保健食品中原花青素的测定

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1、保健食品中原花青素的测定1 范围 本方法规定了保健食品中原花青素的测定方法。 本方法适用于保健食品中原花青素的含量测定。 本方法最低检出量为3μg，最低检出浓度为3μg/mL。 本方法最佳线性范围：3～150μg/mL。 2  原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。原花青素本身无色，但经过用热酸处理后，可以生成深红色的花青素离子。本法用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子。计算试样中原花青素含量。 3 试剂3.1  甲醇 分析纯。3.2  正丁醇 分析纯。3.3  盐酸 分析纯。3.4  硫酸铁铵 NH4Fe（SO4）2

2、·12H2O溶液：用浓度为2mol/L盐酸配成2%（w/v）的溶液。3.5  原花青素标准品  葡萄籽提取物，纯度95%。 4 仪器4.1 分光光度计4.2  回流装置 5分析步骤5.1   试样的制备5.1.1 片剂 取20片试样，研磨成粉状。5.1.2  胶囊 挤出20粒胶囊内容物，研磨或搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤出。5.1.3  口服液摇匀后取样。5.2  提取5.2.1  粉状试样 称取50—100mg试样置于50mL容量瓶中，加入30mL甲醇，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，离心或放置至澄清后取上

3、清液备用。5.2.2  含油试样  称取50mg试样置于小烧杯中，用20mL甲醇分数次搅拌，将原花青素洗入50mL容量瓶中，直至甲醇提取液无色，加甲醇至刻度，摇匀。5.2.3  口服液 吸取适量样液（取样量不超过1mL）置于50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。5.3  测定5.3.1 标准曲线  称取原花青素标准品10.0mg溶于10mL甲醇中，吸取该溶液0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5mL置于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。各取1mL测定。与试样测定方法相同。5.3.2 试样测定  将正丁醇与盐酸按95:5的体积比混合后，

4、取出6mL置于具塞锥瓶中，再加入0.2mL硫酸铁铵溶液和1mL试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，在加热完毕15min后，于546nm波长处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。显色在1小时内稳定。 6  分析结果表述试样中原花青素测定结果按（1）式计算6.1计算：                        m1×v×1000           X（%）=———————————×100...........(1)                       m×1000×1000 式中： X—试样

5、中原花青素的百分含量 g/100g；       m1—反应混合物中原花青素的量 μg；       v—待测样液的总体积；       m—试样的质量mg。6.2   结果表示计算结果保留三位有效数字。 7 技术参数   相对标准偏差：＜10%    回收率：84.6－94.4%。