边做边学大肠杆菌的接种与分离培养.ppt

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1、欢迎各位专家同行莅临指导(2017高考江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有______________。（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加______

2、__。（3）如图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。考查培养基的成分考查菌种的接种培养考查培养基的种类考查平板划线法(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________。管号123456苯酚浓度(mg/L)1考查系列稀释操作邳州市第二中学苏传梅一轮复习之专题：微生物的分离与培养考纲要求：1.微生物的分离与培养（B）考查内容：1.培养基的制备2.微生物的接种技术3.微生物的分离考查形式：多结

3、合微生物代谢的特点,考查微生物的分离与培养的相关内容营养要素来源功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3等无机碳源能为微生物的代谢提供碳元素的物质有机碳源糖类、石油、花生粉饼等__________碳源氮源无机氮源N2、NH3、NO3-、NH4+等能为微生物的代谢提供氮元素的物质有机氮源蛋白质、氨基酸、尿素、________、________等生长因子__________、__________等能为微生物的代谢提供特殊营养物质1.培养基的营养要素：碳源、氮源、无机盐、水、生长因子等。有机牛肉膏蛋白胨维生素碱基活动一：培养基2．培养基分类和应用划分标准培

4、养基种类特　点用　途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如__________观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、________化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长_____________鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物琼脂活菌计数培养，分离出特定的微生物3.培养基的配制：（1

5、）配制原则：目的明确；营养协调；PH适宜。（2）配制过程：讨论：1．牛肉膏比较黏稠，如何将称量好的牛肉膏倒入烧杯中？2．琼脂加入烧杯后，为何要不断搅拌？3．调节PH和灭菌，溶化这三个步骤的顺序是？活动二：倒平板归纳：倒平板时如何防止杂菌污染？全部操作需在酒精灯火焰旁；锥形瓶口迅速通过火焰；培养皿盖打开一条刚能让锥形瓶口通过的缝隙；平板冷凝后，将平板倒置。活动三：纯化大肠杆菌常用的方法有和。1.平板划线法：指用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过____________而纯化分离微生物的一种方法。平板划线法稀释涂布平板法分区划线平板划线法接种时要

6、注意哪些？划线时用力大小，适当防止用力过大将培养基划破；划线时注意不要将最后一区的划线与第一区相连；在灼烧接种环之后，一定要等其冷却后再进行划线；在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。2.稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的____________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成________________。具体步骤包括和。梯度稀释单个菌落系列稀释操作涂布平板操作【链接高考】1.（2018高考江苏卷）酵母的蛋白质

7、含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废中醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题:（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的_________，及时对培养基进行分装，并进行_________灭菌。（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约_________（在25℃、50℃或80℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。（3）挑取分离平板中

8、长出的单菌落，按步骤④进行划线。下列叙述合理的_________。（多选）a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应