果蔬中抗坏血酸含量的测定[1]

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1、果蔬中抗坏血酸含量的测定摘要：分别采用２，６－二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法和紫外分光光度法测定果蔬中抗坏血酸的含量，通过对比研究，优选出测定果蔬中抗坏血酸含量的方法为分光光度法。关键词：抗坏血酸；果蔬；测定方法抗坏血酸（ａｓｃｏｒｂｉｃaｃｉｄ，ａａ）也称ｖｃ，是维持人体健康的一种重要物质。人体所需的ｖｃ大多数由水果、蔬菜及食品供给［１］。人体长期缺乏抗坏血酸会得坏血病、关节疼痛、牙龈出血、发炎、感染、身体骨骼易损伤且不易愈合等疾病，而过量摄入ｖｃ不仅不能抵御疾病，而且还可能缩短寿命［２－４］。这是因为ｖｃ能够破坏ｄｎａ自由基，这种破坏会

2、导致早衰和癌症。因此，对果蔬中抗坏血酸含量的定量分析具有重要的意义。ｖｃ含量的测定方法很多。一般有２，６－二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法、紫外分光光度法、库仑分析法、原子分光光度法和碘量法等［５－１０］。本研究采用２，６－二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法和紫外分光光度法测定果蔬中抗坏血酸的含量，然后通过对比分析，确定测定果蔬中抗坏血酸含量的最优方法。１材料与方法１．１locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang

3、,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame仪器与试剂紫外分光光度计（美国安捷伦）；岛津分析天平（日本岛津）；ｓｈｂ－循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；微量移液器（上海安亨微量进样器厂）。２．０％（ｗ／ｖ，下同）偏磷酸溶液；标准抗坏血酸；０．０２ｍｏｌ／ｌｅｄｔａ溶液；高锰酸钾；２，６－二氯靛酚钠。以上试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。１．２样品的处理选

4、取新鲜的西红柿和黄瓜洗净、擦干，称取约１００ｇ至研钵中，捣碎，加入１００ｍｌ２．０％偏磷酸浸提剂，迅速捣成匀浆，用纱布过滤至烧杯中，然后抽滤。取滤液转移至１０００ｍｌ容量瓶中，用浸提剂定容，备用。１．３样品的检测１．３．１紫分光光度法校准曲线的绘制：配制一系列抗坏血酸标准溶液，浓度分别为１．００、２．００、４．００、６．００、８．００、１０．００μｇ／ｍｌ。以２％偏磷酸为参比，在波长２４３ｎｍ处用石英皿测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光度。以吸光度值（ａ）对抗坏血酸浓度（ｃ）绘制校准曲线。线性回归方程ａ＝０．０７０１５ｃ－０．００５３，r２=

5、０．９９９５。结果表明，抗坏血酸浓度在１．００～１０．００μｇ／ｍｌ范围内吸光度值与浓度之间呈良好的线性关系。样液的测定：用２％偏磷酸为参比，在波长２４３ｎｍ处测定样液的吸光度。将待测样品的吸光度值代入回归方程，则可得样品中抗坏血酸的浓度，进而可按式（１）计算出样品中抗坏血酸的含量ｘ（ｍｇ／１００ｇ）。ｘ＝ａ×ｃｖ×１００／ｍlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwin

6、emasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame（１）其中：ｍ为样品重量，ｇ；ａ为稀释倍数；ｖ为提取液体积，ｍｌ。１．３．２高锰酸钾法配制ｋｍｎｏ４标准溶液：称取１．６ｇｋｍｎｏ４溶于１０００ｍｌ水中，煮沸１５ｍｉｎ，冷却，贮存于棕色试剂瓶中，浓度为０．０１ｍｏｌ／ｌ；用ｎａ２ｃ２ｏ４标定后为０．０１０１６ｍｏｌ／ｌ。样液的测定：移取配制好的试样溶液２５．００ｍｌ于２５０ｍｌ锥形瓶中，加入１ｍｌ０．０２ｍ

7、ｏｌ／ｌ的ｅｄｔａ溶液，５ｍｌ３ｍｏｌ／ｌ硫酸溶液，摇匀后在棕色滴定管中用高锰酸钾标准溶液滴定至呈微红色，３０ｓ不退色即为终点。两者的反应方程式：２ｍｎo■■＋５ｃ６ｈ８ｏ６＋６ｈ＋＝２ｍｎ２＋＋５ｃ６ｈ６ｏ６＋８ｈ２ｏ，可按式（２）计算出样品中抗坏血酸的含量ｘ（ｍｇ／１００ｇ）。ｘ＝ａ×ｃｖ×ｍ×５／２×１００／ｍ（２）式中：ｃ、ｖ分别为ｋｍｎｏ４标准溶液的浓度和滴定用去的体积；ｍ为抗坏血酸的摩尔质量。１．３．３２，６－二氯靛酚钠法测定２，６－二氯靛酚钠的滴定度：吸取２５ｍｌ２，６－二氯靛酚溶液于１００ｍｌ锥形瓶中，摇匀，用浓度为１．０

8、ｍｇ／ｍｌ抗坏血酸标准溶液滴定至溶液呈粉红色１５ｓ不退色为止［１１］。按式（３）计算其滴定度：ｔ＝ｃ×ｖ／ｖ１locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthe