布氏镜检查丁酸钠影响ht论文

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1、布氏镜检查丁酸钠影响HT论文刘成霞张尚忠刘宗印黄丽华张孝卫【关键词】多功能透射显微镜(布氏镜)；丁酸钠；HT【摘要】目的观察丁酸钠对结肠癌HT２９细胞形态和生物学特性的影响。方法多功能透射显微镜(布氏镜)动态观察丁酸钠作用前后HT２９细胞的生长状态、细胞运动及贴壁过程的变化。结果丁酸钠5mmol/L作用24h后，HT２９细胞数量明显减少，细胞巢变小，巢内细胞数减少；细胞变成圆形，细胞大小趋于一致；细胞核内染色质呈块状聚集，折光性降低，呈现出凋亡细胞形态；贴壁过程明显变缓。结论丁酸钠可以改变HT２９的生长状态，抑制其生长；

2、布氏镜可以动态地观察药物作用前后培养细胞的形态、微细结构及运动的变化.freelbutyrateontheappearanceandbionomicsofcoloncancerlineHT２９．ＭethodsViebutyrateondifferencesofthegroovement,andtheadherenceprocedureofHT２９icroscopy(BVPM).ＲesultsＡfter24hoursofcoincubationofHT２９andsodiumbutyrate(5mmol/L),itounto

3、fHT２９decreased,thecellnestsshrank,andthecellpopulationofeachcellnestdiminished;mostoftheHT29changedintoglobular,andthebulkofHT２９lookedatingathereduneven,andtherefractionanyofthemlookedasapoptosiscells;adherenceprocedureofHT２９steppeddobutyratemayinhibitHT２９groonit

4、oringthechangesofculturedcellsincytomorph，finestructureanditsmovementconsecutivelyinationtechnique.【Ｋeyicroscopy(BVPM),sodiumbutyrate,ＨＴ２９cellline对肿瘤细胞进行体外培养，同时给予药物干预是目前研究和筛选抗肿瘤药物的主要方法之一。但关于药物对培养的活体肿瘤细胞形态、结构的动态变化研究尚未见报道。本研究应用布氏镜对丁酸钠作用前后HT２９细胞形态和微细结构的变化进行动态图像扫描与分析

5、，清晰地观察到HT２９细胞形态学和生物学行为的动态变化和丁酸钠对肿瘤细胞的影响。1材料和方法1．１布氏镜(bradfordvariableprojectivemicroscopy,BVPM,可变投射显微镜的简称)BVPM１５型，美国生物公司生产。１．２细胞株结肠癌HT２９细胞株，购自山东省医学科学院。１．３药物和标本制备1．３．１丁酸钠(SodiumButyrate):购于Sigma公司，用PBS配制成01mol/L的储存液，4℃保存备用。临用前用培养液稀释成实验所需浓度。132细胞培养方法和标本制备：将15mm×15m

6、m大小的盖玻片经常规泡酸、清洗、高压消毒处理后备用。结肠癌HT２９细胞培养于含10%小牛血清(杭州四季青生物制品公司)的RPMI1640(Hyclone),.freell。将细胞接种到预先放置盖玻片的培养皿中，每孔接种6ml。置37℃、5%CO２恒温培养箱中培养3d，待细胞接近长成单层，更换培养液，加入丁酸钠，使终浓度为5mmol/L，对照组加入等量的PBS。经丁酸钠作用24h后，终止培养。取出盖玻片，布氏镜观察。2结果2．１丁酸钠对HT２９细胞生长状态的影响常规培养24h观察，处于对数生长期的HT２９细胞呈巢状生长，巢

7、内细胞密集，细胞间连接紧密，细胞界限不清。细胞巢较大，多见80～１００个细胞组成的大细胞巢。巢内细胞呈梭形或长圆形，细胞大小悬殊，可见处于不同分裂期的细胞及双核、多核细胞，细胞表现出活跃的生物学状态。丁酸钠5mmol/L作用24h后观察，细胞明显减少，细胞巢变小，巢内细胞数多在20～４０，巢内细胞松散，单个细胞界限清楚。视野内几乎见不到梭形细胞，细胞变成圆形，细胞大小趋于一致。２．２丁酸钠对HT２９细胞形态的影响正常培养24h观察，处于对数生长期的HT２９细胞核大，核浆比例可达1∶１，部分细胞表现为核浆比例倒置。细胞核形

8、状、大小不一，核仁清晰，核内染色质丰富，积聚于核膜周围。丁酸钠5mmol/L作用24h后观察，细胞核内染色质呈块状聚集，折光性降低，呈现出凋亡细胞形态。正常培养的HT２９细胞膜表现为明显的不规则性，细胞呈不定形。每个细胞可见20～３０个胞质突起，呈指状、球状或不规则形，可见伪足的形成及迅速变形，形态多样、多变。丁酸钠