不同品种荔枝叶多糖的提取及含量比较.pdf

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1、第26卷第1期广东石油化工学院学报V01．26No．12016年2月JournalofGuangdongUniversityofPetrochemicalTechnologyFebruary2016不同品种荔枝叶多糖的提取及含量比较范芳，翁楚垒(广东石油化工学院环境与生物工程学院，广东茂名525000)摘要：利用酶解提取法、Sevag法脱蛋白、乙醇析出法对茂名地区三种荔枝(白腊、三月红、黑叶)的荔枝叶多糖进行了初步提取，通过苯酚一硫酸法对提取物中的多糖质量进行了测定，并对不同的荔枝叶多糖的质量进行了比较。结果表明，这三种

2、荔枝的荔枝叶多糖质量由多到少依次为：白腊>三月红>黑叶。关键词：荔枝叶；多糖；提取；比较中图分类号：TQ281文献标识码：A文章编号：2095—2562(2016)01—0028—03荔枝是亚热带果树，常绿乔木，盛产于中国华南和西南等地，尤以广东和福建南部、台湾栽培最盛。现代研究表明，荔枝具有抗氧化、延缓衰老、降血糖、降血脂、抗肿瘤及调节造血功能等生理作用，初步确定活性多糖是荔枝多种生理功能的重要物质基础之一。茂名地区荔枝产量占全国60％以上，而荔枝叶目前为止还没有被利用起来，因此，本研究旨在对不同品种的荔枝叶多糖进行提

3、取并比较其含量，为充分利用荔枝叶废弃物提供理论依据。1材料与方法1．1材料与设备从茂名荔枝园采摘白腊、三月红、黑叶三种荔枝叶；无水葡萄糖、苯酚、浓硫酸、氯仿、无水乙醇、正丁醇，均为分析纯。可见分光光度计(V一50000型，上海元析仪器有限公司)；旋转蒸发器(RE一2000A，上海亚莱生化仪器厂)；循环水式多用真空泵(SHB—III型，郑州长城科工贸有限公司)；数显恒温振荡器(THZ一82B型，金坛市盛威试验仪器厂)；电动离心机(80—2型，常州奥华仪器有限公司)；电热恒温鼓风干燥箱(DHG一9246A型，上海精宏实验设备

4、有限公司)；电子天平(FA12084型，上海精密科学仪器有限公司)；数显恒温水浴锅(HH一4型，常州奥华仪器有限公司)；冰箱(BCD一231E型，伊莱克斯(中国)电器有限公司)；九阳料理机(JYL—D051型，九阳股份有限公司)。1．2试验方法1．2．1荔枝叶多糖的提取1)酶解提取。称取荔枝叶粉末6og，平均分为三组，各加入0．3g(占荔枝叶粉末质量的1．5％)的纤维素酶，然后加入200mL的蒸馏水(料液质量比1：10)，放入水浴锅中在6o温度下水浴2h。把水浴后得到的样品用纱布(3至4层)把液体跟固体分开。把取得的液体

5、在4℃下静置24h后，在转速为4000dmin的离心机上离心20min。取上清液后重复离心两至三次L1J。2)Sevag法脱蛋白。按照25：4：1的质量比在上述清液中分别加入氯仿和正丁醇，以36℃的温度在摇床里激烈摇晃30min，然后把摇晃后得到的样品以4000r／min的转速离心20min，去上清液。再重复脱蛋收稿13期：2016—01—11；修回日期：2016—01—29基金项目：茂名市科技计划项目(0130320)作者简介：范芳(1977一)，女，湖南隆回人，硕士，实验师，主要研究方向为天然产物的提取及活性研究。第

6、1期范芳等：不同品种荔枝叶多糖的提取及含量比较29白的步骤两至三遍，就可以得到脱蛋白后的糖液l2]。3)浓缩。把经过脱蛋白处理的样品糖液用旋转蒸发器在60℃、35r／rain的条件下进行浓缩，当浓缩液约为样品糖液体积的1／2时停止。4)乙醇沉淀(醇沉)。向经过脱蛋白处理且经过浓缩后的糖液中加入4倍体积的乙醇(质量分数为90％)，摇匀后在4℃的温度下静置24h。把静置后的糖液以4000r／min的转速离心20min，除去上清液，洗净烘干后得到荔枝叶多糖的初步提取物，经过称量后可得出其质量[3]。1．2．2多糖质量的测定1)

7、标准曲线的绘制。准确吸取质量浓度为O．04mCrnL的标准葡萄糖溶液各0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2mL至具塞试管中，加蒸馏水至2rIlL，再加1IIlL质量分数为5％的苯酚，彻底混匀后加入5mL浓硫酸，再次彻底混匀后在沸水中水浴30min，迅速冷却至室温并静置20rain。以空白试剂作为参比液进行对照，测定各溶液的吸光度，用紫外分光光度法于490nln处测定吸光度A值。以葡萄糖质量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线l4J。2)多糖质量的测定。准确称取三种荔枝叶多糖提取物10Illg，于100mL

8、容量瓶中加蒸馏水定容至刻度，混匀后各吸取1．0mL于具塞试管中，分别加入蒸馏水至2rnL，再加入1mL质量分数为5％的苯酚，混匀后加入5mL浓硫酸，再次充分混匀，在沸水中水浴30min后，迅速冷却至室温并静置20min。以蒸馏水为空白对照，用紫外分光光度法于490nnl处测定粗多糖样品的吸光度A值，每种荔枝叶多糖提取