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时间：2020-01-21
《实验一 酪蛋白制备.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生物化学实验2009生物化学实验规则实验前必须认真预习实验内容实验过程中认真按照实验步骤和操作规程进行实验、保持安静结束实验做好各自的卫生工作，由指导老师同意，签字之后方可离开实验室(公用、个人）安排值日生（8次）及时整理实验报告实验一牛乳中酪蛋白的制备实验目的：学习蛋白粗提方法。相关知识点：蛋白的特性与蛋白的分离纯化、牛乳中的成分、酪蛋白的特性。实验重点：利用等电点原理分离牛乳酪蛋白。分离纯化的一般流程获得蛋白质溶液分离蛋白或浓缩蛋白纯化蛋白纯度鉴定机械、化学方法破细胞壁等电点沉淀、盐析有机溶剂离子交换、凝胶过滤、亲和电泳、毛细管电泳、HPLC（本次实验仅用乙醇）牛乳乳清蛋白酪
2、蛋白等电点（pH）溶解性（有机溶剂）酪蛋白纯品杂蛋白操作步骤4ml牛奶调节pH加入4mLpH4.7缓冲液，摇匀离心（一人一支）水洗涤（4ml、3次、4000rpm、5min）醇洗涤（4ml乙醇离心一次、再加4ml乙醇用玻棒搅匀，倒入漏斗中滤干，60℃）称重，计算（预先称滤纸重量，小数点后两位恒重）保存样品（2ml离心管，写上学号）离心机的使用平衡！20位同学一组电泳分离后，凝胶上的蛋白质可以被染色（考马斯亮蓝可以与蛋白质结合）SDS-PAGE示意图logMr=K-bX，Mr－分子量X－迁移率k、b－常数
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