雷公藤不定根培养体系优化及中试放大研究.pdf

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4、rMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2016OPTIMIZATIONOFCULTURESYSTEMANDPILOT-SCALECULTUREOFADVENTITOUSROOTOFTRIPTERYGIUMWILFORDIIHOOK.F.Major:BotanyResearchfield:SecondarymetabolismofplantNameofPostgraduate:ZhaoLeiAdviser:AssociateProfessorLiYanDateofsubmissio

5、n:May2016YanglingShaanxiChina资助项目：植物源农药创制与应用技术及示范推广“863计划子课题”（No.2011AA10A202）Thisresearchwassupportedbygrants:Botanicalpesticidecreationanddemonstrationandpopularization“863Programsubproject”(No.2011AA10A202).雷公藤不定根培养体系优化及中试放大研究摘要雷公藤系卫矛科雷公藤属多年生攀缘性藤本，其中含有多种生物活性成

6、分如雷公藤内酯醇及生物碱，具有良好的药用价值，同时也是杀虫的活性成分，在我国有悠久的应用历史。本研究以雷公藤不定根为材料，探究了大孔吸附树脂类型和添加量以及H培养基中大量元素浓度对雷公藤不定根生长及次生代谢产物含量的影响，较为系统地从接种大小、培养时间、接种密度和通气速率等方面对雷公藤不定根10L气升式生物反应器培养体系进行了条件优化和筛选，探讨了雷公藤不定根继续放大的可行性和必要性。主要研究成果如下：1．不同型号大孔吸附树脂及其添加量对雷公藤不定根生长及次生代谢产物含量的影响：对XAD-2、XAD-7、HP-20、A

7、DS-8和ADS-F8等5种型号大孔吸附树脂试验发现，XAD-7型大孔吸附树脂对雷公藤不定根中3种次生代谢产物有较高的吸附效率，不仅提高了3种次生代谢产物的含量，对雷公藤不定根的生长也有一定的促进作用。在添加量为5%时收获的雷公藤不定根增长量为1.61gDW，是对照的1.16倍，培养液中内酯醇、吉碱和次碱的含量分别为对照2.57倍、35.77倍和3.31倍，最后收获的3种次生代谢产物总产量分别达到0.57mg/flask、1.08mg/flask和130.47μg/flask，分别为对照的2.04倍、8.60倍和1.6

8、6倍。2．H培养基大量元素浓度及硝铵比优化：研究H培养基中N元素、Ca元素、Mg元素、P元素和K元素等5种大量元素浓度及培养基中硝态氮和铵态氮之比对雷公藤不定根生长及次生代谢产物含量的影响时发现，N元素、P元素和K元素浓度为H培养基标准浓度2倍、Ca元素浓度为2.5倍、Mg元素浓度为1.5倍、硝铵比为9:1时最适宜雷公藤不定根的生