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1、布氏镜检查丁酸钠影响HT作者：刘成霞张尚忠刘宗印黄丽华张孝卫【关键词】多功能透射显微镜（布氏镜）；丁酸钠；HT【摘耍】目的观察丁酸钠对结肠癌HT29细胞形态和生物学特性的影响。方法多功能透射显微镜（布氏镜）动态观察丁酸钠作用前后HT29细胞的生长状态、细胞运动及贴壁过程的变化。结果丁酸钠5minol/L作用24h后，HT29细胞数量明显减少，细胞巢变小，巢内细胞数减少;细胞变成圆形，细胞人小趋于一致；细胞核内染色质呈块状聚集，折光性降低，呈现出凋亡细胞形态；贴壁过程明显变缓。结论丁酸钠可以改变HT29的生长
2、状态，抑制其生长；布氏镜可以动态地观察药物作用前后培养细胞的形态、微细结构及运动的变化，是一项先进的、具有实用价值的检查技术。【关键词】多功能透射显微镜（布氏镜）；丁酸钠；HT29细胞株【Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofsodiumbutyrateontheappearanceandbionomicsofcoloncancerlineHT29.MethodsViewingtheeffectofsodiumbutyrateondifferencesofthe
3、growth,aswellasthecellmovement,andtheadherenceprocedureofHT29withbradfordvariableprojectivemicroscopy(BVPM).ResultsAfter24hoursofcoincubationofHT29andsodiumbutyrate(5mmol/L),itwasshowedthattheamountofIIT29decreased,thecellnestsshrank,andthecellpopulationof
4、eachcellnestdiminished;mostoftheHT29changedintoglobular,andthebulkofHT29lookedwelldistibuted;chromatingathereduneven,andtherefractionweaken,manyofthemlookedasapoptosiscells;adherenceprocedureofHT29steppeddownobviously.ConclusionSodiumbutyratemayinhibitHT29
5、growthandmonitoringthechangesofculturedcellsincytomorph,finestructureanditsmovementconsecutivelywithBVPMisanadvancedandpracticalexaminationtechnique・[Keywords]brafordvariableprojectivemicroscopy(BVPM),sodiumbutyrate,HT29cellline对肿瘤细胞进行体外培养，同时给予药物干预是目前研究和筛选
6、抗肿瘤药物的主要方法之一。但关于药物对培养的活体肿瘤细胞形态、结构的动态变化研究尚未见报道。木研究应用布氏镜対丁酸钠作用前濟HT29细胞形态和微细结构的变化进行动态图像扫描与分析，清晰地观察到HT29细胞形态学和生物学行为的动态变化和丁酸钠对肿瘤细胞的影响。1材料和方法1.1布氏镜(bradfordvariableprojectivemicroscopy,BVPM,可变投射显微镜的简称)BVPM15型，美国生物公司生产。1・2细胞株结肠癌HT29细胞株，购自山东省医学科学院。1.3药物和标本制备1.3・1丁
7、酸钠(SodiumButyrate):购于Sigma公司，用PBS配制成01mol/L的储存液，4°C保存备用。临用前用培养液稀释成实验所需浓度。132细胞培养方法和标本制备：将15mmX15mm大小的盖玻片经常规泡酸、清洗、高压消毒处理后备川。结肠癌HT29细胞培养于含10%小牛血清(杭州四季青生物制品公司)的RPMI1640(Hyclone),在37°C、5%的C02、饱和湿度的培养箱中培养。取对数生长期的细胞，用025%的胰蛋白酶消化，用含10%小牛血清的RPMI1640培养液制成单细胞悬液，调整细胞
8、浓度为5X104/mlo将细胞接种到预先放置盖玻片的培养皿屮，每孔接种6mlo置37°C、5%C02恒温培养箱中培养3d,待细胞接近长成单层，更换培养液，加入丁酸钠，使终浓度为5mmol/L,对照组加入等量的PBSo经丁酸钠作用24h后，终止培养。取出盖玻片，布氏镜观察。2结果2.1丁酸钠対HT29细胞生长状态的影响常规培养24h观察，处于対数生长期的HT29细胞呈巢状生长，巢内细胞密集，细胞间连接紧密，细胞界限
