丹参不定根组织培养的研究ⅱ碳源、氮源和磷源对丹参不定根培养的影响

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1、中草呜chineseTraditional:ndHerbalnrugs第38卷第6期2007年6月.907。·药材与资源·丹参不定根组织培养的研究(1)碳源、氮源和磷源对丹参不定根培养的影响郭肖红,高文远‘,李克峰(天津大学药物科学与技术学院,天津300072)摘要:目的研究碳源、氮源和磷源对丹参Sal访amilt动八火iza不定根生长及其有效成分丹参酮兀A和原儿茶醛量的影响。方法利用组织培养技术结合HPLC分析手段,通过改变培养基碳源种类和浓度、氮源和磷源浓度,研究其对丹参不定根生长和丹参酮IA、原儿茶醛量的影响。结果碳源、氮源、磷源对于不定根培养是必

2、需的。以蔗糖为碳源,添加309/L蔗糖,培养20d,不定根增殖倍数最高,609/L蔗糖最适合丹参酮IA合成,低质量浓度蔗糖更利于原儿茶醛合成。间歇添加蔗糖至培养25d,不定根增殖率是对照的2.3倍,丹参酮IA量是对照的2.4倍。培养基NH4+和N03一总浓度保持60mmol/L,NH4+/NO3一为1:4、1:4、1:1时分别得到最大的不定根增殖倍数、丹参酮IA和原儿茶醛的量。改变培养基KHZP04浓度时,丹参不定根生长均比对照组旺盛,但高浓度KHZP04抑制了丹参酮IA合成。结论本实验确定了丹参不定根悬浮培养的最佳碳源种类和浓度、氮源比例和磷源浓度,表

3、明不同碳源、氮源和磷源对丹参不定根生长和次生代谢物合成有显著影响。关键词:丹参;丹参酮IA;原儿茶醛;碳源;氮源;磷源中图分类号:R282.13文献标识码:A文章编号:0253一2670(2007)06一0907一05TissuecultureofSalviamiltiorrhizaadventitiousroots(1)Effectsofcarbon,nitrogen,andPhosPhatesourcesoncultureofsalviamilttorrhi之aadventitiousrootsGUOXiao一hong,GAOWen一yuan,LIK

4、e一feng(CollegeofPharmaceuticalsandBiotechnology,TianjinUniversity,Tianjin300072,China)Abstract:0bjectiveTostudytheeffectsofcarbon,nitrogen,andphosphatesourcesonthegrowthofSalviamiltiorrhizaadventitiousrootsandthecontentsoftanshinonelAandprotocatechuica1dehyde.MethodsTheadventitio

5、usrootswereobtainedthroughtissueculturebymanipulationofcarbon,nitro-gen,andphosphatesourcesandthecontentsoftanshinoneIAandprotocatechuicaldehydeweredeter-minedbyHPLC.ResultsCarbon,nitrogen,andphosphatesourceswerenecessaryforthecultureofS.miltiorrhizaadventitiousroots.Thehighestti

6、mesofrootmultiplicationwereachievedatsucroselevelof309/LafterZodculture,609/Lsucroseandlowlevelsucrosewerefavorableforbiosynthesesoftanshi-nonelAandprotocatechuicaldehyde,respectively.ThehighestrootyieldandtanshinonelAcontentonday25wereobtainedbyintermittentsugaraddingduringculti

7、vation,andtheproductionofadventitiousrootsandtanshinonel*wereZ.3一andZ.4一foldcomparedwiththoseofcontrol,respectively.Themaxi-mumrootgrowthrate,contentsoftanshinoneIAandprotocatechuicaldehydewereachievedwhileNH、+-NO3一wasl:4,1,4,andl:1,respectivelywhenconcentrationoftotalnitrogensou

8、rcewaskeptat6ommol/L.Tocomparewiththecon

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