应使用新鲜制造的蒸馆水或去离子水稀释洗涤剂，防止洗涤液受污染影响洗板效果。冇，温冇使反应孔内的酚标物质辣根酚催化底物牛成有色产3检测结果研读的影响结果

6、判断须在终止液加入后10min内完成，以免出现孔内结晶，影响酚标仪的测试。操作者耍有高度的责任心，确保试剂的质呈及有效期的同时，对于复査后的异常结果应垂新采集标本再予复弈，在整个实验过程中加入外部质控血清进行严格的质量控制。所有复检要有详细记录。4临床意义［勺4.1HbsAg乙肝病毒表面抗原，为已经感染病毒的标志,并不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱。4.2HbsAb乙肝病锚表面抗体，为中和性抗体标志，是是否康复或是否有抵抗力的主要标志。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性,应视为乙肝疫苗接种后正常现彖。4.3HbeAg

7、乙肝病毒e抗原，为病毒复制标志。持续阳性3个月以上则有慢性化倾向。4.4HbeAb乙肝病毒e抗体，为病毒复制停止标志，病毒复制减少，传染性较费，但并非完全没有传染性。4.5HbcAb乙肝病毒核心抗体，为曾经感染过或正在感染者都会出现的标志,核心抗体IGM是新近感染或病每复制标志,核心抗体是感染后就会产生的,对于辅助两对半检査有一定意义。5讨论乙肝是当前严重危害人们身体健康的传染病Z-—，血清两对半检测対乙肝的诊断，病程监测，疗效观察起到了一定的作用，常用的检测方法为ELISA法【5］。但ELISA检测中受到许多因素的影

8、响，如标本留取与处理、加样、孵冇、洗板、显色及结果判读，如不注意可能导致假阳性或假阴性的结果。具体操作中应严格按照操作步骤进行，设立阴阳对照及临界值测定，同时做好室内质控、室间评价，以严谨的工作作风检测每一份标本，对有疑义的检验结果要复查，才能保证检测质量，杜绝假阳、假阴性结果。blouse.Allrightsreserved・h