亚砷酸钠对体外培养的猪卵巢颗粒细胞增殖活性的影响

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1、分类号：0952.5学校代码：10712UDC：591.1研究生学号：2012050448密级：公开级*灶衣林科袄大学2015届攻读颂士学位研究生学位（毕业）论文亚砷酸钠对体外培养的猪卵巢颗粒细胞增殖活性的影响学科专业动物学______研究方向动物生物技术研究生邓红惠指导教师李青旺教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明•.所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德

2、的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：个違时间：许Z月2日导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生所呈交的硕士学位(毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得士研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照

3、学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名：‘时间：年《月j曰关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容^曼权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享

4、受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段

5、保存、汇编论文）研究生签名时间：7°反年6月3日Classificationcode:Q952.5Universitycode:10712UDC:591.1Postgraduatenumber:2012050448Confidentialitylevel:Public_ThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015SODIUMARSENITEINFLUENCESONPROLIFERATIVEACTIVITYINPORCINEGRANULOSACELLSCULTUREDI

6、NVITROMajor:ZoologyResearchfield:AnimalBiotechnologyNameofPostgraduate:HonghuiDengAdviser:Prof.QingwangLiDateofsubmission:May,2015YanglingShaanxiChina亚砷酸钠对体外培养的猪卵巢颗粒细胞增殖活性的影响摘要砷元素是动物体存在的一种微量元素，其有益性和毒性并存，严重影响着家畜的生活环境和健康。目前，砷对家畜生殖方面的研究主要集中在雄性生殖毒性及机理方面，对雌性生殖毒性方面的研究较少，

7、颗粒细胞是卵巢中重要的功能细胞群，在雌性动物生殖活动中扮演重要角色。本试验以体外培养的猪卵巢颗粒细胞(pGCs)为研究模型，为后续繁殖生物学研究选择适合的卵泡来源，并探究亚砷酸钠(NaAsO2)对pGCs增殖凋亡的影响。本试验采用机械法剖剪取得猪卵泡并进行分级，机械十字剪法获得pGCs，台盼蓝染色方法计算细胞活率,倒置显微镜下观察细胞形态，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定体外培养颗粒细胞生长曲线，实时荧光定量方法（qRT-PCR）检测促卵泡刺激素受体基因(FSHR)及促黄体生成素受体基因（LHR）的转录水平表达情况，进一步鉴定

8、颗粒细胞；以合适直径卵泡范围内的卵巢颗粒细胞作为试验对象，人胆囊收缩素-8方法（CCK-8）检测NaAsO2对细胞存活的影响，qRT-PCR方法检测FSHR、LHR、CYP-19、ER1和ER2的转录水平的表达情况；FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况，酶联免疫吸附试验法