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1、XX大学毕业论文布氏镜检查丁酸钠影响HT姓名：2014年6月25日布氏镜检査丁酸钠影响HT作者：刘成霞张尚忠刘宗印黄丽华张孝卫【关键词】多功能透射显微镜(布氏镜)；丁酸钠；HT【摘要】目的观察丁酸钠对结肠癌HT29细胞形态和生物学特性的影响。方法多功能透射显微镜(布氏镜)动态观察丁酸钠作用前后HT29细胞的生长状态、细胞运动及贴壁过程的变化。结果丁酸钠5mmol/L作用24h后,HT29细胞数量明显减少，细胞巢变小，巢内细胞数减少；细胞变成圆形，细胞大小趋于一致；细胞核内染色质呈块状聚集，折光性降低，呈现出凋亡细胞形态；贴壁过程明显
2、变缓。结论丁酸钠可以改变HT29的生长状态，抑制其生长；布氏镜可以动态地观察药物作用前后培养细胞的形态、微细结构及运动的变化，是一项先进的、具有实用价值的检查技术。【关键词】多功能透射显微镜(布氏镜)；丁酸钠；HT29细胞株【Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofsodiumbutyrateontheappearanceandbionomicsofcoloncancerlineHT29.MethodsViewingtheeffectofsodiumbutyrateondifference
3、softhegrowth,aswellasthecellmovement,andtheadherenceprocedureofHT29withbradfordvariableprojectivemicroscopy(BVPM).ResultsAfter24hoursofcoincubationofHT29andsodiumbutyrate(5mmol/L),itwasshowedthattheamountofHT29decreased,thecellnestsshrank,andthecellpopulationofeachcell
4、nestdiminished;mostoftheHT29changedintoglobular,andthebulkofHT29lookedwelldistibuted;chromatingathereduneven,andtherefractionweaken,manyofthemlookedasapoptosiscells;adherenceprocedureofHT29steppeddownobviously.ConclusionSodiumbutyratemayinhibitHT29growthandmonitoringth
5、echangesofculturedcellsincytomorph,finestructureanditsmovementconsecutivelywithBVPMisanadvancedandpracticalexaminationtechnique.[Keywords]brafordvariableprojectivemicroscopy(BVPM),sodiumbutyrate,HT29cellline对肿瘤细胞进行体外培养，同时给予药物干预是0前研究和筛选抗肿瘤药物的主要方法之一。但关于药物对培养的活体肿瘤细胞形态、结构的
6、动态变化研究尚未见报道。本研究应用布氏镜对丁酸钠作用前后HT29细胞形态和微细结构的变化进行动态图像扫描与分析，清晰地观察到HT29细胞形态学和生物学行为的动态变化和丁酸钠对肿瘤细胞的影响。1材料和方法1.1布氏镜(bradfordvariableprojectivemicroscopy,BVPM,可变投射显微镜的简称)BVPM15型，美国生物公司生产。1・2细胞株结肠癌HT29细胞株，购自山东省医学科学院。1.3药物和标木制备1.3.1丁酸钠(SodiumButyrate):购于Sigma公司，用PBS配制成01mol/L的储存液
7、，4°C保存备用。临用前用培养液稀释成实验所需浓度。132细胞培养方法和标本制备：将15mmxl5mm大小的盖玻片经常规泡酸、清洗、高压消毒处理后备用。结肠癌HT29细胞培养于含10%小牛血清(杭州四季青生物制品公司)的RPMI1640(Hyclone),在37°C、5%的CO2、饱和湿度的培养箱中培养。取对数生长期的细胞，用025%的胰蛋□酶消化，用含10%小牛血清的RPMI1640培养液制成单细胞悬液，调整细胞浓度为5x104/ml。将细胞接种到预先放置盖玻片的培养皿中，每孔接种6mlo置37°C、5%CO2恒温培养箱屮培养3d
8、,待细胞接近长成单层，更换培养液，加入丁酸钠，使终浓度为5mmol/L,对照组加入等量的PBS。经丁酸钠作用24h后，终止培养。取出盖玻片，布氏镜观察。2结果2.1丁酸钠对HT29细胞生长状态的影响常规培养24h观察，处丁•对数生长期
