实验二 食物抗坏血酸含量的测定.ppt

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1、实验二食品中抗坏血酸含量测定食物中抗坏血酸有还原型和脱氢型两种形式，两者可通过氧化还原互变，均具有生物活性，合称为总抗坏血酸。通常抗坏血酸在酸性条件下以还原型存在，易氧化成脱氢型抗坏血酸。目的：新鲜食物中的抗坏血酸主要以还原型形式存在，测定还原型抗坏血酸可粗略了解该食品中抗坏血酸的浓度。通过本实验的学习，使学生掌握还原型抗坏血酸的测定原理及其测定方法。一、还原型抗坏血酸的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）实验原理用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液；用已标定的抗坏血酸溶液标定2,6-二氯酚靛酚染料，再用此染料滴定样品中的抗坏血酸。3

2、C6H6O6+KIO3→C6H4O6+KI+3H2OH0-C=C-OH具有强还原性，极容易被氧化，能把+5价的碘还原成-1价的碘离子用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O滴定样品标定溶液【实验仪器与试剂】1.仪器：组织捣碎机、5.0ml微量滴定管、100m1容量瓶、50m1具塞量筒。2.试剂(1)1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。(2)0.01mol/L碘酸钾标准储备液：(3)0.0001mol/L碘酸钾标准应用液：(4)1%淀粉溶液：(5)6%碘化钾溶液：(6)抗坏血酸溶液：(7)碳酸氢

3、钠溶液：(8)2,6-二氯酚靛酚溶液：【操作步骤】(1)标定抗坏血酸标准溶液：吸取抗坏血酸溶液(20μg/m1)5.0m1于锥形瓶中，加入6%碘化钾溶液0.5m1，1%淀粉溶液3滴，再以0.000lmol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为蓝色。V1－滴定时所消耗0.001mol/L碘酸钾溶液的体积(ml)V2－所取抗坏血酸溶液的体积(ml)0.0528－0.0001mol/L的碘酸钾1.0ml相当于抗坏血酸0.0528mg(2)标定2,6-二氯酚靛酚溶液：取已标定的抗坏血酸溶液5.0m1，1%草酸溶液5.0m1于锥形瓶中，摇匀，用

4、欲标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至呈淡红色，15s不褪色为止。C－抗坏血酸溶液的浓度(mg/ml)V1－抗坏血酸溶液的体积(ml)V2－滴定时消耗的2,6-二氯酚靛酚的体积(ml)2.样品测定(1)取样品100g剪碎后置捣碎机中，按1:1(w/v)加入2%草酸制成匀浆。(2)称取匀浆10g于小烧杯中，倒入50m1具塞量筒中，用1%草酸溶液冲洗烧杯，稀释至刻度，振摇。如有泡沫影响定容可加数滴戊醇。2.样品测定(3)将振摇后上层清液约20m1倒入100m1锥形瓶中，加白陶士一勺，振摇数次，使充分脱色，静置。同时，取一锥形瓶，加入

5、1%草酸20m1，加白陶士一勺，振摇数次作为空白。(4)取静置后上清液过滤，吸取滤液5.0m1，以标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定，至溶液呈淡红色，l5s内不变化，记录染料的用量。【实验计算】式中：V0－空白实验消耗的染料体积(m1)V1－滴定样品消耗的染料体积(ml)T－单位体积的染料相当于抗坏血酸的质量(mg/ml)W－滴定时所用样品的质量(g)注意事项