石蒜不定根培养体系的建立及石蒜生物碱成分的研究

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1、分类号：Q58单位代码：10364密级：学号：11720424安徽农业大学学位论文石蒜不定根培养体系的建立及石蒜生物碱成分的研究StudiesonEstablishmentofAdventitiousRootCultureSystemandAlkaloidsofLycorisradiate研究生：陈娜指导教师：张玉琼申请学位类别：理学硕士专业领域名称：细胞生物学研究方向：植物细胞工程所在学院：生命科学学院答辩委员会主席：2014年5月万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究

2、工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方

3、式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：时间：年月日第一导师签名：时间：年月日万方数据石蒜不定根体系的建立及生物碱成分的研究摘要石蒜（LycorisradiataHerb.）是石蒜科(Amaryllidaceae)石蒜属(LycorisHerb.)多年生草本植物，在我国分布普遍。石蒜兼具观赏价值和极高的药用价值。石蒜中主要药用成分为生物碱。生物碱药理作用巨大，它们用于多种疾病的治疗，如镇痛药，抗高血压，抗菌，抗癌，解痉药，镇咳药，祛痰，兴奋剂

4、的特性，等等。本研究以石蒜鳞茎为材料诱导不定根并建立石蒜不定根的培养体系，并对不定根进行切片观察；植物解剖学和组织化学定位及荧光显微镜的综合利用，来探究野生和组培石蒜营养器官的显微结构及生物碱分布规律；利用双向薄层色谱法分离制备生物碱单品，并利用IR鉴定生物碱结构。主要研究结果如下：1.石蒜不定根培养体系的建立。研究了接种量，肌醇含量，盐强度及碳源、氮源对石蒜不定根的生长及生物碱累积的影响。结果表明，石蒜不定根培养的最佳培养基成分为：0.5mg·L-1NAA+1mg·L-1IBA，接种量为6%（W/V

5、），肌醇含量为300mg·L-1,盐强度为1/2MS，石蒜不定根培养的最适碳源为蔗糖，且蔗糖浓度为40g·L-1，总氮含量为30mmol·L-1,NH+-4/NO3为1∶4。2.组培和野生石蒜营养器官结构的观察与比较。成熟的野生根的维管柱一般为六或七原型，而组培根的维管组织形状不规则，木质部辐射角数目不定。成熟鳞叶远轴面薄壁细胞形状较规则，排列较为整齐；组培鳞叶分化尚不完全，维管组织呈带状排列，且形状不规则。3.生物碱定位。在野生和组培石蒜根中，生物碱在表皮、皮层、维管柱中均有分布；鳞叶中主要集中于表

6、皮、远轴面薄壁细胞和维管束；在叶中，生物碱分布于叶肉细胞和维管束，在叶肉中生物碱的分布与叶绿素的分布规律相似。生物碱主要分布于石蒜根、鳞叶、叶片叶肉细胞的维管束，尤其是这些细胞的细胞壁内。4.生物碱单体制备及结构鉴定。乙酸乙酯∶甲醇∶氨水=9∶11∶0.65是双向薄层色谱第一向的最佳流动相，第二向最优流动相为三氯甲烷∶甲醇∶氨水=18∶2∶0.5。双向薄层展开后共分离得到19中生物碱，纯度较高。其中生物碱5经近红外鉴定推测为N-甲基-烟碱酰胺（N-Methylnicotinamide）。关键词：石蒜，

7、生物碱，根培养，营养器官，组织化学定位，双向薄层色谱I万方数据AbstractLycorisradiatebelongstoAmaryllidaceaeandisaperennialherbs,WidelygrowninChina.Lycorishasbothornamentalvalueandhighmedicinalvalue.AlkaloidsarethemainmedicinalingredientofLycoris.Alkaloidsarepharmaceuticalsandusedwide

8、ly,pharmacologicalactivityisdiverse,Theyareusedforthetreatmentofvariousdiseases,justtomention:analgesic,antihypertensive,antibacterial,anticancer,spasmolytic,antitussive,expectorant,stimulantproperties,andmanyothers.Forthestudy,b