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1、猴头菌提取物抗氧化活性探究分别米用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基T-苦月井基(DPPH)分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清除?0H、DPPH?和0-2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?0H、DPPH?和0-2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?0H、DPPH?和0-2?的清除能力依次为DPPH?、？0H和0-2?,并且在一定浓度范围内，清除率与浓度成正比。猴头菌；清除自由基；抗氧化活
2、性人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性,但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌(Inonotusobliquus)中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分(多酚类化合物)。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganodermalucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食
3、用菌的猴头菌(Hericiumerinaceus）是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?0H、2,2-二苯基-1-苦月井基自由基（DPPH?）及0-2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的利用提供理论依据。1材料与方法1.1材料猴头菌（H.erinaceus）子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。1.2主要试剂与仪器柠檬酸、Na2HP04、N
4、aH2P04、六氤合铁酸钾（铁氤化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeS04?7H20、30%H202溶液、水杨酸、无水乙醇、95%乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infiniteM200PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU公司）。1.3提取物的制备1.3.1水提物干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取50g粉末，加1L蒸馆水超声20min,过滤，滤液减压浓缩，反复3次,合并浓缩液，转至蒸发皿中，60工水浴蒸干，备用。
5、1.3.2醇提物同样称取50g猴头菌子实体粉末，加1L95%乙醇超声20min,过滤，其它操作步骤同1.3.1。1.4母液制备将猴头菌醇提物和水提物配制成20mg/mL,作为供试母液。维生素C作为阳性对照，称取一定量的维生素C定容到浓度为1mg/mL,作为对照母液，避光4°C保存。1.5DPPH溶液的配置精密称取19.7mgDPPH,用无水乙醇溶解并定容于250mL容量瓶中，DPPH浓度为2X10-4mol/L,避光4°C保存。1.6总还原力测定按照参考文献［5］操作进行总还原力测定。1.7?0H自由基清除活性测定以SMIRONF
6、F等［6］的Fenton法为基础加以改进，向试管中分别加入2、4、6、8、10、12、14、18mg/mL不同浓度样品2mL,然后依次加6mmol/L的FeSO4溶液2mL,2.4mmol/L的H202溶液2mL,摇匀，静置10min,再加入6mmol/L的水杨酸溶液2mL摇匀，37水浴30min,1016g离心10min,取上清液于510nm处测吸光度(A)值，以维生素C作为阳性对照。清除率S=[1-(Ai-Aj)/A0]X100%AO：以纯水替代样品的空白对照；Ai：反应液的A值;Aj：以纯水替代水杨酸时提取液自身的A值1.8
7、DPPH自由基清除活性测定采用DPPH分析法，根据参考文献[7、8]研究方法加以改良，测定了提取物抗氧化活性。将1niL样品加入1mL的2X10-4mol/LDPPH无水乙醇溶液，摇匀,避光放置30min,于517nm处测定其A值，以维生素C作为阳性对照。清除率S=[1-(Al-Aj)/A0]X100%A0：以纯水替代抗氧化剂的DPPH溶液的A值；Ai:加了抗氧化剂后DPPH溶液的A值；Aj：以无水乙醇替代DPPH溶液的抗氧化剂溶液的A值1.90-2?自由基清除能力测定采用改良的邻苯三酚自氧化法[9]。首先根据下列公式计算邻苯三酚
8、自氧化率。邻苯三酚自氧化率=(A4min—Almin)/3A4min为第4分钟的A值，Almin为第1分钟的A值然后测定加样后邻苯三酚自氧化率：操作方法同上，加入邻苯三酚前分别加入2、4、6、8、10、12、14、18mg/mL不同浓度猴头菌水提物
