保健食品检验与评价技术规范》2003版中“保健食品中原花青素的测定.doc

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1、《保健食品检验与评价技术规范》2003版中“保健食品中原花青素的测定原花青素含量测定方法1、    原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。原花青素本身无色，但经过用热酸处理后，可以生成深红色的花青素离子。本方法用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子。计算试样中原花青素含量。2、    试剂2.1甲醇  分析纯2.2正丁醇  分析纯2.3盐酸  分析纯2.4硫酸铁铵  NH4Fe(SO4)2•12H2O溶液：用浓度2mmol/l盐酸配成2%（w/v）的溶液。2.5原花青素标准品  葡萄籽提取物，纯度95%3、    仪器3

2、.1分光光度计3.2回流装置4、分析步骤4.1试样的制备4.1.1片剂  取20片试样，研磨成粉状。4.1.2胶囊  挤出20粒胶囊内容物，研磨或搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤出。4.1.3口服液摇匀后取样。4.2提取4.2.1粉状试样  称取50-100mg试样置于50ml容量瓶中，加入30ml甲醇，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，离心或放置至澄清后取上清液备用。4.2.2含油试样  称取50mg试样置于小烧杯中，用20ml甲醇分数次搅拌，将原花青素洗入50ml容量瓶中，直至甲醇提取液无色，加甲醇至刻度，摇匀

3、。5.2.3口服液  吸取适量试样（取样量不超过1ml）置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。4.3测定4.3.1标准曲线  称取原花青素标准品10.0mg溶于10ml甲醇中，吸取该溶液0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5ml置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。各取1ml测定。与试样测定方法相同。4.3.2试样测定  将正丁醇与盐酸按95︰5的体积比混合后，取出6ml置于具塞锥瓶中，再加入0.2ml硫酸铁铵溶液和1ml试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，在加热完毕15min后，于546nm波长

4、处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。显色在1小时内稳定。5、    分析结果表述试样中原花青素测定结果按（1）式计算5.1计算：      m1×v×1000X(%)＝            ×100………………………………（1）      m×1000×1000式中：X—试样中原花青素的百分含量，g/100g；m1—反应混合物中原花青素的量，ug；v—待测样液的总体积，ml；m—试样的质量，mg5.2结果表示计算结果保留三位有效数字。6、    技术参数相对标准偏差：＜10%