结核分支杆菌的检验_PPT.ppt

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1、第二节结核分支杆菌的检验（Mycobacterium）结核杆菌是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官,以肺结核为最多见。一般特性G＋杆菌，偶有分支，抗酸染色；需氧，营养要求特殊，生长大多缓慢；致病多为慢性病变，常有肉芽肿；无鞭毛、无芽胞、无荚膜，不产生外毒素或内毒素，其致病性与菌体成分有关；分类：分支杆菌属主要有3种：结核分支杆菌（M.tuberculosis）牛分支杆菌（M.bovis）禽分支杆菌（M.avium）一、形态染色1.形态细长,着色不匀,排列成分枝索状2.抗酸性染色（结核杆菌为红色，其他细菌为蓝色）。结核分支杆菌牛

2、分支杆菌禽分支杆菌致病性人++++++++-牛++++++家禽--++++豚鼠++++++++-家兔-++++++++染色革兰氏染色阳性；抗酸染色阳性（结合杆菌为红色，其他细菌为蓝色）形态染色在陈旧培养基或干酪变性病变组织，菌体可见分支。病灶组织中，菌形比较一致，单个，成双，间或成丛。无荚膜，无芽胞。细长、正直或微弯杆菌，长1.5~4um,宽0.2~0.6um比结核分支杆菌短而粗具有多形性，可呈杆状、球菌状、链球状。培养特性专性需氧，营养要求严格，最适pH6.5~6.8，最适温度37~37.5℃，在含有鸡蛋、血清、牛乳、马铃薯和

3、甘油（牛型菌除外）易于生长。1~2周开始生长，3~4周才能旺盛发育。生长速度居中最慢较快42℃发育--+硝酸盐还原+--尿素酶++-烟酸形成性+--甘油促进生长+-+抗原性具有相同的抗原性具有单独的抗原结构抵抗力含大量类脂和蜡质成分，抵抗力较强，干痰中可存活6~8个月；对湿热抵抗力弱(60℃30min)，对低温抵抗力强，射线可影响其活力（阳光直射4h可杀灭）。一般消毒剂对其杀菌力不大，链霉素、环丝氨酸、异烟肼、对氨水杨酸、利福平为常用药。禽分支杆菌结核分支杆菌禽分支杆菌结核分支杆菌肺结核(TEMx48,185)牛型结核杆菌M.b

4、ovisBCG二、培养特性1.营养要求高；2.需氧，加6%8%CO2可促进生长；3.生长缓慢。三、抵抗力1.强的方面:抗干燥；抗酸、碱或染料；抗一般化学试剂。2.弱的方面:怕热、怕酒精、怕阳光。四、致病性1.感染途径(1)呼吸道为主(2)消化道(3)破损皮肤粘膜2.致病作用(1)在细胞内寄生且顽强增殖(2)菌体成分致病：脂类、蛋白质和多糖质脂类，含量愈高毒力愈强。肺结核——肺组织3.可通过呼吸道、消化或皮肤损伤侵入易感机体,其中肺结核为最多。慢性纤维空洞性肺结核干酪样肺炎粟粒性肺结核五、免疫性1.以细胞免疫为主,与变态反应同时

5、存在。2.传染性免疫(带菌免疫)。六、微生物学检验标本的采集根据病变部位的不同，可采取痰、胸腹水、尿、脑脊液、粪、分泌物及组织等。痰最好是清晨第一口痰，尿为清晨中、后段。标本的处理用4%的硫酸或3%的盐酸处理20min或4%氢氧化钠30min。痰,尿,脑脊液,粪便等，直接涂片，萋-尼二氏染色法。抗酸性细菌能抵抗含酸酒精脱色作用，而染为红色，非抗酸性细菌和组织细胞被盐酸酒精脱色，美蓝复染成蓝色。分离培养：初次分离常用潘曲吉尼氏培养基、青霉素血液琼脂等。初次培养的可疑菌落（抗酸染色阳性）移植于改良Herrold培养基上进行传代。结核

6、分枝杆菌一般生长较慢，需2~4周才能发育好，菌落呈干燥、不规则、坚硬表面呈粗糙的颗粒状。动物试验：豚鼠腹腔或皮下接种0.5ml，经2~3周局部淋巴结肿大、变硬，逐渐变成溃疡，有脓性排出物，始终不愈合。5~6周后病变扩展至全身，动物因衰弱而死。全身淋巴结、肝、脾、肺均有弥漫性结核结节。变态反应诊断法：我国常用皮内法和点眼法，可检出95~98%的结核病牛。七、防治原则1、防——接种卡介苗（1月龄免疫，20天产生抗体，可维持1~1.5年）。2、治——抗结核药,联合用药。链霉素，利福平,环丝霉素等。患者休息，增加营养，供给新鲜空气，补充

7、维生素A、C、D等。