正交实验法优选洋参御糖丸最佳水提工艺探究

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1、正交实验法优选洋参御糖丸最佳水提工艺探究摘要：采用正交试验法对洋参御糖丸的水提工艺进行筛选研究，以芍药中芍药昔的提取率作为考查指标，采用高效液相色谱法测定含量。最佳工艺为A3B1C3,所得提取液中芍药昔含量最高。关键词：洋参御糖丸；工艺研究；芍药昔；高效液相色谱法中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1673-7717(2007)12-2446-02洋参御糖丸由西洋参、天花粉、黄竄、龟板、玉竹、马梅、葛根、麦冬、山茱萸、女贞子、白芍等药组成，具有益气补肾、滋阴生津、活血通络之功。它是以民间验方为基础,结合历代著名医家治疗消渴病证的经验和大量的文献资料拟订而成，也是笔者

2、多年临床实践的经验。本文采用正交设计法，考察加水量、煎煮时间及煎煮次数三者之间交互作用对提取效果的影响，以芍药昔含量为指标，确定洋参御糖丸中水提取部分最佳提取工艺。1•仪器与试剂岛津高效液相色谱仪(210型泵，210检测器)，N2000色谱工作站。实验用药购自哈尔滨市松茂药行，经鉴定符合《中国药典》2000年版规定。芍药昔由中国药品生物制品检定所提供。色谱条件：色谱柱为symrntryC18(250mmX4.6mm,5um),以甲醇：水(30：70,体积比)为流动相，流速为ImLmin,检测波长为230nm,柱温为25°C。2.实验方法2.1工艺流程根据处方中药材的理化性质

3、及要求，确定工艺路线，见图lo2.2正交设计一般认为水煎煮两次即可把主要有效成分提出，并可煎出所含成分的80%以上；浸泡时间为60min,可提高煎出效率。本试验根据工艺选定黄英等药水提取的煎煮时间、加水量和煎煮次数考察的3个因素，各取3个水平，以芍药昔含量为考察指标，选用L934正交表进行试验。见表1。2.3指标测定法2.31样品制备根据正交试验表设计，按处方量称取芍药等干燥药材9份，每份50g,用恒温电热套按照表1分9组同时煎煮，过滤，滤液加75%乙醇50mL,醇沉24h后，上清液经0.45gum微孔滤膜滤过后，吸取5mL用甲醇定容于50mL容量量瓶中（供测试芍药昔用）o

4、2.3.2对照液制备精密称取在12CTC时减压干燥至恒重的芍药昔对照品6.96mg,加甲醇定容于10mL量瓶中，即配标准溶液。2.3.3标准曲线的制作精密吸取对照品混合溶液10、20、30、40、50uL注入高效液相色谱仪。以峰面积积分值为纵坐标，对照品量为横坐标绘制标准曲线，并进行线性回归，计算标准曲线的回归方程为：Y=2X106X-155153,—019992。线性范围为：0.6960〜3.4797yg。2.3.4稳定性试验本品经甲醇提取后，供试液分别在1、2、3、5、8h后测定，考察其稳定性，RSD为1.29%。2.3.5精密度试验取处理后的同一样品，按含量测定方法重

5、复测定5次，测定芍药昔的峰面积RSD为0.56%。2.3.6重现性试验精密称取同一样品5份，按样品溶液的制备和测试方法测定，RSD为1.23%（n=5）。2.3.7样品测定吸取各浓度混合溶液10uL注入高效液相色谱仪。测定峰面积，按标准曲线法计算样品水煎液中芍药昔的相应含量，结果见表2,方差分析见表3。3.讨论本研究结果是以提取物中芍药昔含量为评价指标。实验结果表明，影响本研究提取物的因素（加水量A、煎煮时间B、煎煮次数C）,统计分析知A、c因素对检测指标具有显著性影响，因素B对检测指标影响不大。工艺优选结果表明，3个因素的最佳组合为A3B1C3。因此，洋参御糖丸水提正交试

6、验的最佳工艺条件为每次加12倍量水、煎煮比、水煎煮3次。