酪蛋白检测实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划酪蛋白检测实验报告　　一．实验原理　　蛋白质浓度的测定　　考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高敏感性。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色，最大吸收峰在465nm。当他与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色，其最大吸收峰改变为595nm。考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高敏感性。　　在一定范围内，考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物呈色后，在595nm下，吸光度与蛋白质含量呈线性关系。故可用于蛋白质浓度的测定。二．实验设备与试剂

2、　　设备：普通离心机，721型分光光度计试剂：标准蛋白液三．实验材料　　新鲜绿豆芽四．实验内容　　1.标准曲线的制备　　取9支干净的试管，按表进行编号并加入试剂。　　2.样品蛋白的测定　　样品蛋白液制备　　准确称取2g新鲜绿豆芽胚轴的部分，研磨成匀浆，离心分离。取上清液用%nacl定容到10ml。含量测定　　另取两只干净的试管，加入样品液，和考马斯亮蓝染液，目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个

3、人素质的培训计划　　混匀。室温静置3min，与波长595nm处比色，读取吸光度。五．实验结果　　1.　　标准曲线　　结果如表所示，并以吸光度为纵坐标，个标准液含量为横坐标做标准曲线。　　2.样品蛋白含量的测定　　样品蛋白的比色结果如表，根据直线方程求出每支试管中蛋白质含量。　　样品蛋白的体积　　蛋白质含量=测定时取样的体积　　称取样品的重量　　六．结果与讨论　　结果：绿豆芽蛋白质含量=/g讨论：　　1.试液为混合均与就取样2.量取溶液时读数有误差3.读取A值时有读数误差4.比色杯中的误差　　根据公式求出样品绿豆芽蛋白质含量　　实验一蛋白质分子的测定─凝胶层析法　　一、实验原理

4、目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　凝胶层析法是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法。将凝胶颗粒在适宜溶剂中浸泡，使充分吸液膨胀，然后装入层析柱中，加入欲分离的混合物，再以同一溶剂洗脱，在洗脱过程中大分子不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙最先流出柱外，小分子可以进入凝胶内部，流苏缓慢，一直最后流出柱外，从而使样品中分子大小不同的物质得以分离。　　凝胶是由胶体溶液凝

5、结而成的固体物质，不论是天然凝胶还是人工合成凝胶，其内部都具有很微细的多空网状结构。凝胶层析法常用的天然凝胶是琼脂糖凝胶，人工合成的凝胶是聚丙烯酰胺凝胶和葡聚糖凝胶。其中葡聚糖凝胶是具有不同孔隙度的立体网状结构的凝胶，不溶于水。　　将凝胶装柱后，柱床体积称为“总体积”，以Vt表示。Vt由Vo，Vi与Vg三部分组成，即Vt=Vi+Vg+Vo。Vo为“孔隙体积”、“外水体积”，即存在于柱床内凝胶颗粒外面空隙之间的水相体积；Vi为内体积，即凝胶颗粒内部所含水相的体积；Vg为凝胶本身体积；Ve为洗脱体积，即自加入样品时算起到组分最大浓度出现时所流出的体积，Ve与Vo及Vi之间的关系为

6、：Ve=Vo+KdVi，；Kd为样品组分在二相间的分配系数，Kd=(Ve-Vo)/Vi，有效分配系数为Kav，Kav=(Ve-Vo)/(Vt-Vo)。　　在一般情况下，凝胶对组分没有吸附作用时，当流动相流过Vt体积后，所有的组分都应该被洗出来，这一点为凝胶层析的特点，与一般层析方法不同。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　Ve与分子量的关系：对同一类型的化合物，洗脱特性与组

7、分的分子量有关，流过凝胶柱时，按分子量大小顺序流出，分子量大的走在前面。Ve与分子量的关系为：Ve=K1-K2logM，K1与K2为常数，M为分子量，通常用Kav代替Ve，建立标准蛋白质分子式量LgM与Kav的标准曲线，称为“选择曲线”。在允许的工作范围内，曲线越陡，则分级越好，而工作坊为越窄。凝佼层析主要决定于溶质分子的大小，每一类型的化合物，如球蛋白类，右旋糖酐类等都有它自己的特殊的选择曲线，可用以测定未知物的Mr，测定时以使用曲线的直线部分为宜。　　二、试剂材料　　[试剂]　　1、标准蛋白质：蓝色