卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及ＤＥＨＰ、ＭＥＨＰ对其增殖功能的影响.doc

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1、卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及DEHP、MEHP对淇增殖功能的影响【摘要】目的：建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系，探讨邻苯二甲酸二（2—乙基）己酯（DEHP）及其活性中间产物邻苯二甲酸单（2乙基）匕酯（MEHP）对原代培养的卵巢颗粒细胞增殖作用的影响。方法：选用21〜25日龄未成年雌性Wistar大鼠，皮下注射孕马血淸（PMSG）,48h后断头处死，收集卵巢颗粒细胞，在DMEMF12培养液中培养。卵巢颗粒细胞原代培养体系建立成功后分别将不同剂量的DEHP（1uM、5uM、25uM、50uM、100uM）和MEHP（lpM、5uM、25口M、50uM、100uM）作用细

2、胞24h及48h,以CCK8法检测细胞增殖情况。结果：DEHP作用卵巢颗粒细胞24h时，luMDEHP和IDOuMDEHP均能明显抑制卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P<0.05）。DEHP作用卵巢颗粒细胞48h时，IuMDEHP和100uMDEHP均能明显促进卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（PV0.05）oWMEHP作用卵巢颗粒细胞24h及48h,MEHP各染毒剂量组均无统计学差异（P>0.05）0结论：DEHP能促进卵巢颗粒细胞增殖，并口和作用时间长短有关。MEHP在观察剂量下，尚未显示有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用。【关键词】DEHP；MEHP；细胞增殖;

3、卵巢颗粒细胞Foundation0fPrimarycu1tura1system0fOVariangranu1osace11sandeffects0fdi(2ethy1hexy1)phthalateandmon0(2ethy1hexy1)phtha1ate0nitsPro1iferationinratsZHANGYumin,MAMingyue,DUANZhiwen,PEIX•1uc0ng,SUXin(DepartmentofToxicology,ShenyangMed1ca1C011ege9shenyang110034,China)A1str；a-ct0b•Ject1v

4、e:Tobui1dtheprimarycu1tura1system0fOVariangranu1osace11s■1nrats9andexp1oretheeffects0fD•1(2ethy1heXy1.)phthalateandMono(2ethy1heXy1)I)h1:ha1at:eonthepro1iferat•10n0fprmarycu1turece11s.Methods：21—25daysw1sterratswereusedwithsubcutane0us•1nJect0nofPMSG,after48h0Var1angranu10sace11swereco1

5、1ectedandcu1tured1ntheDMEM-F12.Afterratgranu10sace11swerePrePared,ce11swereeXp0sedt0d•1fferentdosesof1μM、5μM、25μM、50μM、100μMDEHPand1μM、5μM、25μM、50μM100μMMEHPfor24hor48hresPect1Ve1y9thePro1iferati0nrate0fcellswasanalyzedbyCCK—8assay.Resu1ts：Afterexposedto1&m

6、u;Mand100μMDEHPfor24h,theproliferationrateofce11sdecreasedsignificantly(P<0.05).Afterexposedto1μMand100μMDEHPfor48h9t:hepro1iferat10nrate■1ncreaseds•1gn1f•1cant1v(P<0.05).AftereXp0sedt0MEHPf0r24hand48h,therewasn0s•1gnfcantChange(P>0.05).Conc1us■10n■•DEHPcanenhancethepro1iferat•

7、10n0f0Var•1angranu10sace11s,whichmaybere1atedt0theact•10nt•1me.Underthe0bserVedd0ses0fMEHpt.h'erewasn0effect■1Veness0nthepr01■1ferationofovarianranu[10<;ace11KeywordsDEHP；MEHP；cellproliferation；ovariangranulosacells大鼠卵巢颗粒细胞培养方法的研究始于二十壯纪七十年代初，经不断改进、完善，现已成为研究生殖生理和内分泌等的-•种重要手段［1］。