石斛组织培养及快繁技术.doc

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1、石斛组织培养及快繁技术石斛兰是近几年在我国插花市场上流行的花卉，种类繁多，花形花姿优美，色彩艳丽，花期较长，具有较高的观赏价值。由于其分株能力弱，繁殖系数低，繁殖速度慢，远远不能满足商品化生产的要求。因此，组织培养和快繁技术是石斛商品化生产中重要的一个环节。石斛属于兰科植物，通过不同的途径都可以形成完整的组培苗，以实现石斛的快速繁殖。野生石斛的茎尖、茎段、叶片、种胚、鳞叶期原球茎、幼根以及根段等均可作为外植体，在适当条件和适当培养基中，就可诱导产生全能性的再生小植株。但以嫩枝的茎尖、腋芽或茎节、花梗诱导成功的可能性较大，而正在生长的芽是最理想的外植体。休眠芽也可

2、用作外植体，但由于体积比较小，剥离较困难，生长也较慢。一、无菌播种石斛兰的种子极为细小，胚胎发育不完全，所谓的胚实际上就是一团未分化的胚细胞，且无胚乳组织，在自然状态下发芽率极低，只有与兰菌共生才能少量发芽，成苗更难，因此不能像其他植物一样在大田或苗床上播种，只有在无菌的补充营养的人工培养基上，促进其萌发成苗。1、种子的采收与播种应用于无菌播种的石斛兰的种子的果实以刚成熟但尚未开裂时效果较好，未成熟时能发芽，但发芽率略低，而如果果实成熟开裂，种子难以收集与消毒，且种子发芽力降低。2、培养基的选择石斛兰的播种培养基多种多样，不同的品种的最适培养基不同，比较常用的基

3、本培养基有MS、改良MS、Nistch、N6、RE等。3、培养基的消毒由于培养基内有丰富营养物质，极适合细菌和真菌的繁殖，造成污染，影响组培的成功，因此培养基消毒是必不可少的一个环节。消毒的方法一般有高温高压消毒和过滤消毒两种方法。二、组织培养1、外植体的采集与灭菌采用花梗为外植体时，由于花梗较光滑，消毒相对容易，污染率较低。采用花芽作外植体时，在花梗再长出、花朵未长成时效果最好。2、培养基的选择和培养以石斛的播种培养为基本培养基再加入适量激素进行茎尖、节、花梗的组织培养均有成功的报道。3、试管苗的移植一般来说，当石斛兰试管苗长出3～4片叶，与3～4条根，高约5

4、cm～10cm后，才可移植于温室，由于在移栽过程中，要适应从无菌状态进入有菌自然状态，从光、温、湿稳定环境中进入不稳定的自然环境，从异养过渡到自养的过程。因此，必须要有一个好的栽培环境，才能保证它们的成活率。三、石斛组培技术存在的一些问题1、石斛组培技术要求较高，操作严格，价格不菲，只有具备了一定的经济和设备条件，才能实现规模化生产，这需要政府和大型企业的参与支持。2、石斛试管苗出瓶后的成活率低，生长缓慢，苗期的管理十分困难，这是目前限制其生产的关键问题。对此，国内许多单位正在开展相关研究，研究内容主要集中在以下三个方面：一是石斛特殊生理需求的机理研究；二是各类

5、养分供应对于苗期石斛生长的作用；三是幼年石斛根系与菌根真菌的共生现象。3、由组培苗长成的石斛与野生石斛相比，药用成分的含量和品质是否发生变化，还须要深入研究；同时，组培阶段各类前体物质的添加与后期药用成分的关系也值得继续探讨。