高效液相色谱法.ppt

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1、作业一：高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）：利用小粒径（3~10um）为固定相和压力泵输送流动相，使分离效率和分析速度明显提高的液相色谱法。与气象色谱法比，不受被测样品挥发性和热稳定性的限制，使用与大部分的有机药物的分析检测，且其流动相的选择范围较大，可以更有效的控制盒改善分离条件，提高分离效率基本原理不同的组分在固定相和流动相之间具有不同的作用特性。而造成差速迁移后被分离。所以，不同的固定相与流动相的结合就构成了不同的分离体系，从而形成了不同的高效液相色谱分离方法。药物分析较常使用的有液-固吸附色谱法和液-液

2、分配色谱法液-固吸附色谱法固定相：吸附剂为硅胶或氧化铝流动相：极性较小的有机溶剂（如烷烃）分离基础：不同组分与吸附剂之间的“吸附于解吸附”作用大小固定相：通过化学键合反应合成的，表面键合有不同有机基团的刚性颗粒基础：不同组分在两相间的分配作用大小。根据流动相的不同可分为正相色谱法（流动相极性<固定相极性）和反向色谱法（流动相极性>固定相极性）液液分配色谱正相色谱法固定相一般为氰基（-cn）和氨基（-NH2）键合相。主要用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型化合物。反向色谱法典型的固定相：十八烷基硅烷键合相常用的

3、流动相：甲醇-水和乙腈-水不同比列混合体系高效液相色谱仪高效液相色谱法定性鉴别方法色谱保留鉴别法：以色谱保留值为基础通过对比北侧组分与对照品的保留时间是否一致，或将对照品与被测样品混合后进样，考察对应的色谱峰是否增大即可鉴别分离后化学鉴别法：对色谱分离后收集的被测组分，利用专属性化学反应再进行“离线”鉴别两谱联用鉴别法高效液相色谱/二极管陈列光谱联用仪高效液相色谱/质谱联用仪高效液相色谱法的应用药物鉴定中，常用于克拉霉素，利福平滴眼液，岗梅何等7钟冬青树中草药，南北五味子的鉴别杂质检查中，盐酸噻吩喏啡，奥沙西洋原料药

4、及共片剂，盐酸喹那普利原药，氟他胺中有关物质的检查定量检测内标法：在一系列不同浓度对照品溶液中加入相同量的内标物，分别测定其峰面积，以对照品峰面积与内标物峰面积的比值对对照品浓度作线性回归，求出线性回归方程或绘制工作曲线，一般要求线性系数应大于0.99，再测定供试液与内标物的峰面积比值，并由回归直线得出其浓度，最后计算出组织中待测浓度外标法：先测定一系列不同浓度对照品峰面积，以峰面积对其浓度作线性回归，求出线性方程或绘制工作曲线，一般要求线性系数应大于0.99，再测定供试液的峰面积，并由回归直线得出其浓度，最后计算出

5、组织中待测物的浓度