《边做边学 大肠杆菌的接种与分离培养》导学案2

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1、《边做边学大肠杆菌的接种与分离培养》导学案课前自主导学知识1手提式高压灭菌锅1.实验室常采用的灭菌方法实验室常利用高温处理达到灭菌效果，包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。2．手提式高压灭菌锅的使用使用步骤包括：加水―→装锅―→加热排气―→保温保压―→出锅等。思考交流1．高压灭菌锅是依赖高压灭菌吗？【提示】　不是，是通过高压来提高湿热的温度灭菌的。知识2配制培养基1.培养基的概念为人工培养微生物而制备的，提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。2．培养基的类型(1)天然培养基含义：是指采用动植物组织或微生物细

2、胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成的培养基(2)合成培养基含义：是指由准确称量的分析纯等高纯度化学试剂加蒸馏水配制而成的培养基3．培养基的成分各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质。思考交流2．在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗？为什么？【提示】　不能，微生物不能分解琼脂。知识3接种微生物1.接种的概念指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。2．不同接种工具的使用(1)穿刺接种要用接种针。(2)斜面划线接种或平板划线接种要用到接种环。(3)涂抹平板接种要用到玻璃刮铲。知

3、识4大肠杆菌的接种与分离培养1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤①配制培养液；②调节pH至7.2；③分装：培养基的高度约为试管长度的1/5；④包扎；⑤灭菌：高压蒸汽灭菌是常用的灭菌方法；⑥搁置斜面：待试管冷却至50℃左右，斜面长度不超过试管总长的1/2。思考交流3．牛肉膏蛋白胨能培养病毒吗？为什么？【提示】　不能，因为病毒只能进行活细胞寄生生活。2．斜面接种和培养大肠杆菌(1)斜面接种的主要目的有菌种转移、扩大培养、保存纯净菌种等。(2)具体操作步骤准备接种―→接种环灭菌―→试管口灭菌―→挑取少许菌体―→划线接种―→培养

4、大肠杆菌―→低温保存。思考交流4．通常在酒精灯火焰附近接种微生物的原因是什么？【提示】　酒精灯火焰附近的局部高温使得微生物不能存活。正误判断1．牛肉膏蛋白胨培养基主要用于培养酵母菌。(×)【提示】　主要用于培养细菌。2．接种是将微生物接入培养基后再灭菌。(×)【提示】　接种是在无菌条件下将微生物接入培养基。3．通常认为消毒是一种部分灭菌的方法。(√)4．肉眼看到的一个菌落肯定是由一个大肠杆菌生长和繁殖形成的。(×)【提示】　不一定，有可能是由几个没有分离开的大肠杆菌形成的。课堂互动探究探究1培养基中各营养要素的作用及

5、配制原则【问题导思】　①培养基中碳源、氮源、水和无机盐的来源和作用是什么？②培养基的配制应遵循哪些原则？1．培养基的成分营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质①无机化合物：CO2、NaHCO3②有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物①无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐②有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生

6、物大分子结构的稳定无机盐为微生物提供除碳、氮元素以外的各种重要元素细胞内的组成成分，生理调节物质；某些化能自养菌的能源，酶的激活剂名师点拨1．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是单一方面的作用。2．有些微生物需添加特殊营养物质，原因是它们自身缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。例1　下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是(　　)A．操作顺序为配制培养液、调节pH、分装、包扎、搁置斜面、灭菌B．在配制培养基过程中要加入琼脂作为凝固剂C．将培养基冷却至

7、50℃左右时进行搁置斜面D．可以用3%的HCl或NaOH溶液调节培养液的pH【审题导析】　该题的解题关键是配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤。【精讲精析】　选项分析判断A操作顺序为配制培养液―→调节pH―→分装―→包扎―→灭菌―→搁置斜面B固体培养基在配制时需添加琼脂作凝固剂C待试管冷却至50℃左右，将试管口部枕在高约1cm的木条上，使其自然倾斜D根据实际情况用质量分数为3%的HCl或NaOH溶液调节培养基的pH【答案】　A变式训练1．分析有关微生物的资料，回答问题。(1)1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆

8、菌。幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为。(2)如图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在条件下不能生长。(3)下表是某培养基的配方成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3琼脂蒸馏水含量10g0.2g0.2g0.2g0.2g5g3