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1、一、增殖、分化培养基的筛选1材料与方法1.1材料原球茎为实验室培养(MS+4.0mMNAA+10%香蕉)1.2方法1.2.1培养基的配制表1影响因索与水平的设定水平培养基NAA(mg/L)马铃磬提取液1MS00%21/2MS0.2520%3-0.5-表2培养基试验号培养基NAA(mg/l)马铃薯提取液PH重复数11125.801021215.811031325.831042115.811052225.801062315.7910注:10各三角瓶,大瓶4个(容积200ml),小瓶6个(容积100ml);大瓶注入培养基25ml,小瓶瓶屮注入15ml培养基。122
2、接种量超净台上,接入原球茎,接入量如表3所示:表3各瓶接入的原球茎重赧(g)号试小瓶大瓶1234567891010.410.450.410.400.52-0.441.251.171.201.1820.290.410.520.480.320.441.011.051.070.8830.300.400.390.440.420.221.081.020.650.9340.510.540.580.440.290.391.071.211」21.0050.390.360.290.570.460.410.840.971.290.9660.400.400.370.360.400
3、.380.911.490.860.781.2.3指标的确定与结果统计接种后77天统计原球茎重量、分化程度。2结果图1各处理原球茎增殖、分化情况(从左至右处理号依次为:1、2、3、4、5、6)2.1增殖重量表4各瓶的原球茎增殖率(%)、^号大瓶小遍试验冰、12345678910117.07——0.00-57.69-122.73238.40229.91336.67175.42171.45220.56-100.00-80.063—-52.50—・45.45-85.71一340.74126.47173.85—59.664・41.1835.19-13.79・90.91
4、3.45・41.035.61-16.5329.46-80.00-17.6255.13・68.97-84.21-93.48一242.86238.1493.80-6.2555.666————-50.00・76.3252.7526.1726.7467.95-6.14注:表示材料已死亡。2.2分化情况表5各瓶的原球翠分化情况++4H卜+++++++卜+++++++++T卜++++++++++++++5+++++6卄+卄+++卄+注:“+”的数日表示分化程度(综合考虑分化岀芽的数量、叶片数最)。表4所示,人瓶屮的存活率比小瓶屮的存活率高,这与接种量、培养基量有关,小瓶
5、屮培养基水分保持较为困艰增殖率以1号,即MS+20%马铃薯培养基屮最高。从表5可以看出该组的分化情况并非最好。因此在后续试验屮可以选用MS+20%马铃薯培养基为增殖培养基。分化培养基以5号,即l/2MS+0.25mMNAA+20%马铃薯为佳。二原球茎辐照特性第一次辐照辐照吋间:2008年2月29H统计时间:2008年4月11日培养基:1/2MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA统计项存活率20表6不同剂最照射厉原球茎存活率剂量(Gy)各重复存组活率总存活率(%)CK4/4,8/8,8/8,9/9,9/9,5/5100254/7,5/6,5/8,5
6、/7,7/9,6/6,2/570.83503/9,6/7,4/7,1/648.28753/7,3/4,4/562.51003/7,10/13,5/10,4/956.411254/6,1/5,7/7,3/7,10/11,5/6751500/5,1/3,6/12,3/7,2/425.810255075100125150剂量(Gy)图2石斛原球茎的剂最效应〕11
7、线第二次辐照辐照吋间:2008年4月4日统计吋间:2008年6月25日培养基:MS+20%马铃薯统计项存活率00260O280O4O表7不同剂最照射后原球茎存活率剂量(Gy)乞重复存组活率总存活率(%)C
8、K100406/9,6/7,7/11,5/8,5/8,1/7,8/9,4/5,7/8,5/5,7/772.62801/6,0/10,3/5,0/6,0/8,5/6,2/10,0/10,2/4,0/1020.651201/7,4/6,4/7,3/8,3/6,0/8,1/7,5/8,1/6,0/8,0/9,2/9231601/7,0/10,1/6,0/6,6/9,8/9,0/6,0/9,4/9,4/6,6/835.292000/8,0/8,0/9,1/8,2/8,6/9,3/6,4/8,0/8,0/816图3右斛原球茎的剂最效应曲线三石斛抗逆性实验(一)、真菌、
9、细菌返接实验1抗菌实验1.1材料与方法1.1.1材料