边做边学大肠杆菌的接种与分离培养.docx

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1、微生物的分离及培养1．下列无菌操作中，错误的是(　　)A．无菌操作的目的是防止杂菌污染B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭答案　D解析　对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。2．下列是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5g10g5g

2、20g[来源:中

3、国教

4、育出

5、版网]1000mL(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、____________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是__________________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行__________处理。该培养基从物理性质上分类属于____________。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和____________________。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片

6、，可能的原因是什么？(列举两项)________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案　(1)氮源　牛肉膏和蛋白胨　灭菌　固体培养基　(2)平板划线法　稀释涂布平板法　(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到

7、了其他微生物的污染(任选两个)解析　培养基中都应含有水、无机盐、碳源和氮源。配制培养基时加入了琼脂，因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调pH和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源。分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线时接种环上残留的菌种；采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高，否则会使微生物不能分散成单个细胞。