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《鲈鱼CPT I基因cDNA的克隆【毕业设计】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、本科毕业设计（20__届）鲈鱼CPTI基因cDNA的克隆摘要:肉毒碱棕榈酰转移酶（carnitinepalmitoyltransferases,CPT,EC.2.3.1.2）在脂酸的β-氧化中起重要作用，线粒体内细胞质一侧的脂酰CoA由肉毒碱棕榈酰转移酶转移酶Ⅰ催化与肉碱结合形成脂酰肉碱，脂酰肉碱通过线粒体内膜的移位酶的作用穿过线粒体内膜，进入线粒体。在线粒体内基质的一侧的肉毒碱棕榈酰转移酶转移酶Ⅱ的催化下，脂酰肉碱上的脂酰基又转移到CoA上，重新形成脂酰CoA,成为β-氧化的底物。因此CPTI对鱼类多种代谢过程都有重要的调节作用，它不仅参与脂类代谢的某些酶的代谢，
2、还会影响某些脂肪细胞的生长、分化甚至凋谢。在鱼体中脂肪的含量和组成是影响鱼肉口味的主要因素。本实验通过逆转录PCR获得鲈鱼肝中CPTI基因核心片段，测序后，其大小为1023bp。使用cDNA末端快速扩增（5’-and3’-RapidAmplificationofcDNAEnds,RCAE）技术成功克隆出鲈鱼（Lateolabraxjapomcus）CPTI3’末端序列，其大小为1292bp，将核心序列和3’末端序列拼接后得到大小为2162bp拼接体，经分析此序列能翻译560个氨基酸，包含有480bp的3’端非翻译区，但是未成功克隆出5’末端序列。本课题对今后深入研究
3、脂肪代谢的相关因素，改善鱼类的肉质和口味都有重要的意义，也能为将来研究CPTI基因的功能打下了必不可少的基础，最终为鲈鱼的最优养殖做指导。关键词:鲈鱼；RT-PCR；CPTI；肝；RACE技术Abstract:Carnitinepalmitoyltransferases(CPT,EC.2.3.1.2)playsanimportantroleintheβ-oxidationofthefattyacid.TheAcylCoAwhichintheoutercytoplasmicsideofmitochondriabindwithcarnitinetoformacylcar
4、nitine.ThisprocessiscatalyticedbycarnitinepalmitoyltransferasesI(CPTI).Thentheacylcarnitinegothroughthemitochondrialmembraneintothemitochondriaundertheacylcarnitinetranslocase.WiththecatalyticedbycarnitinepalmitoyltransferasesII(CPTII),OntheacylcarnitineandacyltransfertoCoA,there-forma
5、tionofacylCoA,asubstrateofβ-oxidation.Therefore,CPTIhasanimportantroleintheregulationinvivoofavarietyofmetabolicprocesses,whichnotonlyinvolvedincertainmetabolicenzymesofthelipidmetabolism,butalsoaffectedthegrowthofcertainfatcells,differentiation,andevendie.Thefatcontentandfattyacidcomp
6、ositionofthefishisamajorfactorcontributiontothefavorofthefish.Inthisstudy,weobtainedCPTIgenecorefragmentsinliverofLateolabraxjapomcusAbstractbyreversetranscriptionPCR,itssizeis1023bp.CloneofCPTI3’terminalsequencegenebySMARTerRACEcDNAamplificationaftersequencedandit’s1292bp,Thespliceres
7、ultof3’terminalsequenceandcoresequenceofCPTIis2162bp,thereisa480bp3’untranslatedregion,butwecouldn’tclonethe5’terminalsequencegene.ThestudyisbenefittounderstandtherelevantfactorsforfatmetabolismandimprovethequalityandtasteofL.japonicus,andalsolayafoundationforthestudyofthefunctionofC
